菲牛蛭消化系統(tǒng)組織結(jié)構(gòu)及其相關(guān)功能的研究.pdf

1、本文以具有很高藥用價(jià)值和養(yǎng)殖潛力的菲牛蛭 Poecilobdella manillensis為研究對(duì)象，系統(tǒng)地研究了菲牛蛭消化系統(tǒng)的形態(tài)結(jié)構(gòu)、組織學(xué)和組織化學(xué)以及消化系統(tǒng)內(nèi)消化酶與堿性磷酸酶的分布、理化性質(zhì)，并測(cè)定了不同養(yǎng)殖水溫對(duì)菲牛蛭幼蛭生長(zhǎng)的影響，從而為菲牛蛭自然資源的保護(hù)、人工養(yǎng)殖的推廣、人工餌料的配置提供一些理論的依據(jù)，同時(shí)也可以加深對(duì)菲牛蛭基礎(chǔ)生物學(xué)知識(shí)和消化生理的認(rèn)識(shí)。主要研究結(jié)果如下：
　　1、菲牛蛭消化系統(tǒng)由消化管

2、和單細(xì)胞唾液腺組成。消化管包括口、咽、食道、嗉囊、腸、直腸和肛門(mén)。
　?。?）口開(kāi)孔于前吸盤(pán)腹中部，口腔內(nèi)有3片呈三角形排列的顎片，顎片由輻射肌和橫紋肌構(gòu)成，其脊上具單列細(xì)齒，可切開(kāi)寄主皮膚。單細(xì)胞唾液腺開(kāi)口于顎片兩側(cè)的乳突上，可分泌蛭素；
　?。?）咽呈短球形，由黏膜層、肌層和外膜構(gòu)成，肌層發(fā)達(dá)；
　　（3）食道短而窄，黏膜層見(jiàn)少量杯狀細(xì)胞和大量嗜酸性顆粒；
　?。?）嗉囊兩側(cè)有10對(duì)側(cè)盲囊，最后一對(duì)側(cè)盲囊最長(zhǎng)

3、且延伸至肛門(mén)兩側(cè)；
　?。?）腸部尚無(wú)明顯分化，可細(xì)分為腸和直腸。腸前段腔內(nèi)有多個(gè)盲囊狀的細(xì)管，形成“腸內(nèi)盲囊”，黏膜層具較多腺細(xì)胞，黏膜下層發(fā)達(dá)，具豐富的血管和淋巴細(xì)胞；
　　（6）直腸腸腔明顯大于腸的腸腔，褶皺高度明顯比腸的低，上皮細(xì)胞間可見(jiàn)少量杯狀細(xì)胞。
　　2、AB-PAS染色結(jié)果顯示菲牛蛭消化管黏液細(xì)胞有4種類(lèi)型：Ⅰ型被染成紅色，Ⅱ型被染成藍(lán)色，Ⅲ型染成紫紅色，Ⅳ型染成藍(lán)紫色?？谇徊筐ひ杭?xì)胞分布以Ⅳ型和Ⅲ型為

4、主，少量Ⅱ型與Ⅰ型黏液細(xì)胞，咽部以Ⅲ型為主，食道、嗉囊、腸前部以及直腸壁均無(wú)酸性和中性黏液細(xì)胞存在，腸中后部以Ⅰ型為主，肛門(mén)壁存在大量的Ⅱ型黏液細(xì)胞。
　　3、菲牛蛭消化酶及堿性磷酸酶分布與活性具體結(jié)果：
　?。?）無(wú)論在飽食或饑餓狀態(tài)，菲牛蛭食道內(nèi)消化酶活性顯著低于其他部位(P＜0.05)，堿性磷酸酶活性大小順序均為腸＞嗉囊＞直腸。
　?。?）飽食狀態(tài)下，三種消化酶活性大小順序均為腸＞直腸＞嗉囊，其中腸中蛋白酶活性是

5、直腸的3.98倍，是嗉囊的23.29倍。
　　（3）饑餓狀態(tài)下，蛋白酶與脂肪酶活性大小順序?yàn)槟c＞直腸＞嗉囊，淀粉酶則為嗉囊＞腸＞直腸，腸與嗉囊中脂肪酶活性＞蛋白酶。
　　（4）蛋白酶和堿性磷酸酶活性隨著溫度的升高逐漸增強(qiáng)，在32℃時(shí)達(dá)最大值。淀粉酶和脂肪酶均隨著溫度的升高呈先上升后下降的趨勢(shì)。淀粉酶最適溫度為26℃左右，脂肪酶為29℃左右。菲牛蛭各消化酶活性總體為蛋白酶＞脂肪酶＞淀粉酶。
　　（5）淀粉酶、脂肪酶、蛋白

6、酶、AKP最適pH值分別為7.5，6.5～7.0，7.5～8.0和8.5～9.0。
　　（6）酶組織化學(xué)顯示，嗉囊和腸上皮細(xì)胞中存在較強(qiáng)的AKP活性。
　　4、養(yǎng)殖水溫在29℃組和32℃組時(shí)，兩組特定生長(zhǎng)率和增重率顯著大于其他組（17℃、20℃、23℃、26℃、35℃）(P＜0.05)。養(yǎng)殖水溫在26～32℃時(shí)，菲牛蛭存活率均達(dá)86％以上。將特定生長(zhǎng)率與養(yǎng)殖溫度擬合回歸表明，兩者存在明顯的二次函數(shù)關(guān)系（P＜0.05），回歸方

7、程：y=－0.0142x2＋0.8464x－8.7751（R2=0.9328）。由特定生長(zhǎng)率的線(xiàn)性回歸方程可得，其最適養(yǎng)殖溫度為30.4℃。
　　5、運(yùn)用Grimelius銀染法對(duì)菲牛蛭消化管內(nèi)嗜銀細(xì)胞的分布和形態(tài)學(xué)進(jìn)行觀察，并根據(jù)嗜銀細(xì)胞的分布特點(diǎn)統(tǒng)計(jì)其分布密度，結(jié)果表明：
　　消化管除食道外各部位均有嗜銀細(xì)胞分布，細(xì)胞染棕黑色或黑色；嗜銀細(xì)胞基本位于上皮細(xì)胞之間和上皮細(xì)胞基部，主要呈圓形、橢圓形、錐體形和長(zhǎng)條形等多種形態(tài)