水稻內(nèi)生真菌與其化感作用相關(guān)性的研究.pdf

1、本研究以強(qiáng)化感水稻PI312777和弱化感水稻Lemont為材料，田間種植并進(jìn)行干旱脅迫處理，同時(shí)以濕地種植的材料為對(duì)照。對(duì)其內(nèi)生真菌進(jìn)行平板分離培養(yǎng)、菌種鑒定、發(fā)酵培養(yǎng)，并對(duì)其發(fā)酵液進(jìn)行化感效應(yīng)分析；結(jié)合T-RFLP技術(shù)對(duì)水稻內(nèi)生真菌的群落多樣性進(jìn)行研究。具體結(jié)果如下： 1、以平板培養(yǎng)法從供試樣品中共分離出103株內(nèi)生真菌，經(jīng)鑒定主要為子囊菌亞門和半知菌亞門真菌。從四種供試樣品中分離所得內(nèi)生真菌數(shù)量呈規(guī)律性變化：干旱脅迫PI3

2、12777得到38株，濕地PI312777得到26株，干旱脅迫Lemont得到22株，濕地Lemont得到17株。在此兩種處理?xiàng)l件下，強(qiáng)、弱化感水稻的內(nèi)生真菌均以鐮刀菌屬為優(yōu)勢(shì)菌群；強(qiáng)化感水稻PI312777中黃孢原毛平革菌(具有降解酚酸類物質(zhì)的功能)和麥角菌(具有產(chǎn)生生物堿物質(zhì)的功能)的分離頻率高于弱化感水稻Lemont，且在干旱脅迫下，上述兩類真菌的分離頻率均顯著高于濕地種植的同種水稻。此外，強(qiáng)化感水稻PI312777中還分離到特有

3、真菌毛殼霉(具有產(chǎn)生生物堿物質(zhì)的功能)。 2、內(nèi)生真菌發(fā)酵液的生物測(cè)試結(jié)果顯示：85％以上內(nèi)生真菌的發(fā)酵液對(duì)稗草生長(zhǎng)表現(xiàn)為不同程度的化感抑制，而并不影響其宿主水稻的生長(zhǎng)；對(duì)稗草抑制率在50％以上的內(nèi)生真菌分別來(lái)自于鐮刀菌屬、木霉屬、彎胞霉屬、麥角屬和毛殼霉屬；彎胞霉屬、毛殼霉屬真菌為強(qiáng)化感水稻PI312777所特有；麥角屬真菌的化感抑草效率最高，對(duì)稗草根、莖的抑制率分別為92.36％和75.38％；麥角屬真菌在強(qiáng)化感水稻中的分離

4、頻率高于弱化感水稻，且此真菌在干旱脅迫處理下的分離頻率高于對(duì)照。 3、利用限制性內(nèi)切酶HaeⅢ和HinfⅠ，分別對(duì)擴(kuò)增所得內(nèi)生真菌ITS區(qū)間酶切，經(jīng)毛細(xì)管電泳分析結(jié)果表明：四種供試樣品內(nèi)生真菌群落結(jié)構(gòu)之間均存在顯著差異。HaeⅢ酶切得到T-RFs分別是：干旱脅迫PI312777為28個(gè)， Lemont為17個(gè)，其對(duì)照株分別為19和16個(gè)；HinfⅠ酶切得到T-RFs分別是：干旱脅迫PI312777為29個(gè)，Lemont為26個(gè)，

5、其對(duì)照株分別為24和13個(gè)；經(jīng)Dickie真菌數(shù)據(jù)庫(kù)序列長(zhǎng)度比對(duì)，22種內(nèi)生真菌主要屬于擔(dān)子菌亞門。T-RFs的生物信息學(xué)分析結(jié)果表明，強(qiáng)化感水稻PI312777中可降解酚酸類物質(zhì)的腐生真菌數(shù)量高于弱化感水稻Lemont，同時(shí)干旱脅迫處理也會(huì)誘導(dǎo)該類內(nèi)生真菌數(shù)量的增多；光硬皮馬勃(含麥角甾醇)、絲膜菌屬(可產(chǎn)生奧萊毒素)、鵝膏菌(可產(chǎn)生鵝膏菌毒素)均為強(qiáng)化感水稻PI312777所特有。 綜上所述，內(nèi)生真菌與其宿主是一個(gè)相互影響、