茶樹(shù)內(nèi)生真菌的相互作用、內(nèi)生性及抗菌活性研究.pdf

1、福建師范大學(xué)碩士學(xué)位論文茶樹(shù)內(nèi)生真菌的相互作用、內(nèi)生性及抗菌活性研究姓名：曾如意申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：微生物學(xué)指導(dǎo)教師：楊民和20090501中文文摘中文文摘近年來(lái)，內(nèi)生真菌的研究已經(jīng)越來(lái)越多和深入，其研究的意義更加突出。內(nèi)生真菌入侵植物組織后，在長(zhǎng)期的進(jìn)化過(guò)程中，逐漸地形成了和諧的共生關(guān)系，相互促進(jìn)。內(nèi)生真菌能產(chǎn)生的一些代謝產(chǎn)物，幫助宿主植物更好、更快地適應(yīng)生存環(huán)境，抵抗外界干擾：而宿主植物則能為內(nèi)生真菌提供營(yíng)養(yǎng)，保證其正常的生長(zhǎng)繁

2、殖。分離出來(lái)的內(nèi)生真菌能產(chǎn)生具有藥效成分的次級(jí)代謝產(chǎn)物，對(duì)我們的生活幫助很大，產(chǎn)生一定的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。有些內(nèi)生真菌通過(guò)適當(dāng)?shù)母脑?，能產(chǎn)生更為突出的價(jià)值。植物里存在數(shù)量眾多、種類(lèi)各異的內(nèi)生真菌，蘊(yùn)含了具有很大價(jià)值的資源，對(duì)于這些資源的開(kāi)發(fā)，將很大程度上幫助我們改善生活。本課題選取茶葉為研究材料，以茶葉里分離得到的內(nèi)生真菌，展開(kāi)研究工作。采集得到的茶葉，要進(jìn)行表面消毒，以保證分離得到的內(nèi)生真菌不是表面菌。分離的菌有些數(shù)量占優(yōu)勢(shì)，生長(zhǎng)也

3、比較快；有些菌數(shù)量小，而且生長(zhǎng)相對(duì)比較慢，要對(duì)分離得到的各種內(nèi)生真菌進(jìn)行分離純化。對(duì)分離純化得到的一株炭角菌菌株進(jìn)行物種鑒定。形態(tài)學(xué)上，我們觀察其顯微結(jié)構(gòu)，通過(guò)不同的方式誘導(dǎo)產(chǎn)生孢子，但都沒(méi)得到孢子；在分子生物學(xué)方面，我們提取菌株Iell2517的rDNA，用通用引物擴(kuò)增獲得ITS序列，進(jìn)行序列測(cè)序。用生物軟件構(gòu)建進(jìn)化樹(shù)，從同源性上看與炭角菌屬親緣關(guān)系比較近，并結(jié)合其形態(tài)特征，初步判斷該菌株為炭角菌屬(XylariaspIell2517

4、)的真菌。XylariaspIell2517重寄生于芒果球座菌，對(duì)這一現(xiàn)象與機(jī)制做進(jìn)一步研究。XylariaspIell2517與芒果球座菌對(duì)峙培養(yǎng)，開(kāi)始時(shí)，XylariaspIell2517與芒果球座菌都能正常生長(zhǎng)，當(dāng)兩者相接觸時(shí)，XylariaspIell2517的形態(tài)發(fā)生了變化，菌絲顏色逐漸加深，變粗。XylariaspIell2517菌絲在與球座菌接觸的地方發(fā)生了化學(xué)反應(yīng)，接觸部位顏色也加深，有些XylariaspIel1251

5、7的菌絲通過(guò)接觸點(diǎn)侵入穿透芒果球座菌菌絲，有些XylariaspIell2517菌絲則纏繞著球座菌菌絲。此時(shí)，有些芒果球座菌菌絲破裂死亡，或生長(zhǎng)速度明顯減慢，或者停止了生長(zhǎng)，而XylariaspIell2517生長(zhǎng)正常。這一過(guò)程是侵襲、識(shí)別、接觸、纏繞、穿透和寄生。在這過(guò)程中，XylariaspIell2517產(chǎn)生了抑制球座菌生長(zhǎng)的物質(zhì)。這一研究為重寄生過(guò)程和機(jī)制的研究進(jìn)一步提供理論依據(jù)。內(nèi)生真菌從入侵，到在宿主內(nèi)定植成功，共同進(jìn)化成為