蝶蛹金小蜂寄生對菜粉蝶蛹細胞免疫與生理代謝的影響.pdf

1、蝶蛹金小蜂Pteromaluspuparum是菜粉蝶Pierisrapae蛹期優(yōu)勢內寄生蜂，該蜂僅以毒液抑制寄主免疫。本論文就蝶蛹金小蜂寄生對寄主細胞免疫與生理代謝的影響進行了研究。結果概述如下： 1.蝶蛹金小蜂寄生對菜粉蝶蛹血細胞的影響光學顯微鏡觀察結果表明，受蝶蛹金小蜂寄生影響最大的是寄主顆粒血細胞與漿血細胞。寄生后這兩種血細胞變圓，粘附與延展行為受到抑制，而其它類型血細胞形態(tài)上未受影響。然而透射電鏡觀察結果表明，除囊血細胞

2、外，蝶蛹金小蜂寄生對菜粉蝶蛹各類型血細胞均造成不同程度的損傷。 2.蝶蛹金小蜂毒液對菜粉蝶蛹血細胞包囊與吞噬反應的影響采用尼龍毛法分離純化了菜粉蝶蛹顆粒血細胞與漿血細胞。研究了毒液對菜粉蝶蛹包囊反應關鍵步驟及顆粒血細胞與漿血細胞吞噬反應的影響。結果表明血細胞數量、毒液濃度均顯著影響包囊指數。菜粉蝶蛹體外包囊反應試驗中，包囊反應的第一步為顆粒血細胞粘附在異物上，毒液的存在雖會減少粘附在異物上的顆粒血細胞數量，但不會完全阻止包囊反應

3、第一步的發(fā)生。但毒液的存在能使包囊反應第二步漿血細胞的募集階段無法進行，導致包囊反應第三步即顆粒血細胞粘附在包囊最外層的漿血細胞上，形成包囊的外圍無法實現，最終導致無法形成完整的包囊。菜粉蝶蛹血淋巴漿質對包囊指數無顯著影響。 菜粉蝶蛹顆粒血細胞是主要具有吞噬能力的血細胞，漿血細胞多少也能吞噬大腸桿菌，毒液能顯著抑制顆粒血細胞與漿血細胞吞噬能力，并且這種抑制能力與毒液的劑量正相關。 3.蝶蛹金小蜂寄生對菜粉蝶蛹血淋巴和脂肪

4、體糖代謝的影響研究了蝶蛹金小蜂寄生24h，36h，48h，60h和72h后菜粉蝶蛹血淋巴與脂肪體糖代謝功能。結果表明，經蝶蛹金小蜂寄生的菜粉蝶蛹血淋巴與脂肪體中丙酮酸含量顯著降低，乳酸含量顯著升高，乳酸脫氫酶活性顯著降低，表明進入三羧酸循環(huán)的丙酮酸量減少。蘋果酸脫氫酶與琥珀酸脫氫酶是線粒體中參與三羧酸循環(huán)的關鍵酶。在被蝶蛹金小蜂寄生的初始階段，菜粉蝶蛹血淋巴與脂肪體蘋果酸脫氫酶活性升高，隨著寄生時間的延長，這兩種酶活性被顯著抑制，說明寄

5、生導致菜粉蝶蛹血淋巴與脂肪體呼吸率降低，菜粉蝶蛹設法從無氧糖酵解獲得能量以抵御毒液所帶來的壓力。 4.蝶蛹金小蜂寄生對菜粉蝶蛹抗氧化酶活性與抗氧化劑水平的影響寄主昆蟲在防御寄生蜂等入侵異物時產生氧脅迫，釋放對細胞有毒的活性氧(ROS)。測定了蝶蛹金小蜂寄生24h，36h，48h，60h和72h后菜粉蝶蛹血淋巴及脂肪體與氧脅迫相關的抗氧化酶活性與抗氧化劑水平。蝶蛹金小蜂寄生導致菜粉蝶蛹脂肪體超氧化物歧化酶與血淋巴過氧化氫酶活性及血

6、淋巴與脂肪體谷胱甘肽-S-轉移酶活性顯著下降，說明由于寄生而注入的毒液及菜粉蝶蛹隨之產生的大量ROS鈍化了上述抗氧化酶活性；而菜粉蝶蛹血淋巴與脂肪體谷胱甘肽還原酶活性與還原型谷胱甘肽水平在整個試驗中與對照基本無顯著差異，表明寄生并未誘導谷胱甘肽還原酶與還原型谷胱甘肽產生對抗防衛(wèi)。 5.蝶蛹金小蜂寄生對菜粉蝶蛹質膜上磷酸酶與轉氨酶活性的影響測定了蝶蛹金小蜂寄生24h，36h，48h，60h和72h后菜粉蝶蛹血淋巴與脂肪體結合在質膜