小麥轉(zhuǎn)化反義PLDγ基因的表達(dá)及雄性不育突變體的研究.pdf

1、本研究以受體小麥L,K906及其轉(zhuǎn)反義PLD<,γ>基因小麥后代為試材，進(jìn)行特異PCR、RT-PCR擴(kuò)增等分子檢測，篩選得以表達(dá)的轉(zhuǎn)反義PLD<,γ>基因小麥轉(zhuǎn)化體，并對(duì)其性狀表現(xiàn)及光合生理特性等與其受體的差異進(jìn)行了比較分析，主要研究結(jié)果如下： 1．獲得了反義PLD<,γ>基因表達(dá)的小麥突變體。經(jīng)特異PCR擴(kuò)增，RT-PCR擴(kuò)增，得到了與陽性質(zhì)粒完全一致的500bp和195bp的目的片段。證明反義PLD<,γ>基因在轉(zhuǎn)基因小麥中

2、已經(jīng)成功表達(dá)。同時(shí)，RT-PCR．檢測證明轉(zhuǎn)反義PLD<,γ>基因穩(wěn)定株系03039中外源基因仍能有效轉(zhuǎn)錄。 2、獲得完全雄性不育突變體。03039S植株矮小、瘦弱，葉色、穗色黃綠，穗子小，穎殼開張角度大，有蓬松透明感，小穗分布稀疏，花藥外露，易與正?？捎陞^(qū)別；在單核晚期小孢子異常率達(dá)到了86.12％，說明不育時(shí)期主要發(fā)生在單核期；三核期小孢子異常率100％，為完全不育。相同父本雜交結(jié)實(shí)率與對(duì)照LK906無差異，證明雌性育性正

3、常；以同行可育株授粉后考查后代育性，總可育株與不育株比例為95：97，經(jīng)X<'2>測驗(yàn)符合1：1的分離比例。 3、轉(zhuǎn)基因小麥的農(nóng)藝性狀發(fā)生變異。05090RT。在農(nóng)藝性狀上與受體相比存在顯著差異，主要表現(xiàn)為株高、千粒重、單株穗數(shù)增加，分別增加15.7cm、7.48克和2.5穗；穗長變化不明顯；而小穗數(shù)、穗粒數(shù)減少，分別比對(duì)照下降4.0個(gè)和8.7粒；轉(zhuǎn)基因小麥的成熟期比受體提早了7 d，這對(duì)改善受體成熟偏晚的缺點(diǎn)是有利的。

4、 4、反義PLD<,γ>基因?qū)π←湽夂咸匦詻]有明顯的改良效果。對(duì)0509ORT葉綠素含量、光合生理指標(biāo)等無顯著效應(yīng)。旗葉葉綠素含量在抽穗期、開花期、乳熟期、蠟熟期及完熟期均比受體LK906略高，變動(dòng)范圍在1.43-9.37之間，經(jīng)T檢驗(yàn)均未達(dá)到顯著水平。凈光合速率、氣孔導(dǎo)度與LK906也略有差異，差值變動(dòng)范圍在0.24-2.45μmolCO<,2>.m<'-2>．s<'-1>、-4.33-7.33mmol·m<'-2>·s<'-1>之間