雙層膜栽培對葡萄葉片主要生理生化特性的影響【畢業(yè)論文】

1、<p>　　本科畢業(yè)論文（設計）</p><p>　　論文題目：雙層膜栽培對葡萄葉片主要生理生化特性的影響</p><p>　　所在學院 生物與環(huán)境學院 </p><p>　　專業(yè)班級 生物工程 </p><p>　　學生姓名 學號 &

2、lt;/p><p>　　指導教師 職稱 </p><p>　　完成日期 年 月 日</p><p>　　畢業(yè)論文（設計）誠信承諾書</p><p>　　1．本人承諾所上交的畢業(yè)論文（設計），是在指導教師的指導下嚴格按照學校和學院有關規(guī)定完成的，引用他人的觀點和參

3、考資料均加以注釋和說明。</p><p>　　2．本人鄭重地承諾所上交的畢業(yè)論文（設計）沒有抄襲他人研究（設計）成果和偽造相關數據等行為。</p><p>　　3．畢業(yè)論文（設計）若有侵犯他人知識產權的行為，由本人承擔相應的法律責任。</p><p>　　學生簽名： __________</p><p>　　日 期： _________

4、</p><p><b>　　摘 要</b></p><p>　　在我國南方地區(qū)，特別是在浙江沿海地區(qū)利用大棚設施栽培葡萄，不僅改變了露天葡萄不能栽培的狀況，而且達到提早上市，增加收入等目的，已經成為一種發(fā)展趨勢。但南方沿海頻繁的臺風襲擊，使大棚葡萄常面臨危害。為了使葡萄避開臺風更早成熟上市，進行了雙層膜栽培試驗。</p><p>　　本文以

5、甬優(yōu)一號和夏黑兩個品種的葡萄葉作為材料，研究了雙單層膜對葡萄葉片主要生理生化特性的影響，包含超氧化物歧化酶（SOD）、苯丙氨酸解氨酶（PAL）、多酚氧化酶（PPO）、過氧化氫酶（CAT）的活性及葉綠素含量等。結果發(fā)現，雙單層膜對葡萄葉片生理生化特性有較大影響。試驗結果還發(fā)現，不同品種對葡萄葉片酶的活性也有較大影響。綜合上述實驗證明，雙單層膜和不同品種都會會影響葡萄葉片主要抗氧化酶活性和葉綠素含量，從而影響葡萄的生長發(fā)育。</p&g

6、t;<p>　　關鍵詞：葡萄；雙層膜；單層膜；不同品種；生理生化特性</p><p><b>　　ABSTRACT</b></p><p>　　In the southern region of China, especially in the coastal areas of Zhejiang using plastic greenhouse cult

7、ivation of grapes, which not only changed the open-air cultivation condition, but also increased income, has become a development trend, but frequent typhoons in the southern coastal, which is often harmful to greenhouse

8、 grape. In order to avoid typhoon, early mature grape cultivation with double-membrane were performed.</p><p>　　Grape leaf of two varieties Yongyou No.1 and Summer Black were used to investigate the main eff

9、ects on the physiological and biochemical characteristics of grape leaves of double monolayers, including superoxide dismutase (SOD), phenylalanine ammonia lyase (PAL), polyphenol oxidase (PPO), catalase (CAT) activity a

10、nd chlorophyll content. It was found that two monolayers had great influence on grape leaf physiological and biochemical characteristics. The results show that, grape leaf of different </p><p>　　Keywords: Gr

11、ape; Membrane; Monolayer; Different varieties; Physiological and Biochemical characteristics</p><p><b>　　目 錄</b></p><p><b>　　1 前言1</b></p><p><b>　　2

12、材料與方法2</b></p><p>　　2.1 實驗材料與試劑2</p><p>　　2.1.1 實驗材料2</p><p>　　2.1.2 實驗試劑2</p><p>　　2.1.3 主要儀器及設備3</p><p>　　2.1.4 其他用品3</p><p>　　2

13、.1.5 主要試劑配制3</p><p>　　2.2 實驗方法4</p><p>　　2.2.1 物候期觀測4</p><p>　　2.2.2 樣品的采集與預處理4</p><p>　　2.2.3 主要生理生化特性測定4</p><p><b>　　3 結果與分析7</b></p

14、><p>　　3.1 不同覆膜處理對葡萄物候期的影響7</p><p>　　3.2 雙層膜處理對葡萄葉片超氧化物歧化酶（SOD）活性的影響8</p><p>　　3.3 雙層膜處理對葡萄葉多酚氧化酶（PPO）活性的影響10</p><p>　　3.4 雙層膜處理對葡萄葉過氧化氫酶（CAT）活性的影響11</p><p&

15、gt;　　3.5 雙層膜處理對葉綠素含量的影響12</p><p><b>　　4 結論14</b></p><p><b>　　參考文獻15</b></p><p><b>　　致 謝17</b></p><p><b>　　1 前言</b>&

16、lt;/p><p>　　大棚葡萄栽培解決了長期以來困擾我國南方露地葡萄栽培上病害多，座果率低，品種單調及品質次四大難題。使葡萄提早或延后成熟并使露地難以栽培歐亞種葡萄栽培得以成功，通過大棚栽培還可以確保葡萄充分成熟采收，提高品質。</p><p>　　葡萄冬季休眠需低溫時數7.2℃以下約1500－2000小時，充分的低溫休眠可提高發(fā)芽和開花的整齊度[1]。在江浙滬常年月1月底至2月上旬結束休眠

17、，因而2月上旬是保溫（不加溫）大棚覆膜的最佳時期，此時已避開全年最低溫度（1月），溫度開始緩慢上升，充分利用光能，利于蓄熱保溫。如在冬季落葉后（1-12月），用20%石灰氮液處理一年生枝芽，對葡萄有明顯的提早一周左右破眠[2]、萌芽、開花、結果的效應。對保溫或加溫大棚均適當提早覆蓋。石灰氮先用溫水攪拌溶解，沉淀后的清液，隨時隨用，可用毛刷涂刷休眠的芽眼，而對花質量無不良影響。在選擇薄膜時，薄膜的強度高低地南方大棚葡萄栽培的重要因素，夏季

18、高溫、強紫外線照射使用薄膜迅速老化，經初秋臺風襲擊使薄膜損壞漏水，導致果實發(fā)生病害。目前國內生產的高強度塑料薄膜地理想的抗老長壽膜。早熟品種從2月覆蓋到8月果實采收后揭膜；晚熟品種從3月覆蓋至9月果實采收，歷時均不越過半年，長壽膜老化不明顯，因而可以連續(xù)使用2季（2年）[3]。但晚熟品種每檔棚架均需加上壓膜線，以增加抗風能力，膜取下需第上標簽注明棚號，以備用來年蓋在相同棚上，大棚膜幅以8米為宜，可以直接覆蓋兩側，</p>

19、<p>　　本文是以甬優(yōu)一號和夏黑兩種的葡萄葉片在雙單層膜的情況下為材料。采用高速冷凍離心和比色法[6]等方法，研究雙單層膜和不同品種對葡萄葉片主要生理生化特性（如超氧化物歧化酶、多酚氧化酶、過氧化氫酶的活性及葉綠素含量等）的影響，為葡萄早熟優(yōu)質栽培技術研究提供參考。</p><p>　　“甬優(yōu)1號”是我市自主選育出的藤稔“芽變”新品種。該品種成熟早、抗性強、肉質脆、風味甜、果實商品性好，設施栽培情況下

20、可一年二熟。2006年，“甬優(yōu)1號”被評為“寧波市十大名果”，目前市場批價已高達10元/Kg以上，畝效益超過萬元，極具推廣前景。</p><p><b>　　2 材料與方法</b></p><p>　　2.1 實驗材料與試劑</p><p>　　2.1.1 實驗材料</p><p>　　本實驗所用的材料是以甬優(yōu)一號和夏黑

21、兩個品種的葡萄葉片進行生理生化的研究。用編號1~8表示葡萄樣品。具體樣品見表1。</p><p>　　表1 實驗樣品一覽表</p><p>　　2.1.2 實驗試劑</p><p>　　表2 實驗試劑一覽表</p><p>　　2.1.3 主要儀器及設備</p><p>　　表3 主要儀器設備</p>

22、<p>　　2.1.4 其他用品</p><p>　　研缽、容量瓶（500mL、250mL、100mL、50mL、25mL）、量筒（500mL、100mL、10mL）、燒杯（1L、500mL、100mL）、移液管（0.5mL、1mL、5mL）、移液槍、洗耳球、蒸餾水、手術剪刀、一次性手套、一次性橡膠手套。</p><p>　　2.1.5 主要試劑配制</p>&

23、lt;p>　?。?）130mmol/L甲硫氨酸（Met）溶液：稱取1.9399g Met，用磷酸緩沖液定容至100mL。</p><p>　?。?）750µmol/L氮藍四唑溶液（NBT）：稱取0.06133g NBT，用磷酸緩沖液定容至100mL，避光保存。</p><p>　?。?）100µmol/L EDTA-Na2溶液：稱取0.03721g EDTA-Na

24、2，用磷酸緩沖液定容至1000mL。</p><p>　?。?）20µmol/L核黃素溶液：稱取0.0753g核黃素，用蒸餾水定容至1000mL，避光保存。</p><p>　?。?）0.02mol/L苯丙氨酸溶液：稱取3.3038g苯丙氨酸，用0.1mol/L pH8.8硼酸緩沖液定容至1000mL。</p><p>　?。?）0.1mol/L鄰苯二酚溶

25、液：稱取1.1011g鄰苯二酚，用蒸餾水定容至100mL。</p><p>　?。?）0.1mol/L H2O2溶液：市售30% H2O2大約等于17.6mol/L，取30% H2O2溶液5.68mL，稀釋至1000mL，用標準0.1mol/L高錳酸鉀溶液（在酸性條件下）進行標定。</p><p><b>　　2.2 實驗方法</b></p><p

26、>　　2.2.1 物候期觀測</p><p>　　物候期觀察采用田間調查法進行，每品種隨機選取5棵生長正常的樹，從2010年2月開始直至葡萄開始落葉為止，記錄每個品種的物候期如傷流期、萌芽期、開花期、漿果生長期和漿果成熟期[7]等，并統(tǒng)計從發(fā)芽到成熟的天數。</p><p>　　2.2.2 樣品的采集與預處理</p><p>　　試驗于2011年在江北地區(qū)進行

27、，在5月到8月期間，隔一段時間，采取樣品，對不同樣品進行分裝并冷藏于-40℃冰箱內保存?zhèn)溆谩?lt;/p><p>　　2.2.3 主要生理生化特性測定</p><p>　　2.2.3.1 超氧化物歧化酶（SOD）活性</p><p>　　超氧化物歧化酶的活性采用氮藍四唑（NBT）[9]光化還原法測定。該方法依據超氧化物歧化酶抑制氮藍四唑在光下的還原作用來確定酶活性大小。

28、在有氧化物質存在下，核黃素可被光還原，被還原的核黃素在有氧條件下極易再氧化而產生超氧陰離子自由基，超氧陰離子自由基可將氮藍四唑還原為藍色的甲腙，后者在560nm處有最大吸收峰。而SOD可清除超氧陰離子自由基，從而抑制了甲腙的形成，其抑制強度與酶活性再一定范圍內成正比。于是光還原反應后，反應液藍色愈深，說明酶活性愈低，反之酶活性愈高。據此可以計算出酶活性大小。SOD活性單位是抑制氮藍四唑光化還原的50%為一個酶活性單位表示?？砂匆韵鹿接?/p>

29、算SOD活性：</p><p>　　SOD總活性（酶單位/g鮮重）=（AO-AS）×VT/（AO×0.5×W×V1）</p><p>　　式中：AO為光照對照管的吸光度值；AS為樣品管的吸光度值；VT為樣液總體積（mL）；V1為測定時樣品用量（mL）；W為樣品的重量（g）。</p><p>　　酶液提?。喝∫呀涍^預處理的樣品0

30、.5g置于預冷的研缽中，加入5mL預冷的50mmol/L （pH7.8）磷酸緩沖液(分幾次加入)，在冰浴下研磨成勻漿，10000r/min下離心10min（2~4℃）。上清液即為SOD粗提液。</p><p>　　顯色反應：取5mL玻璃管（要求透明度好）7支，3支為測定管，3支為對照管，另外1支為空白對照。按下表4加入各種溶液：</p><p>　　表4 各溶液加入量</p>

31、<p>　　混勻后取一支對照管置暗處，其他各管于4000LX日光下反應20min（要求各管受光情況一致，溫度高時間縮短，溫度低時間延長）。SOD活性測定與計算：至反應結束后，以不照光的對照管作空白，分別測定其他各管的吸光度并進行SOD活性計算。</p><p>　　2.2.3.2 多酚氧化酶（PPO）活性</p><p>　　多酚氧化酶是一種含銅的氧化酶，常用鄰苯二酚（兒茶酚

32、）通過比色法測量產物的形成，以此來測定多酚氧化酶的活力。本次測定參考蔡漢權等[10]關于橄欖材料中多酚氧化酶活力的敘述測定方法進行。</p><p>　　PPO活力（0.01A×min-1）=A×D/（0.01×t×a）</p><p>　　式中：A為反應時間內吸光度的變化值；D為稀釋倍數，即提取的總酶液為反應系統(tǒng)內酶液體積的倍數；t為反應時間（mi

33、n）；W為樣品鮮重（g）。</p><p>　　酶液制備：稱取已經過預處理的樣品1.0g置于研缽中，加入0.5g PVP和10mL 0.1mol/L pH6.5磷酸緩沖液，研磨成勻漿，濾液加入30%飽和度硫酸銨，離心除沉淀，上清液再加硫酸銨使達60%飽和度，離心收集沉淀。將所得沉淀溶于2~3mL 0.01mol/L pH6.5磷酸緩沖液即為酶液，以上操作均在4℃下進行。</p><p>　

34、　酶活力的測定：在試管中加入2.0mL 0.05mol/L pH5.5磷酸緩沖液，1.0mL 0.1ml/L鄰苯二酚，1.0mL酶液，迅速搖勻后于525nm波長處測定吸光值，然后倒入試管中，放入37℃恒溫水浴中保溫10min，加入2mL 20%三氯乙酸終止反應，離心取上清。于525nm波長處測定吸光值（以上實驗均做3個平行）。</p><p>　　2.2.3.3 過氧化氫酶（CAT）活性</p>&

35、lt;p>　　過氧化氫酶是一種血紅蛋白酶，含有鐵，它能催化過氧化氫分解為水和分子氧，在此過程中起傳遞電子的作用，過氧化氫既是氧化劑又是還原劑。故可根據H2O2的消耗量或O2的生成量測定該酶活力大小。酶活性用每g鮮重樣品1min內OD變化值表示：</p><p>　　CAT活性（A×g-1×min-1）=A×V/（W×a×t）</p><p

36、>　　式中：A為反應時間內吸光度的變化值；V是提取酶液總量（mL）；a是測定時酶液用量（mL）；W為樣品鮮重（g）；t反應時間（min）。</p><p>　　本次測定方法參考相關文獻[11]進行操作。酶液提?。喝悠?.5g加入pH7.0的磷酸緩沖溶液少量，研磨成勻漿。將其轉移至容量瓶中，用該緩沖液沖洗研缽，并定容至10mL，于10000r/min下離心15min，上清液即為過氧化氫酶的粗提液，以上操作均

37、在4℃下進行。</p><p>　　酶活性測定：取10mL試管4支，其中1支為對照管，3支為處理管，按表5順序加入試劑，其中對照管中加入的粗酶液為煮死后的酶液。</p><p>　　表5 各溶液加入量</p><p>　　25℃預熱后，逐管加入0.1mol/L H2O2 0.3mL，每加完一管立即記時，并迅速倒入石英比色皿中，240nm下測定吸光度，每隔1min讀

38、數1次，共測4min，待3支管全部測定完后，計算酶活力。將每分鐘OD值減少0.01定義為一個酶活力單位（以上實驗均做3個平行）。</p><p>　　2.2.3.4 葉綠素含量</p><p>　　高等植物光合作用過程中利用的光能是通過葉綠體色素（光合色素）吸收的。葉綠體色素由葉綠素a、葉綠素b、胡蘿卜素和葉黃素組成。葉綠素不溶于水，溶于有機溶劑，可用多種有機溶劑，如丙酮、乙醇或二甲基亞砜

39、等研磨提取或浸泡提取。葉綠色素在特定提取溶液中對特定波長的光有最大吸收峰，用分光光度計測定在該波長下葉綠素溶液的吸光度（也稱為光密度），再根據葉綠素在該波長下的吸收系數即可計算葉綠素含量。</p><p>　　將測定得到的吸光值代入下面的式子：Ca=12.7A663-2.69A645</p><p>　　Cb=22.9A645-4.68A663</p><p>　　

40、據此即可得到葉綠素a和葉綠素b的濃度（Ca、Cb：mg/L），二者之和為總葉綠素的濃度。最后根據下式可進一步求出植物組織中葉綠素的含量：葉綠素的含量（mg/g）=（葉綠素的濃度×提取液體積×稀釋倍數）/樣品鮮重（或干重）。</p><p>　　操作步驟按文獻[12]進行。葉綠素提?。悍Q取已經過預處理的樣品0.5g放入研缽中，加少量石英砂和碳酸鈣粉及5mL純丙酮，研磨成均漿，再加80%丙酮5mL

41、，將勻漿轉入離心管，并用適量80%丙酮洗滌研缽，一并轉入離心管，離心后棄沉淀，上清液用80%的丙酮定容至25mL。</p><p>　　測定光密度：取葉綠體色素提取液1mL，加80%丙酮4mL稀釋后轉入比色皿中，以80%丙酮為對照，分別測定波長663nm、645nm下測定吸光度并進行計算。</p><p><b>　　3 結果與分析</b></p>&l

42、t;p>　　3.1 不同覆膜處理對葡萄物候期的影響</p><p>　　本試驗進行了不同覆膜處理對夏黑和甬優(yōu)一號主要物候期影響的觀測，結果如表6所示。由表6可見，無論是夏黑品種還是甬優(yōu)1號品種，雙層膜處理下的各個主要物候期指標均早于單層膜處理，其中夏黑品種雙層膜處理的成熟期比單層膜處理相同處理早17d，甬優(yōu)一號則提早14d。由此表明，雙層膜處理可使葡萄品種提前成熟，這與雙層膜條件下的光溫變化有關。</

43、p><p>　　表6 雙層膜栽培對葡萄主要物候期的影響</p><p>　　3.2 雙層膜處理對葡萄葉片超氧化物歧化酶（SOD）活性的影響 </p><p>　　超氧化物歧化酶（SOD）是活性氧清除系統(tǒng)中最重要的抗氧化酶，在保護細胞免受氧化損傷過程中具有十分重要的作用[13-14]。SOD能催化氧自由基的歧化反應，生成H2O2和

44、O2，H2O2在過氧化物酶（POD）、過氧化氫酶（CAT）和谷胱甘肽過氧化物酶催化下轉化為水而得以清除[15-16]。因此，SOD在機體內實為氧自由基的消除劑，能消除負1價自由基對生物體的毒害，是生物體抗氧化脅迫的關鍵酶類，其活性決定了O2和H2O2的濃度。</p><p>　　本試驗對雙層膜處理對葡萄葉片超氧化物歧化酶活性變化進行了檢測，結果見圖1和圖2。由圖1和圖2可見，雙層膜對葡萄葉片SOD活性影響較大，無

45、論是夏黑還是甬優(yōu)1號，SOD活性在雙層膜設施條件下高于單層膜，且隨著葡萄漿果的不斷成熟都逐漸升高。由結果還可看出，夏黑品種雙層膜處理8月份的SOD活性明顯低于7月份，這與前面的物候期觀察結果是一致的。夏黑雙層膜在7月份就已成熟。而甬優(yōu)1號則在8月份成熟。</p><p>　　圖1 雙單層膜對夏黑葉片SOD值的影響</p><p>　　注：圖中藍色線處理I為單層膜處理；紅色線處理II為雙層膜

46、處理。</p><p>　　圖2 雙單層膜對甬優(yōu)一號葉片SOD值的影響</p><p>　　注：圖中藍色線處理I為單層膜處理；紅色線處理II為雙層膜處理。</p><p>　　3.3 雙層膜處理對葡萄葉多酚氧化酶（PPO）活性的影響</p><p>　　植物組織酶促褐變是由于多酚氧化酶（PPO）與酚類物質的區(qū)域化分布被打破，PPO催化酚類物質

47、氧化、聚合所引起[17-18]。PPO分布于細胞的細胞質、質體、線粒體等細胞器中，而酚類物質存在于液泡中，在正常條件下，由于PPO和褐變底物（酚類物質）在細胞中區(qū)域化的分布，果實不會發(fā)生褐變。逆境或衰老等因素會刺激活性氧增加，損傷細胞結構，打破PPO與酚類物質的區(qū)室化分布，引起果實褐變[19]。</p><p>　　本試驗對不同產地和不同品種對葡萄葉的多酚氧化酶活性變化進行了檢測，結果見圖3和圖4。由圖3和圖4可

48、見，雙層膜對葡萄葉片PPO活性影響較大，無論是夏黑還是甬優(yōu)1號，PPO活性在雙層膜設施條件下高于單層膜，且隨著葡萄漿果的不斷成熟都逐漸升高。由結果還可看出，夏黑品種雙層膜處理8月份的PPO活性明顯低于7月份，這與前面的物候期觀察結果是一致的。夏黑雙層膜在7月份就已成熟。而甬優(yōu)1號則在8月份成熟。</p><p>　　圖3 雙單層膜對夏黑葉片PPO值的影響</p><p>　　注：圖中藍色線

49、處理I為單層膜處理；紅色線處理II為雙層膜處理。</p><p>　　圖4 雙單層膜對甬優(yōu)一號葉片PPO值的影響</p><p>　　注：圖中藍色線處理I為單層膜處理；紅色線處理II為雙層膜處理。</p><p>　　3.4 雙層膜處理對葡萄葉過氧化氫酶（CAT）活性的影響</p><p>　　過氧化氫酶（CAT）是生物體內主要的抗氧化酶之一

50、。其功能是催化細胞內過氧化氫的分解，從而使細胞免于遭受過氧化氫的毒害。幾乎所有的生物體都存在過氧化氫酶，可以反映某一時期植物體內代謝的變化。在植物中過氧化氫酶主要清除光呼吸、線粒體電子傳遞以及脂肪酸β-氧化等過程中產生的H2O2[20-21]。</p><p>　　本試驗對不同品種和不同產地對葡萄葉片的過氧化氫酶活性變化進行了檢測，結果見圖5和圖6。由圖5和圖6可見，雙層膜對葡萄葉片CAT活性影響很大，無論是夏黑

51、還是甬優(yōu)一號，CAT活性在雙層膜設施條件下高于單層膜，且隨著葡萄漿果的不斷成熟都逐漸升高。</p><p>　　圖5 雙單層膜對夏黑葉片CAT值的影響</p><p>　　注：圖中藍色線處理I為單層膜處理；紅色線處理II為雙層膜處理。</p><p>　　圖6 雙單層膜對甬優(yōu)一號葉片CAT值的影響</p><p>　　注：圖中藍色線處理I為單

52、層膜處理；紅色線處理II為雙層膜處理。</p><p>　　3.5 雙層膜處理對葉綠素含量的影響</p><p>　　葉片葉綠素含量與光合作用密切相關，是反眏葉片生理狀態(tài)的重要指標。在植物光合生理、發(fā)育生理和抗性生理研究中經常需要測定葉綠素含量[22]。葉綠素含量也是指導作物栽培生產和選育作物品種的重要指標。</p><p>　　本試驗采用分光光度法對不同產地和不同

53、品種對的葡萄葉葉綠素含量進行了測定，結果見圖7和圖8。由圖7和圖8可見，雙層膜對葡萄葉片葉綠素的影響較大，雙層膜處理使夏黑和甬優(yōu)一號葡萄葉片葉綠素a和葉綠素b含量增加，且隨著葡萄的成熟期不斷增加。由圖7還可看出，夏黑品種雙層膜處理8月份的葉綠素含量明顯低于7月份，這與前面的物候期觀察結果是一致的。夏黑雙層膜在7月份就已成熟。而甬優(yōu)一號則在8月份成熟。</p><p>　　圖7 雙單層膜對夏黑葉片葉綠素含量的影響&

54、lt;/p><p>　　注：圖中藍色線處理I為單層膜處理；紅色線處理II為雙層膜處理。</p><p>　　圖8 雙單層膜對甬優(yōu)一號葉片葉綠素含量的影響</p><p>　　注：圖中藍色線處理I為單層膜處理；紅色線處理II為雙層膜處理。</p><p><b>　　4 結論</b></p><p>　

55、　超氧化物歧化酶（SOD）與過氧化氫酶（CAT）在生物體內都具有非常重要的生理功能。它們都是是活性氧清除系統(tǒng)中最重要的抗氧化酶，在保護細胞免受氧化損傷過程中具有十分重要的作用[23]。SOD與CAT等一起構成了生物體內重要的酶促反應防御體系，從而維護生物體內細胞正常的生理代謝和生化反應。多酚氧化酶（PPO）是植物體中的保護酶，它們的強弱直接關系到植株抵御病害的能力，它們的活性越大其抗病性越強；反之，活性越小，植株的抗病性越弱[15]。在

56、植物生長發(fā)育過程中，這兩種酶的活性不斷發(fā)生變化。PPO是含銅的酶，在正常的情況下，PPO和底物在細胞質中是分開的。當細胞受輕微破壞組織衰老時，有些細胞結構解體時，多酚氧化酶和底物接觸，發(fā)生反應，將酚氧化為棕褐色的醌。醌對微生物有毒，可防止植物感染。葉綠素是反映葉片生理狀態(tài)的重要指標，其含量也是指導作物栽培生產和選育作物品種的重要指標。</p><p>　　本試驗研究發(fā)現，夏黑和甬優(yōu)1號葉片中SOD、PPO和CAT

57、活性都是雙層膜設施條件下高于單層膜，且隨著葡萄漿果的不斷成熟都逐漸升高。由此表明雙層膜條件下的光照脅迫對以上三種抗氧化酶活性有較大的促進作用。本研究結果還表明，雙層膜處理使夏黑和甬優(yōu)1號葡萄葉片葉綠素a和葉綠素b含量增加，葉綠素a/b值下降。在光照脅迫下，葡萄植株葉片通過增加葉綠素含量來盡可能捕捉光能。當植物在光照強度不斷減弱的條件下，可通過提高葉綠素及類胡蘿卜素的含量來捕捉光能，從而增強植物對光的吸收利用，保證植物在逆境下的正常生長[

58、24]。</p><p><b>　　參考文獻</b></p><p>　　[1] 郝建軍,康宗利.植物生理學試驗技術[M].化學工業(yè)出版社,2006,12:68-72.</p><p>　　[2] 楊興有,劉國順.光強對煙草幼苗形態(tài)和生理指標的影響[J].應用生態(tài)學報,2007,18(11): 2643-2644.</p>

59、<p>　　[3] 孫治強,張惠梅.低溫弱光對番茄葉綠素含量變化的影響[J].華北農學報,2005,20(1):83-85</p><p>　　[4] 李美茹,王以柔.光照強度調控4種亞熱帶森林植物葉片的抗氧化能力[J].植物生態(tài)學報, 2001,25(4):463-464.</p><p>　　[5] Mishra N P, Singhal G S. Changes in t

60、he activities of antioxidant enzymes during exposure of intact wheat leaves to strong visible light at different temperature of intact in the presence of protein synthesis inhibitors [J].Plant Physiol,1993,102:903-910.&l

61、t;/p><p>　　[6] 劉娟妮,王雪青.溫度和光照對極大螺旋藻多糖含量和SOD酶活力的影響[J].食品工業(yè)科技,2008,9:133-134.</p><p>　　[7] 劉蘇靜,周青.不同光照條件鋱對辣根過氧化物酶(HRP)生態(tài)毒理效應的影響[J].農業(yè)環(huán)境科學學報,2007,26(3):977-979.</p><p>　　[8] Bowler C,Van M

62、ontagu M.Superoxide dismutase and stress tolerance[J].Annual Review of Plant Physiology and Plant Molecule Biology, 1992,43:83-116.</p><p>　　[9] 孔祥生,易現峰編著.植物生理學實驗技術[M].中國農業(yè)出版社,2008,42:259-261.</p><

63、;p>　　[10] 蔡漢權,李粉玲.幾種橄欖材料的多酚氧化酶活力[J].亞熱帶農業(yè)研究,2005,1(4):34-37.</p><p>　　[11] 劉萍,李明軍編著.植物生理學實驗技術[M].科學出版社,2007,11:128-129.</p><p>　　[12] 李玲編著.植物生理學模塊實驗指導[M].科學出版社,2009,11(1):108-109.</p>

64、<p>　　[13] 張志良,瞿偉菁編著.植物生理學實驗指導[M].高等教育出版社,2004,12:120-123.</p><p>　　[14] 羅國光.國內外葡萄產業(yè)發(fā)展現狀[J].寧夏葡萄產業(yè),2003,26(1):46-50. </p><p>　　[15] 郭興,潘登奎.植物超氧化物歧化酶的研究及其在基因工程中的應用[J].山西農業(yè)學報, 2008,36(3):3-6

65、.</p><p>　　[16] 陳金峰,程素滿.過氧化氫酶在植物脅迫響應中的功能研究進展[J].西北植物學報, 2008, 28(1):188-193.</p><p>　　[17] 范月仙.植物過氧化氫酶的研究進展[J].安徽農學通報,2008,4(5):58-63.</p><p>　　[18] 魯翠濤,梅興國.千層塔生物學特性的初步研究[J].中國野生植物資

66、源,2002,21(4): 176- 178.</p><p>　　[19] 耿兆林.發(fā)展中的中國葡萄酒業(yè)[J].中外葡萄與葡萄酒,2003,11(1):5-6.</p><p>　　[20] 魯巍,崔洪秋.錳葉面噴施對大豆光合特性及葉綠體色素的影響[J].黑龍江八一農墾大學學報,2006,13(6):12-15.</p><p>　　[21] Parida R

67、K,Kar M.Enhancement of senescence in excised rice leaves by hydrogen peroxide[J].Can J Bot,1978,56:2937-2941.</p><p>　　[22] Zhang H, Allen R.Overexpression of an Arabidopsis peroxisomal ascorbate peroxidase

68、gene in tobacco increases protection against oxidative stress[J].Plant Cell Physiol,1999,40:725-732.</p><p>　　[23] 段玉權,馮雙慶,趙玉梅等.1-甲基環(huán)丙稀處理對冷藏桃果肉細胞超微結構的影響[J].中國農業(yè)科學,2004,37(12):2039-2042.</p><p>　

69、　[24] 李燕婷,李秀英.葉面肥的營養(yǎng)機理及應用研究進展[J].中國農業(yè)科學,2009,42(1):162-172.致 謝</p><p>　　本研究是在王老師的精心指導和大力支持下完成的。王老師以其嚴謹求實的治學態(tài)度和高度的敬業(yè)精神對我產生了重要影響。從論文的選題到最后的答辯，每一個環(huán)節(jié)，無不得到他的悉心指導和幫助。謹此之際，對王老師諄諄教誨和精心培養(yǎng)表示衷心的感謝。同時，在此次畢業(yè)設計過程中也得到譚老師的