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文檔簡介
1、<p> 本科畢業(yè)論文(設(shè)計(jì))</p><p> 論文題目:利用食物垃圾袋料栽培平菇的研究Ⅳ—菌種添加比例的探討</p><p> 所在學(xué)院 生物與環(huán)境學(xué)院 </p><p> 專業(yè)班級 環(huán)境工程 </p><p> 學(xué)生姓名 學(xué)號
2、 </p><p> 指導(dǎo)教師 職稱 </p><p> 完成日期 年 月 日</p><p><b> 摘 要</b></p><p> 本研究在食物垃圾栽培平菇的最優(yōu)配方下,利用4個(gè)不同的菌種添加比例來栽培平菇,通過觀
3、察在相同的培養(yǎng)條件下不同菌種添加比例對平菇栽培效果的影響和測定平菇子實(shí)體中蛋白質(zhì)、脂肪和灰分的含量,從而探尋出最佳菌種添加比例,并分析了利用食物垃圾袋料商業(yè)化栽培平菇的可行性。結(jié)果表明,在C組15%的菌種添加比例下,菌絲體生長狀況最佳,生物轉(zhuǎn)化率最大,子實(shí)體的營養(yǎng)價(jià)值也較高,其中蛋白質(zhì)、脂肪和灰分的含量分別為32.10%、0.68%和9.39%。因此,15%的菌種添加比例最適合用于食物垃圾袋料栽培平菇,而且利用食物垃圾袋料商業(yè)化栽培平菇
4、也具有廣闊的發(fā)展前景。</p><p> 關(guān)鍵詞:平菇;食物垃圾;菌種添加比例;生物轉(zhuǎn)化率;營養(yǎng)價(jià)值</p><p><b> ABSTRACT</b></p><p> This study in the optimal formula of food waste cultivation of Pleurotus ostreatus,
5、four different of added strains are used to cultivate the Pleurotus ostreatus. In the cultivation of the same conditions, we observe the growth of mushroom mycelia and fruiting body. And we test the content of protein, f
6、at and ash which in fruiting bodies, search the optimal added strains, discuss the feasibility of cultivation of Pleurotus ostreatus by food waste in commercial. The result indicates that in the 1</p><p> K
7、eywords:Pleurotus ostreatus; Food waste; Added strains; Biological Efficiency; Nutritional value</p><p><b> 目 錄</b></p><p><b> 1 前言1</b></p><p><b&g
8、t; 2 材料與方法2</b></p><p> 2.1 菌種來源2</p><p> 2.2 實(shí)驗(yàn)材料2</p><p> 2.3 實(shí)驗(yàn)試劑2</p><p> 2.4 主要儀器和設(shè)備3</p><p> 2.5 實(shí)驗(yàn)方法3</p><p> 2.5.1
9、菌種復(fù)活與續(xù)代培養(yǎng)3</p><p> 2.5.2 平菇栽培種的制作方法3</p><p> 2.5.3 食物垃圾培養(yǎng)料的制作方法4</p><p> 2.5.4 平菇袋料栽培的方法4</p><p> 2.5.5 指標(biāo)測定方法5</p><p><b> 3 結(jié)果與分析5</b&
10、gt;</p><p> 3.1 不同的菌種添加比例對平菇栽培效果的影響5</p><p> 3.1.1 菌絲體生長狀況5</p><p> 3.1.2 子實(shí)體生長狀況7</p><p> 3.1.3 培養(yǎng)料中理化指標(biāo)的變化分析9</p><p> 3.1.4 子實(shí)體營養(yǎng)價(jià)值分析12</p&g
11、t;<p> 3.2 利用食物垃圾袋料商業(yè)化栽培平菇可行性探討15</p><p><b> 4 討論15</b></p><p><b> 5 結(jié)論16</b></p><p><b> 參考文獻(xiàn)18</b></p><p><b>
12、 致 謝21</b></p><p> 附錄3 指標(biāo)測定方法22</p><p><b> 1 前言</b></p><p> 食用菌是一類可供人類食用的天然大型真菌,在分類上屬于真菌門中的子囊菌亞門和擔(dān)子菌亞門,多數(shù)為一些腐生菌、共生菌和菌根菌,少數(shù)為寄生菌[1]。食用菌中蛋白質(zhì)含量遠(yuǎn)高于水果、蔬菜、米面類,接近于肉、
13、蛋類食物[2],這些蛋白質(zhì)則由20多種氨基酸組成,其中人體必需的8種氨基酸含量較高[3]。此外,食用菌中還含有少量稀有氨基酸,如甲硫氨基酸亞砜、羥脯氨酸等[4]。由于食用菌具有較高的食用價(jià)值和藥用價(jià)值,所以日益受到人們的重視。</p><p> 平菇屬于擔(dān)子菌綱、傘菌目、白蘑科、側(cè)耳屬[5,6]。平菇是世界四大食用菌之一,總產(chǎn)量列為第二,僅屈居蘑菇之后[6]。據(jù)研究表明,平菇不僅肉質(zhì)肥嫩,味道鮮美,而且營養(yǎng)豐富
14、,其中蛋白質(zhì)和維生素族等的含量非常高[8]。同時(shí),平菇具有適應(yīng)性強(qiáng),抗逆性強(qiáng),栽培技術(shù)簡易,生產(chǎn)周期短,生物學(xué)效率高等優(yōu)點(diǎn)[9]。因此,現(xiàn)在平菇是我國食用菌生產(chǎn)中生產(chǎn)量最高,發(fā)展最快,分布最廣的一個(gè)菌類,而且我國食用茵栽培歷史悠久,現(xiàn)已成為世界食用菌生產(chǎn)大國[7]。但是隨著平菇市場需求量的逐漸增加,傳統(tǒng)的棉籽殼配方由于受到原料供應(yīng)量和價(jià)格等因素的制約,使得越來越多新的培養(yǎng)料及配方不斷地應(yīng)用于實(shí)際生產(chǎn)中[10]。</p>&
15、lt;p> 食物垃圾主要指在食品加工過程中的廢棄物、食用過程中產(chǎn)生的剩余物和因保管不善而變質(zhì)的食物等[11-13]。我國由于餐飲業(yè)的迅速發(fā)展和傳統(tǒng)飲食文化的影響,導(dǎo)致食物垃圾的產(chǎn)量呈不斷遞增的趨勢。目前,我國還沒有建立健全的食物垃圾處理管理體系,缺乏相應(yīng)的管理政策和適宜的處理技術(shù),使我國的食物垃圾產(chǎn)生量在每年不斷遞增的過程中,對環(huán)境造成危害[12]。食物垃圾中主要含有淀粉、蛋白質(zhì)、纖維素、脂類和無機(jī)鹽等[14],其中蛋白質(zhì)和粗纖
16、維等有機(jī)物的含量較高[15]。而平菇是異養(yǎng)型木腐菌,對于纖維素、木質(zhì)素、淀粉等復(fù)雜有機(jī)大分子的分解能力特別強(qiáng),而且生物轉(zhuǎn)化率也很高[16]。所以通過食物垃圾袋料栽培平菇,不僅能使食物垃圾資源化、無害化、減量化,而且也能實(shí)現(xiàn)社會(huì)效益、經(jīng)濟(jì)效益和環(huán)境效益三者的統(tǒng)一。</p><p> 本研究通過利用食物垃圾袋料栽培平菇,在最優(yōu)配方下添加不同的平菇菌種量,觀察不同菌種添加比例對栽培效果和子實(shí)體營養(yǎng)價(jià)值的影響,探尋最佳
17、菌種添加比例。驗(yàn)證利用食物垃圾袋料栽培平菇的技術(shù)可行性,同時(shí)為食物垃圾商業(yè)化袋料栽培平菇提供一定的參考依據(jù)。</p><p><b> 2 材料與方法</b></p><p><b> 2.1 菌種來源</b></p><p> 本研究采用的菌種為側(cè)耳屬白腐真菌平菇(Pleurotus ostreatus),購自四川
18、省成都市豐澤原菌業(yè)有限公司。</p><p><b> 2.2 培養(yǎng)基材</b></p><p> PDA培養(yǎng)基:稱取200g馬鈴薯,洗凈去皮切碎放入鍋中,加入1000ml純水,用鉛筆在鍋壁上做一個(gè)標(biāo)記,置于電爐上加熱,待沸騰后開始計(jì)時(shí),30分鐘后停止加熱。加入純水至標(biāo)記處,稍稍冷卻后,用紗布過濾,將上清液倒入事先準(zhǔn)備好的500ml錐形瓶中,每個(gè)錐形瓶中大約裝40
19、0ml土豆濾液。然后在高壓滅菌鍋(121℃,1.2大氣壓)中滅菌20min,滅菌后冷卻,放入冷藏柜,保存?zhèn)溆?。移?00ml預(yù)制的土豆濾液,加入4g葡萄糖和10g瓊脂,充分溶解后在高壓滅菌鍋(121℃,1.2大氣壓)中滅菌20min,取出后倒入培養(yǎng)皿中,每個(gè)培養(yǎng)皿中倒入約15~20ml,冷卻凝固,備用。</p><p> 食物垃圾:取自浙江萬里學(xué)院1號食堂。取樣后,先用手工進(jìn)行篩選、壓榨、剁碎等處理,確保食物垃
20、圾中不含魚刺、肉骨頭等硬物和紙巾、一次性筷子等難分解物,并且用壓榨機(jī)使食物垃圾的含水率為60%左右,備用。</p><p> 秸稈:取自浙江省寧波市鄞州區(qū)邱隘鎮(zhèn)農(nóng)科所的水稻種植場,將其進(jìn)行剪、篩等處理,使長度都為8mm左右,曬干,備用。</p><p> 米糠:購自浙江省寧波市鄞州區(qū)邱隘鎮(zhèn)沈家村糧站,將其曬干,備用。</p><p> 生石灰和石膏:購自浙江省
21、寧波市鄞州區(qū)豪龍建材市場,備用。</p><p> 過磷酸鈣:購自浙江省寧波市三市花鳥市場,備用。</p><p><b> 2.3 實(shí)驗(yàn)試劑</b></p><p> 酸洗石棉、濃硫酸、十六烷基三甲基溴化銨、正辛醇、丙酮、氫氧化鈉、濃鹽酸、石油醚、甲基紅、溴甲酚綠、硫酸鉀、硼酸、無水硫酸銅、無水乙醇、無水硫酸鈉、苯酚、檸檬酸鈉、葡萄糖、
22、葡聚糖等化學(xué)試劑用來測定食物垃圾栽培料中木質(zhì)素、纖維素、總碳和總氮的含量和平菇子實(shí)體中蛋白質(zhì)、脂肪、總糖和灰分的含量,以上化學(xué)試劑均為分析純。</p><p> 2.4 主要儀器和設(shè)備</p><p> 本研究使用的主要設(shè)備有HWS恒溫恒濕培養(yǎng)箱、WMK-02電熱恒溫干燥箱、SW-CJ-5超凈工作臺(tái)、YXQ-75S11高壓滅菌鍋、ZXL智能馬弗爐、HWS-28數(shù)顯恒溫水浴鍋、真空抽濾泵
23、、SC-02離心機(jī)、V-1200分光光度計(jì)、FA2004電子天平、FW100型粉碎機(jī)、甘蔗蘋果壓榨機(jī)、索氏提取裝置、凱氏定氮裝置等。</p><p><b> 2.5 實(shí)驗(yàn)方法</b></p><p> 2.5.1 菌種復(fù)活與續(xù)代培養(yǎng)</p><p> 配制PDA培養(yǎng)基,制成平板,在高壓滅菌鍋(121℃,1.2個(gè)大氣壓)中滅菌30min,
24、放置在無菌條件下冷卻后,用接種環(huán)從斜面培養(yǎng)基中取一小塊母種,接種到PDA培養(yǎng)基上,置于溫度為25℃、濕度為65%的恒溫恒濕培養(yǎng)箱中培養(yǎng),直至菌絲體長滿整個(gè)培養(yǎng)基。再按上述的方法,用打孔器從復(fù)活培養(yǎng)后的母種中取一塊圓形菌絲塊,植入新的PDA培養(yǎng)基中,在溫度為25℃、濕度為65%的恒溫恒濕培養(yǎng)箱中培養(yǎng),直至菌絲體長滿整個(gè)培養(yǎng)基。</p><p> 2.5.2 平菇栽培種的制作方法</p><p&
25、gt; 培養(yǎng)料配方為秸稈78%,米糠18%,石膏1%,石灰2%,過磷酸鈣1%。將處理后的培養(yǎng)料混合后,加水?dāng)嚢杈鶆颍古淞系暮蔬_(dá)到65%左右,即手緊握培養(yǎng)料指縫中有水但不會(huì)滴下,并且滅菌后深度培養(yǎng)罐底不積水。</p><p> 將已配好的培養(yǎng)料置于深度培養(yǎng)罐中,邊裝料邊壓實(shí),并且使其下松上緊,裝至培養(yǎng)罐的2/3高即可。在121℃,1.2個(gè)大氣壓下滅菌120min,放置在無菌條件下冷卻至室溫。用打孔器從續(xù)代
26、培養(yǎng)好的菌種中取4~5塊圓形菌絲塊,并迅速將其植入到已冷卻的培養(yǎng)罐中培養(yǎng)料的上層,將培養(yǎng)罐置于溫度為25℃,濕度65%的恒溫恒濕培養(yǎng)箱中培養(yǎng),直至菌絲體長滿整個(gè)培養(yǎng)料。</p><p> 2.5.3 食物垃圾培養(yǎng)料的制作方法</p><p> 目前為止,平菇的栽培原料和栽培配方多種多樣。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)了包括對照組在內(nèi)的共5個(gè)實(shí)驗(yàn)組,分別為對照組、A組、B組、C組和D組,并且每個(gè)實(shí)驗(yàn)組設(shè)5個(gè)平
27、行組。對照組的配方為傳統(tǒng)配方,即秸稈78%、米糠19%、石灰2%、過磷酸鈣1%,其余四個(gè)實(shí)驗(yàn)組采用經(jīng)實(shí)驗(yàn)所得的最優(yōu)配方,即食物垃圾50%、秸稈20%、米糠26%、石灰2%、石膏1%、過磷酸鈣1%。根據(jù)研究要求,菌種添加比例分別設(shè)計(jì)為對照組15%、A組5%、B組10%、C組15%、D組20%。</p><p> 每個(gè)實(shí)驗(yàn)組都用電子天平稱取相應(yīng)的各組分的不同質(zhì)量,并將各組分混合攪拌均勻,使培養(yǎng)料的含水率在65℅左右
28、后,在121℃、1.2個(gè)大氣壓下滅菌120min,備用。為防止雜菌感染,拌料過程中添加了一定的多菌靈,添加量為培養(yǎng)料干重質(zhì)量的0.3%。</p><p> 2.5.4 平菇袋料栽培的方法</p><p> 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的菌種添加比例分別為A組5℅、B組10℅、C組15℅、D組20℅。栽培所有的栽培袋為280×75×62mm的聚丙烯透明塑料袋,所有操作在超凈工作臺(tái)里進(jìn)行。
29、實(shí)驗(yàn)設(shè)定每袋培養(yǎng)料為500g,根據(jù)不同的菌種添加比分別添加不同量的菌種,實(shí)驗(yàn)采用4層培養(yǎng)料3層菌種的模式進(jìn)行袋料植菌。</p><p> 植菌完成后,將各實(shí)驗(yàn)組的栽培袋料放入溫度為20℃,濕度為65%完全黑暗的恒溫恒濕箱中培養(yǎng),直至菌絲體成熟,即菌絲體長滿整個(gè)栽培袋且袋料變硬。再對栽培袋料進(jìn)行外部刺激,即在10℃左右的低溫環(huán)境下進(jìn)行1~2天冷沖擊培養(yǎng),并且輕輕敲打栽培袋表面等,促使菌絲體扭結(jié)成團(tuán),結(jié)成灰白色小米
30、粒狀的菌蕾堆,并出現(xiàn)黃色水珠,分化形成原基。在原基長出后,將栽培袋打開,放在溫度為20±0.5℃,濕度為90%且?guī)в猩⒐庹丈涞暮銣睾銤裣渲信囵B(yǎng)。觀察子實(shí)體的生長狀況,待菌蓋邊緣由內(nèi)卷轉(zhuǎn)向平展前,可對子實(shí)體進(jìn)行采收。</p><p> 采收時(shí),要用左手按住培養(yǎng)料,右手握住菌柄,輕輕旋扭下,或用刀子在菌柄基部緊貼料面處割下。對采收的平菇進(jìn)行稱量,計(jì)算生物轉(zhuǎn)化率。每次采收后,必須將菌柄清理干凈,以防止下批菇
31、出現(xiàn)爛菇現(xiàn)象。停止噴水3~4天,然后再少噴水,保持料面潮濕。栽培一次一般可采收2~3茬菇。</p><p> 在栽培過程中,每隔3天拍照一次,用于觀察平菇的生長狀況和栽培效果。</p><p> 2.5.5 指標(biāo)測定方法</p><p> 木質(zhì)素和纖維素的測定采用范式測定法,蛋白質(zhì)的測定采用凱氏定氮法,脂肪的測定采用索氏抽提法,粗多糖的測定采用苯酚—硫酸法,灰
32、分的測定采用重量灼燒法[17-21]。具體測定方法見附錄3。</p><p><b> 3 結(jié)果與分析</b></p><p> 3.1 不同的菌種添加比例對平菇栽培效果的影響</p><p> 3.1.1 菌絲體生長狀況</p><p> 菌絲體是平菇的營養(yǎng)器官,可以不斷從培養(yǎng)料中吸收養(yǎng)分,供菇體生長發(fā)育,而且
33、菌絲體快速生長,對獲得優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的平菇子實(shí)體起著重要的作用[22]。據(jù)研究表明,食用菌菌絲體生長速度與其呼吸消耗正相關(guān)[23]。旺盛的呼吸代謝所提供的能量和中間代謝產(chǎn)物能夠?yàn)榫z體的快速生長提供物質(zhì)保證。雖然任何食用菌在一定的環(huán)境下有其固定的生長速度,而母種菌絲體生長速度與產(chǎn)量相關(guān)性不大,不能用母種菌絲體生長速度來預(yù)測總產(chǎn)量,但是生長速度越快的菌絲體能盡快占領(lǐng)培養(yǎng)料,抑制雜菌的生長,提高菌袋存活率,同時(shí)也縮短了生長周期[24]。因此,用同
34、一菌種的栽培中,選擇生長最快的菌種添加比例具有重要的意義。通過觀察在相同的培養(yǎng)條件下,各實(shí)驗(yàn)組菌絲體的生長狀況,可以為選擇最優(yōu)的菌種添加比例提供一定的參考。</p><p> 在溫度為20℃,濕度為65%完全黑暗的恒溫恒濕箱中培養(yǎng)各實(shí)驗(yàn)組,觀察各實(shí)驗(yàn)組菌絲體的生長狀況,比較菌絲體的生長差異,結(jié)果如表1、圖1所示。</p><p> 表1 不同菌種添加比例下菌絲體生長狀況</p&g
35、t;<p> 圖1 各實(shí)驗(yàn)組平菇菌絲體和子實(shí)體的生長狀況</p><p> 根據(jù)上述結(jié)果可知,含食物垃圾的各實(shí)驗(yàn)組菌絲體的生長周期比對照組的長,并且除C組外,其余各實(shí)驗(yàn)組的生長狀況比對照組的略差。培養(yǎng)料的通氣條件與菌絲體的生長存在正反饋關(guān)系[25,26]。由于含食物垃圾的培養(yǎng)料中所含的秸稈含量比對照組的少很多,導(dǎo)致孔隙率比對照組的小,所以含食物垃圾的各實(shí)驗(yàn)組菌絲體的生長速度比對照組的慢。但是含食
36、物垃圾的各實(shí)驗(yàn)組菌絲體的生長狀況也各不相同,其中菌絲體的生長時(shí)間是A組為45天,B組為43天,C組為31天,D組為42天,而且各實(shí)驗(yàn)組菌絲體的整體特征也各有差異。A組、B組、C組和D組的栽培配方和培養(yǎng)條件等都是相同的,只有菌種添加比例不同。因此可推出,菌種添加比例的不同導(dǎo)致各實(shí)驗(yàn)組菌絲體的生長狀況有所差異,其中在C組15%的菌種添加比例下菌絲體的生長狀況最佳,其次是D組的20%,再次是B組的10%,最后是A組的5%。菌種添加量過多或者過
37、少都會(huì)影響菌絲體的生長,其中添加菌種量過多,會(huì)導(dǎo)致菌絲體生長緩慢且硬度不高,而菌種添加量過少,則又會(huì)使菌絲體生長周期延長,同時(shí)出現(xiàn)菌絲體顏色不純,分布不均勻等現(xiàn)象,所以選擇合理的菌種添加比例至關(guān)重要。</p><p> 據(jù)相關(guān)資料表明,菌種量的多少會(huì)影響其生長活性[27]。當(dāng)菌種添加量過少時(shí),由于含食物垃圾培養(yǎng)料中的營養(yǎng)物質(zhì)非常豐富,足夠菌絲體進(jìn)行生長發(fā)育,缺少菌絲體間的競爭,而使菌絲體缺少活性,生長較為緩慢。
38、當(dāng)菌種添加量過多時(shí),由于培養(yǎng)料中營養(yǎng)物質(zhì)的限制,使菌絲體的生長得不到充足的營養(yǎng)成分,從而導(dǎo)致菌絲體的生長受抑制。因此,在植菌過程中添加適量的菌種,不僅能促使菌絲體間產(chǎn)生良性競爭,增加菌絲體的活性,縮短菌絲體的生長周期,而且還能合理有效利用培養(yǎng)料中的營養(yǎng)物質(zhì),使效益最大化。</p><p> 綜上所述,在利用食物垃圾袋料栽培平菇的各實(shí)驗(yàn)組中,菌種添加比例為15%的實(shí)驗(yàn)組菌絲體的生長狀況最佳,即菌絲體分布均勻,顏色
39、呈純白色,袋料硬度大,生長周期相對較短。當(dāng)然,僅憑菌絲體良好的生長狀態(tài),不能完全推測出最佳的菌種添加比例為15%,仍需要其它指標(biāo)的綜合分析驗(yàn)證。</p><p> 3.1.2 子實(shí)體生長狀況</p><p> 平菇的子實(shí)體由菌蓋和菌柄兩部分組成,菌蓋一般為貝殼狀或扇狀。由于平菇子實(shí)體的生長狀況會(huì)直接影響平菇的產(chǎn)量和品質(zhì),所以平菇子實(shí)體的生長在平菇的整個(gè)生長周期中相對較為重要。本研究通過
40、觀察并比對不同菌種添加比例下平菇子實(shí)體的生長狀況等,篩選出最佳菌種添加比例,為利用食物垃圾袋料商業(yè)化栽培平菇提供一定的參考。</p><p> 在實(shí)驗(yàn)過程中,待菌絲體長滿整袋后,觀察各實(shí)驗(yàn)組中原基的生長情況,待原基長出后就可將栽培袋打開,放在溫度為20±0.5℃,濕度為90%且?guī)в猩⒐庹丈涞暮銣睾銤裣渲信囵B(yǎng)。觀察各實(shí)驗(yàn)組子實(shí)體的生長過程可知,各實(shí)驗(yàn)組的幼子實(shí)體形成后,菌蓋、菌柄都繼續(xù)增大和伸長。初期菌
41、柄伸長的速率大于菌蓋增大的速率,后期則相反,而且在子實(shí)體生長過程中,菌柄的生長會(huì)逐漸偏向一側(cè),特別是在子實(shí)體形成初期較為明顯。各實(shí)驗(yàn)組子實(shí)體采收前的生長狀況則如圖1所示。</p><p> 不同的栽培配方和菌種添加比例,對平菇的出菇時(shí)間、子實(shí)體的生長狀況和產(chǎn)量,以及生物轉(zhuǎn)化率均有一定的影響,影響結(jié)果如表2所示。</p><p> 表2 菌種添加比例對平菇子實(shí)體生長狀況的影響</p
42、><p> 含食物垃圾的各實(shí)驗(yàn)組子實(shí)體的生長時(shí)間與對照組的相差不大,但是其菌柄長度、菌蓋直徑和生物轉(zhuǎn)化率與對照組的相比存在較為明顯的差異。其中含食物垃圾的各實(shí)驗(yàn)組子實(shí)體的菌柄都比對照組的略長,而且除C組外,其余各實(shí)驗(yàn)組的菌蓋直徑和生物轉(zhuǎn)化率卻都比對照組的小。在一定程度上,生物轉(zhuǎn)化率的高低能反映出平菇的栽培效果。含食物垃圾的各實(shí)驗(yàn)組中,C組的生物轉(zhuǎn)化率最大,為32.88%,其次是D組,為22.51%,再次是B組,為1
43、5.82%,最后是A組,為13.03%。由此可見,菌種添加比例的不同,不僅影響菌絲體的生長速度,而且還會(huì)影響子實(shí)體的生物轉(zhuǎn)化率。在相同栽培配方和培養(yǎng)條件下,平菇的生物轉(zhuǎn)化率與菌絲體的生長速度呈正相關(guān),即菌絲體的生長速度越快,其生物轉(zhuǎn)化率越大。這可能是因?yàn)槠焦骄z體生長越慢,栽培時(shí)間越長,消耗培養(yǎng)料中的養(yǎng)分越多,菌絲體積累養(yǎng)分就少,產(chǎn)量也就下降,進(jìn)而使得平菇的生物轉(zhuǎn)化率越低[27]。因此,在四個(gè)菌種添加比例下,添加15%菌種量不僅更有利于
44、平菇菌絲體和子實(shí)體的生長,而且還能得到更高的生物轉(zhuǎn)化率。</p><p> 綜上所述,以食物垃圾為主要材料,加入一定量的秸稈、米糠等輔助材料可以滿足平菇在整個(gè)栽培過程中的營養(yǎng)需要。這也驗(yàn)證了利用食物垃圾袋料栽培平菇具有一定的技術(shù)可行性。而且從子實(shí)體的生長狀況可知,菌種添加比例為15%時(shí),子實(shí)體長勢較好,生物轉(zhuǎn)化率最大。由上述可得,菌種添加比例為15%的比其余各添加比例栽培效果更佳,較適合用于食物垃圾袋料栽培平菇
45、。</p><p> 3.1.3 培養(yǎng)料中理化指標(biāo)的變化分析</p><p> 平菇的栽培方式大體可以分為四種,即生料栽培、發(fā)酵料栽培、熟料栽培和發(fā)酵加熟料栽培[28]。本研究采用的是熟料栽培。熟料栽培平菇,在能減少病蟲害的同時(shí),還能提高子實(shí)體的品質(zhì)和生物轉(zhuǎn)化率[29]。</p><p> 平菇作為一種食用菌,其菌絲體能從培養(yǎng)料中吸收養(yǎng)分,從而轉(zhuǎn)化為自身的營養(yǎng)
46、成分[30],所以栽培前后培養(yǎng)料的各項(xiàng)指標(biāo)都會(huì)存在一定的變動(dòng)。本研究討論在同一最優(yōu)配方下,不同的菌種添加比例對食物垃圾袋料栽培平菇的效果影響,所以現(xiàn)只對含食物垃圾的各實(shí)驗(yàn)組培養(yǎng)料中理化指標(biāo)的變化進(jìn)行分析。實(shí)驗(yàn)分別采用范式測定法和凱氏定氮法等來測定在不同菌種添加比例下平菇培養(yǎng)料在前期、中期和后期木質(zhì)素和纖維素的含量,以及C/N,運(yùn)用t檢驗(yàn)分析數(shù)據(jù)間的顯著性差異,探討培養(yǎng)料中理化指標(biāo)的變化趨勢,結(jié)果如圖2、圖3、表3所示。</p>
47、;<p> 圖2 培養(yǎng)料中木質(zhì)素含量</p><p> 木質(zhì)素是一種以苯基丙烷為基本結(jié)構(gòu)的不規(guī)則三維網(wǎng)狀高聚物,并且木質(zhì)素?zé)o營養(yǎng)價(jià)值,不能被瘤胃微生物降解,也不能被動(dòng)物消化利用[31]。但是據(jù)相關(guān)資料表明,白腐真菌具有很強(qiáng)的降解木質(zhì)素的能力[32],而且通過實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知,平菇對木質(zhì)素的降解效果也較為明顯。由圖2可得,各實(shí)驗(yàn)組后期培養(yǎng)料中的木質(zhì)素含量都比前期的少,分別為A組從0.0687g/g下降
48、到0.0464g/g,B組從0.0831g/g下降到0.0571g/g,C組從0.1001g/g下降到0.0498g/g,D組從0.1203g/g下降到0.0808g/g,其中降解率分別是A組為32.46%、B組為31.29%,C組為50.25%、D組為32.83%。運(yùn)用t檢驗(yàn)可得,A組、B組、C組和D組前期培養(yǎng)料中的木質(zhì)素含量與后期的木質(zhì)素含量相比差異非常顯著(P≤0.01)。其中C組在前后期培養(yǎng)料中木質(zhì)素含量的變化最為明顯,且降解率
49、最大。由此可見,在C組15%的菌種添加比例下所栽培的平菇降解木質(zhì)素的能力在各實(shí)驗(yàn)組中是最強(qiáng)的,這也可能與該組的菌絲體長勢最佳有關(guān)。</p><p> 有研究表明,菌絲體生長發(fā)育期主要利用培養(yǎng)料中的淀粉等,后才動(dòng)用一定量的木質(zhì)素和纖維素為碳源[33]。因此,在菌絲體的生長過程中,木質(zhì)素前期的消耗量比后期的少,而且由于菌種添加比例的不同引起菌絲體生長速度的不同而導(dǎo)致后期木質(zhì)素消耗量的不同。</p>&
50、lt;p> 圖3 培養(yǎng)料中纖維素含量</p><p> 由圖3可知,培養(yǎng)料中纖維素的含量變化趨勢和木質(zhì)素類似,即中期纖維素的含量比前期的略少,后期的纖維素含量與中期的相比差異較大。各實(shí)驗(yàn)組纖維素的含量變化分別是A組從0.1513g/g下降到0.1224g/g,B組從0.1831g/g下降到0.1424g/g,C組從0.2001g/g下降到0.1318g/g,D組從0.2203g/g下降到0.1610g/
51、g,其中降解率是A組為19.10%、B組為22.23%,C組為34.13%、D組為26.92%。運(yùn)用t檢驗(yàn)可得,A組、B組、C組和D組前期培養(yǎng)料中的纖維素含量與后期的纖維素含量相比差異顯著(P≤0.05)。由此可見,各實(shí)驗(yàn)組在相同的栽培配方和培養(yǎng)條件下,由于菌種添加比例的不同,使得各實(shí)驗(yàn)組纖維素的消耗各不相同。其中菌絲體長勢較好,生物轉(zhuǎn)化率較大的菌種添加比例下的實(shí)驗(yàn)組纖維素含量的下降較為明顯。由此可推測,菌種添加比例的不同對纖維素的降解
52、有一定影響,且在合理的菌種添加比例下,菌絲體長勢較優(yōu),降解纖維素的含量則相對較多。</p><p> 據(jù)相關(guān)資料表明,在栽培后期,當(dāng)碳源不足時(shí),才會(huì)開始消耗培養(yǎng)料中的木質(zhì)素和纖維素[33,34]。因此,平菇對培養(yǎng)料中木質(zhì)素和纖維素的降解能力會(huì)影響平菇子實(shí)體的產(chǎn)量和生物轉(zhuǎn)化率,而在何種菌種添加比例下平菇降解木質(zhì)素和纖維素的能力最強(qiáng),這對于食物垃圾袋料栽培平菇具有重要的意義。同時(shí),這也為選擇最優(yōu)菌種添加比例提供一定
53、的參考。</p><p> 平菇菌絲體生長狀況的好壞和子實(shí)體的產(chǎn)量構(gòu)成主要與培養(yǎng)料的兩種因素有關(guān),其中一種因素就是C/N[35]。因此,培養(yǎng)料中的C/N對于平菇的生長至關(guān)重要,過高或者過低都不利于平菇菌絲體和子實(shí)體的生長。在不同的菌種添加比例下,各實(shí)驗(yàn)組之間的C/N也存在著一定的差異,而且同一實(shí)驗(yàn)組在不同的生長階段,培養(yǎng)料中C/N也都各不相同。由表3可知,前期各實(shí)驗(yàn)組的C/N都比后期的大,但是隨著栽培時(shí)間的延長
54、,各實(shí)驗(yàn)組的C/N都有一定的下降,其中A組從前期的23.5/1降至后期的15.5/1,B組從前期的24.3/1降至后期的15.3/1,C組從前期的25.8/1降至后期的13.7/1, D組從前期的26.4/1降至后期的16.7/1。</p><p> 表3 不同菌種添加比例對培養(yǎng)料中C/N的影響</p><p> 平菇的生長分為菌絲體生長階段和子實(shí)體生長階段,菌絲體生長的過程是營養(yǎng)物質(zhì)
55、大量積累的過程[36]。其中碳含量隨栽培時(shí)間的延長而逐漸下降,這與纖維素等生物大分子不斷被水解利用,菌體細(xì)胞內(nèi)的碳水化合物逐漸增多有關(guān),而氮源也被迅速消耗,應(yīng)用于各代謝活動(dòng)中,轉(zhuǎn)移到菌體細(xì)胞內(nèi)。因此,C/N隨栽培時(shí)間的延長而下降,這是碳、氮含量綜合變化的結(jié)果。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知,在不同菌種添加比例下,平菇菌絲體的生長速度和子實(shí)體的生長周期都有所不同,而且經(jīng)過對比可以發(fā)現(xiàn)如果菌絲體和子實(shí)體生長速度較快,則其培養(yǎng)料中的C/N下降也相對較快。由此
56、也可推測出,菌絲體和子實(shí)體的生長速度一定程度上影響著培養(yǎng)料中C/N的變化,且碳源的消耗速度比氮源的消耗速度略快。</p><p> 實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),在各實(shí)驗(yàn)組后期的培養(yǎng)料中產(chǎn)生了原本不存在的粗多糖,雖然C組含量最多,為1.15%,D組其次,為0.91%,然后是B組,為0.72%,最后是A組,為0.43%,但是提高了栽培廢料的營養(yǎng)價(jià)值,為栽培廢料的資源化再應(yīng)用提供更大的發(fā)展空間。</p><p>
57、; 綜上所述,結(jié)合培養(yǎng)料中木質(zhì)素含量、纖維素含量和 C/N這三個(gè)指標(biāo)的變化趨勢可得,菌絲體和子實(shí)體的生長速度越快,長勢越好,其處理效果越明顯,下降率越大。因此,在15%的菌種添加比例下,平菇的長勢最好,該菌種添加比例較為適合用于食物垃圾袋料栽培平菇。</p><p> 3.1.4 子實(shí)體營養(yǎng)價(jià)值分析</p><p> 平菇是高蛋白低脂肪的綠色食品,其子實(shí)體中含有豐富的營養(yǎng)成分。據(jù)研究
58、表明,平菇子實(shí)體中蛋白質(zhì)、脂類、糖類、磷、鐵、鈣,以及維生素B1、維生素B2、維生素C等含量都非常高[2]。</p><p> 平菇子實(shí)體的品質(zhì)是判斷平菇長勢的標(biāo)準(zhǔn)之一,而平菇的品質(zhì)必然受到培養(yǎng)料和培養(yǎng)條件的影響。本研究討論在相同配方和培養(yǎng)條件下,不同菌種添加比例對平菇子實(shí)體營養(yǎng)價(jià)值的影響。實(shí)驗(yàn)分別采用了凱氏定氮法、索氏抽提法和重量灼燒法測定了各實(shí)驗(yàn)組平菇子實(shí)體中蛋白質(zhì)、脂肪和灰分的含量,并運(yùn)用t檢驗(yàn)分析數(shù)據(jù)間
59、的顯著性差異,探討含食物垃圾的各實(shí)驗(yàn)組子實(shí)體的營養(yǎng)指標(biāo)與對照組子實(shí)體的營養(yǎng)指標(biāo)之間的差異性,結(jié)果如圖4、圖5、圖6所示。</p><p> 從圖4可看出,對照組平菇子實(shí)體中蛋白質(zhì)的含量為21.47%,而利用食物垃圾袋料栽培所得到的平菇子實(shí)體中蛋白質(zhì)的含量均高于對照組的,分別是A組為25.64%,B組為27.19%,C組為32.10%,D組為27.21%。運(yùn)用t檢驗(yàn)可得,A組、B組、C組和D組與對照組的差異都較為
60、顯著(P≤0.05)。</p><p> 從營養(yǎng)學(xué)的角度而言,蛋白質(zhì)和氨基酸無疑是構(gòu)成食物營養(yǎng)成分中最重要的部分[37],所以食物中蛋白質(zhì)含量的多少總會(huì)受到人們的關(guān)注。而由食物垃圾袋料栽培所得的平菇子實(shí)體中的蛋白質(zhì)的含量明顯高于市場上的普通平菇,分析其原因可能有以下兩個(gè)方面。一方面,食物垃圾培養(yǎng)料中含有的營養(yǎng)物質(zhì)比傳統(tǒng)的培養(yǎng)料中的更多。由于食物垃圾培養(yǎng)料中有較多的含碳、氮的物質(zhì),更有利于平菇在栽培過程中的吸收,
61、合成自身的蛋白質(zhì)。另一方面,在C組15%的菌種添加比例下,菌絲體的生長速度比A組、B組和D組的快,其吸收培養(yǎng)料中的營養(yǎng)物質(zhì)更多,促使合成的蛋白質(zhì)也更多。</p><p> 圖4 平菇子實(shí)體的蛋白質(zhì)含量</p><p> 從圖5可看出,利用含食物垃圾培養(yǎng)料所栽培的平菇子實(shí)體中脂肪的含量明顯比對照組的低,其中對照組為2.54%,A組為1.41%,B組為1.33%,C組為0.68%,D組為1
62、.28%。運(yùn)用t檢驗(yàn)可得,A組、B組、C組和D組與對照組相比差異非常顯著(P≤0.05)。</p><p> 圖5 平菇子實(shí)體的脂肪含量</p><p> 在食物垃圾培養(yǎng)料中存在一定量的肉類,對照組中沒有,使得栽培前期含食物垃圾的培養(yǎng)料中有足夠的氮源,可以用來合成菌體外酶,但是隨著菌絲體的生長,氮源快速被消耗。此時(shí),由于缺少合成菌體外酶的氮源,平菇的代謝歧化,進(jìn)而開始消耗一定量的脂肪來
63、維持自身的生長。由于菌體添加比例的不同,使得平菇的生長狀況有所不同,在C組15%的菌種添加比例下平菇生長最快,所以消耗的脂肪也越多,最后子實(shí)體中所含的脂肪也就越少。</p><p> 圖6 平菇子實(shí)體的灰分含量</p><p> 從圖6可看出,對照組子實(shí)體的灰分含量為7.43%,A組為6.07%,B組為6.14%,C組為9.39%,D組為7.17%。運(yùn)用t檢驗(yàn)可得,A組、B組和C組與對
64、照組的差異顯著(P≤0.05),D組與對照組的差異不顯著(P≥0.05)。由此可知,在同一栽培配方下,菌種添加比例的不同對平菇子實(shí)體中灰分的含量還是具有一定的影響,而且菌絲體的生長速度越快則灰分的含量越高。</p><p> 在一定范圍內(nèi),平菇子實(shí)體灰分含量越高,其所含有的礦物質(zhì)含量也越多,而礦物質(zhì)含量越高,則平菇子實(shí)體的營養(yǎng)價(jià)值也相應(yīng)較高[38]。在C組15%菌種添加比例下子實(shí)體中灰分含量比其余各個(gè)實(shí)驗(yàn)組的都
65、高,可能是由于C組的菌絲體生長速度比A組、B組和D組的都快,而且C組培養(yǎng)料中的營養(yǎng)物質(zhì)比對照組的更多。</p><p> 綜上所述,本研究要得到最佳菌種添加比例,需要綜合各實(shí)驗(yàn)指標(biāo)的變化趨勢。綜合分析各指標(biāo)的變化特點(diǎn),得出最佳的菌種添加比例為15%。在菌種添加比例為15%的實(shí)驗(yàn)組,其菌絲體的長勢最佳,并且子實(shí)體的營養(yǎng)價(jià)值相對而言也較高。由此可得,15%的菌種添加比例最適合用于食物垃圾袋料栽培平菇。</p&
66、gt;<p> 3.2 利用食物垃圾袋料商業(yè)化栽培平菇可行性探討</p><p> 食用菌以其具有營養(yǎng)保健作用而倍受消費(fèi)者的青睞,隨著我國經(jīng)濟(jì)實(shí)力的增強(qiáng)和人民生活水平的逐漸提高,消費(fèi)者對菌類的關(guān)注程度也是日趨加強(qiáng),食用菌的消費(fèi)種類和消費(fèi)量也在逐年增加。</p><p> 各國都大力發(fā)展食用菌的國際化生產(chǎn),而工廠化生產(chǎn)是食用菌產(chǎn)業(yè)發(fā)展的高級階段,也是食用菌生產(chǎn)的國際化趨勢
67、[39]。近幾十年來,我國食用菌工作者不斷深入對平菇不同栽培配方和栽培方式等的研究,同時(shí),也不斷探索適合我國發(fā)展的食用菌工廠化生產(chǎn)之路,推進(jìn)我國食用菌栽培的工廠化[40]。據(jù)估計(jì),國內(nèi)食用菌工廠化生產(chǎn)企業(yè)已由2000年的4~5家發(fā)展到2009年的50多家,年產(chǎn)量由2000年的3000多噸發(fā)展到2009年的10萬多噸[41]。</p><p> 食用菌工廠化生產(chǎn)是不可逆轉(zhuǎn)的國際化發(fā)展趨勢,如果在這一方面研究更多更
68、深入,會(huì)使我國食用菌產(chǎn)業(yè)的發(fā)展前途將更為廣闊。本研究主要以食物垃圾為主要栽培材料,添加秸稈、米糠等輔助材料來袋料栽培平菇,并且探尋最佳的菌種添加比例。通過實(shí)驗(yàn)也驗(yàn)證了能利用食物垃圾來袋料栽培平菇,而且由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知,利用食物垃圾栽培的平菇,其子實(shí)體的營養(yǎng)價(jià)值高于普通平菇,而且生長周期也和普通平菇相差不大。栽培后所剩余的廢料也具有較高的營養(yǎng)價(jià)值,能作為肥料,加工成飼料或用于花卉栽培等[42]。國外也已有研究表明,利用食物垃圾袋料商業(yè)化栽培
69、平菇具有很強(qiáng)的可行性[43]。因此,利用食物垃圾栽培平菇不僅適合我國的國情,而且其子實(shí)體的營養(yǎng)價(jià)值較高,生產(chǎn)成本較低,進(jìn)行商業(yè)化生產(chǎn)經(jīng)濟(jì)效益較大。</p><p> 在巨大的市場需求下,利用食物垃圾袋料商業(yè)化栽培平菇,不僅能使食物垃圾得到科學(xué)合理的處理,減少環(huán)境污染,而且還有利于平菇產(chǎn)業(yè)、農(nóng)林業(yè)和畜牧業(yè)等相關(guān)產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展,使各種效益最大化。因此,利用食物垃圾袋料栽培平菇具有較強(qiáng)的可行性,進(jìn)行產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)也具有
70、廣闊的發(fā)展前景。</p><p><b> 4 討論</b></p><p> 隨著食用菌產(chǎn)業(yè)的不斷發(fā)展,平菇需求量的不斷增加,新型高效的平菇栽培方法也越來越受到研究者的關(guān)注。本研究利用食物垃圾袋料栽培平菇,經(jīng)實(shí)驗(yàn)研究表明,最佳菌種添加比例為15%。但是實(shí)驗(yàn)中還存在一定的問題有待解決,分析討論如下。</p><p> 石灰對食物垃圾袋料栽
71、培平菇的影響。添加一定量的石灰,不僅能為培養(yǎng)料中提供鈣元素,而且能抑制雜菌的生長。菌絲體能從培養(yǎng)料中吸收鈣離子,用于參加體內(nèi)的代謝,激活菌絲體的生物特性,使菌絲體內(nèi)的代謝順利進(jìn)行,同時(shí)積累更多的養(yǎng)分,利于大量子實(shí)體的形成[44]。但是石灰添加量的多少對食物垃圾袋料栽培平菇的影響還有待實(shí)驗(yàn)研究。</p><p> 多菌靈對食物垃圾袋料栽培平菇的影響。在抖料過程中添加一定量的多菌靈量能抑制雜菌的生長,而添加量過多,
72、濃度過大,則會(huì)影響菌絲體的生長和子實(shí)體的分化[45]。但是據(jù)研究表明,在有石灰的培養(yǎng)料中,添加的多菌靈會(huì)與石灰水發(fā)生一定的反應(yīng),使藥效下降,不但達(dá)不到理想的殺菌效果,而且還會(huì)對菌種的萌發(fā)和菌絲體的生長起一定的抑制作用[25]。</p><p> 出菇方法的不同對食物垃圾袋料栽培平菇的影響。平菇的出菇方式主要有菌墻式出菇及雙向臥式出菇等[9]。不同出菇方式會(huì)對平菇的產(chǎn)量及品質(zhì)產(chǎn)生一定的影響。選擇何種出菇方式對于食
73、物垃圾袋料栽培平菇更有利,得到的產(chǎn)量最大,還有待實(shí)驗(yàn)研究。</p><p> 由于利用食物垃圾袋料栽培所得的平菇,其營養(yǎng)價(jià)值等都優(yōu)于普通平菇,特別是在菌種添加比例為15%時(shí),其生長狀況相對于其余三個(gè)菌種添加比例而言最佳,且子實(shí)體營養(yǎng)價(jià)值較高。所以可以以本實(shí)驗(yàn)結(jié)果為基礎(chǔ),在食物垃圾袋料栽培平菇方面開展深入研究,更有效的擴(kuò)大經(jīng)濟(jì)效益,也可為食物垃圾商業(yè)化袋料栽培平菇提供一定的參考依據(jù)。</p><
74、;p><b> 5 結(jié)論</b></p><p> 本實(shí)驗(yàn)利用食物垃圾袋料栽培平菇,探討最佳菌種添加比例。在栽培過程中每隔2天觀察記錄平菇菌絲體或子實(shí)體的生長狀況,并檢測栽培前期、中期和后期培養(yǎng)料中木質(zhì)素、纖維素的含量和C/N,以及子實(shí)體中蛋白質(zhì)、脂肪和灰分的含量。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知,菌種添加比例為15%的C組菌絲體生長狀況最好,木質(zhì)素纖維素降解最快,生物轉(zhuǎn)化率較高,且子實(shí)體中蛋白質(zhì)含
75、量最高。通過綜合分析,得到利用食物垃圾袋料栽培平菇的最佳菌種添加比例為15%。</p><p> 本文的研究僅僅是初步工作,而且本實(shí)驗(yàn)由于時(shí)間有限,未作驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),要準(zhǔn)確判斷最佳菌種添加比例,還需進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證和分析比較。對于在實(shí)際中利用食物垃圾商業(yè)化袋料栽培平菇的應(yīng)用,也必須進(jìn)行更深入、細(xì)致的研究和實(shí)踐。</p><p><b> 參考文獻(xiàn)</b></p&g
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88、; [35] 范可章,陳靈,蔡健等.不同秸稈培養(yǎng)基對平菇生長影響的比較研究[J].中國農(nóng)學(xué)通報(bào),2011(16):126-131.</p><p> [36] 冷凱,馬朝紅,張國華.平菇筒袋栽培技術(shù)[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技,2010(17):149-149.</p><p> [37] 劉志皋.食品營養(yǎng)學(xué)[M].北京:中國輕工業(yè)出版社,1991:207- 228.</p>
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90、p> [41] 張引芳.中國食用菌工廠化生產(chǎn)發(fā)展趨勢及對策建議[J].浙江食用菌,2010,18(4):5-8.</p><p> [42] 孟慶國.食用菌廢料的綜合利用[J].農(nóng)家科學(xué),2011(1):21-21.</p><p> [43] Asami Masato, Seto Takumi. Cultivation of Pleurotus ostreatus using
91、 food waste as a medium substrate[J]. Applied Forest Science.2004,13(2):123-128.</p><p> [44] 史留功,樊金獻(xiàn),朱自學(xué).微量元素對平菇生長的影響[J].農(nóng)業(yè)與科技,2007(7):84-86.</p><p> [45] 管懷驥,幾種殺菌劑對平菇生長的影響[J].安徽農(nóng)學(xué)通報(bào),2011,17(
92、17):49-50.</p><p><b> 致 謝</b></p><p> 本文是在胡博士悉心指導(dǎo)下順利完成的。在課題研究和論文撰寫的過程中,胡老師雖然在北京工作繁多,但是他投入了大量的精力,給予我細(xì)心的指導(dǎo)和不懈的支持。在此期間遇到的困難,胡老師都會(huì)為我指點(diǎn)迷津。胡老師淵博的專業(yè)知識(shí),嚴(yán)謹(jǐn)?shù)闹螌W(xué)態(tài)度,誨人不倦的高尚師德都深深的影響著我,不僅授我以文,而且
93、教我做人,使我終生受益無窮。本文從選題到完成,都傾注了胡老師大量的心血,我的每一點(diǎn)進(jìn)步都是在胡老師的耐心指導(dǎo)下取得的。在此,我謹(jǐn)向胡老師表示崇高的敬意和衷心的感謝!</p><p> 感謝大學(xué)四年里所以教育過我的老師們,感謝你們四年來對我的細(xì)心教導(dǎo)和不懈支持,讓我學(xué)到豐富的專業(yè)知識(shí)和為人處事的生活道理。對于你們給予我的諸多幫助,在此我表示由衷的感謝!另外,我還要感謝我的親人和朋友對我學(xué)習(xí)和生活上的理解,是你們給
94、了我勇往直前的動(dòng)力和克服困難的信心。謹(jǐn)以此文對關(guān)心和幫助過我的人們表示由衷的感謝!</p><p> 最后,在此向所以關(guān)心和幫助過我的老師、同學(xué)和朋友們表示感謝!同時(shí)也向所有參加論文評閱、評議及答辯組的老師們,致以誠摯的謝意,感謝你們能在百忙之中給予指導(dǎo)!</p><p> 附錄3 指標(biāo)測定方法</p><p> 飼料中酸性洗滌木質(zhì)素測定的國標(biāo)規(guī)定方法GB/T
95、20805—2006</p><p><b> 1 原理</b></p><p> 植物性飼料經(jīng)酸性洗滌劑處理,剩余的殘?jiān)鼮樗嵝韵礈炖w維,其中包括纖維素、木質(zhì)素和硅酸鹽。酸性洗滌纖維經(jīng)12mol/L硫酸處理后的殘?jiān)鼮槟举|(zhì)素和硅酸鹽,從酸性洗滌纖維值中減去12mol/L硫酸處理后的殘?jiān)鼮轱暳系睦w維素含量。將12mol/L硫酸處理后的殘?jiān)一?,在灰化過程中逸出的部分為
96、酸性洗滌木質(zhì)素(ADL)的含量。</p><p> I.酸性洗滌纖維(ADF)是利用酸性洗滌劑進(jìn)一步去除飼料中的脂肪、淀粉、蛋白質(zhì)、糖類和半纖維素而剩余的物質(zhì),包括纖維素和木質(zhì)素。</p><p> II.酸洗木質(zhì)素(ADL)是利用12mol/L硫酸進(jìn)一步去除ADF中的纖維素成分而剩余木質(zhì)素。</p><p><b> 飼料中的指標(biāo):</b&g
97、t;</p><p> 酸性洗滌纖維素=ADF-ADL;酸性洗滌木質(zhì)素=ADL</p><p><b> 2 試劑的配置</b></p><p> 2.1 酸洗石棉:將酸洗石棉在800℃高溫電爐內(nèi)烘燒1h,冷卻后用12.0 mol/L硫酸洗滌液浸泡4h,用水洗至中性,在105℃烘干備用。</p><p> 2.2
98、 12.0mol/L硫酸洗滌溶液:666ml硫酸(分析純)慢慢倒入300ml蒸餾水的燒杯中,不斷攪拌溶解,用水定容至1000ml。</p><p> 2.3 酸性洗滌劑(2%十六烷基三甲基溴化銨溶液):稱取20gCTAB溶于1000ml 1.00mol/L硫酸(1/2H2SO4)溶液中,攪拌溶解。</p><p> 2.4 1.00 molL-1硫酸(1/2H2SO4)溶液:將27.8
99、7ml硫酸慢慢倒入內(nèi)裝500ml水的燒杯中,攪拌冷卻后用水定容至1000ml,必要時(shí)用NaOH標(biāo)液標(biāo)定。</p><p> 2.5 正辛醇(消泡劑)</p><p> 2.6 乙醇或丙酮(分析純)</p><p><b> 3 實(shí)驗(yàn)儀器和設(shè)備</b></p><p><b> 3.1 電爐</b&
100、gt;</p><p> 3.2 分析天平(0.0001g)</p><p><b> 3.3 干燥器</b></p><p> 3.4 樣品粉碎機(jī)或研缽體</p><p> 3.5 試驗(yàn)篩:孔徑小于40目</p><p> 3.6 消煮器:配冷凝管的磨口錐形瓶</p>&
101、lt;p> 3.7 抽濾裝置:抽濾瓶和真空泵</p><p><b> 3.8 電熱恒溫箱</b></p><p> 3.9 G2玻璃砂漏斗</p><p> 3.10 50ml燒杯</p><p><b> 3.11 馬弗爐</b></p><p><
102、b> 4 操作步驟</b></p><p><b> 4.1 樣品采集</b></p><p> 用四分法采集樣品,樣品風(fēng)干或65℃烘干;將樣品用植物粉碎機(jī)或研缽碾碎,通過40目或小于40目的樣品篩,封入樣品袋,作為試樣。</p><p> 4.2 酸性洗滌纖維測定</p><p> 準(zhǔn)確稱取
103、1.0000g純干物質(zhì)樣品(通過40目篩)置于直筒燒杯(錐形瓶)中,加入100 ml酸性洗滌劑和數(shù)滴十氫化萘及0.5g無水亞硫酸鈉(3至4滴正辛醇)作為消泡劑。將燒杯(錐形瓶)套上冷凝裝置于電爐上,在5~10min內(nèi)煮沸,并持續(xù)保持微沸60min。趁熱用已恒重的鋪有0.2g酸洗石棉的玻璃砂漏斗得M1進(jìn)行抽濾,并用沸水(約200ml)反復(fù)沖洗玻璃坩堝及殘?jiān)翞V液呈中性為止(用PH試紙檢測)。用20ml丙酮分兩次沖洗殘?jiān)脸橄碌谋撼薀o色
104、為止,并抽凈丙酮。將置于105℃烘箱中烘3h后,在干燥器中冷卻30 min,將G2玻璃紗漏斗稱得M2,(M2-M1)即為酸洗纖維素含量(ADF)。 </p><p> 4.3 酸性洗滌木質(zhì)素(ADL)測定 </p><p> 將酸性洗滌纖維加入12mol/L硫酸保持半滿,在50ml燒杯內(nèi)消化3h后過濾,并沖洗至中性。消化過程中溶解部分為纖維素,不溶解的殘?jiān)鼮樗嵝韵礈炷举|(zhì)素和酸
105、不溶灰分,將殘?jiān)?h,在干燥器中冷卻0.5h,稱重M3;后在550℃灼燒1h灰化后,木質(zhì)素在灰化過程中揮發(fā)。在干燥器中冷卻0.5h,將G2玻璃紗漏斗稱重M4。(M3-M4)即可得出酸性洗滌木質(zhì)素(ADL)和酸不溶灰分的含量。</p><p><b> 5 計(jì)算</b></p><p> 5.1 酸性洗滌纖維含量的計(jì)算</p><p>
106、ADF(g/g)=(M2-M1)/1.000(g/g)</p><p> 式中:M1—玻璃砂漏斗(含酸洗石棉)重(g)</p><p> M2—玻璃沙漏斗(含酸洗石棉)和ADF重(g)</p><p> 5.2 酸性洗滌木質(zhì)素(ADL)含量的計(jì)算</p><p> ADL(g/g)=(M3-M4)/1.000(g/g)</p&g
107、t;<p> 式中:M3—酸消解后玻璃砂漏斗(含酸洗石棉)烘干后重(g)</p><p> M4—灰化后玻璃砂漏斗(含酸洗石棉)中(g)</p><p> 5.3 纖維素含量的計(jì)算:</p><p> 纖維素(g/g)=ADF-ADL=(M1-M2)/1.000(g/g)-(M4-M3)/1.000(g/g)</p><p&
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