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文檔簡介
1、本論文將傳統(tǒng)微生物檢測方法和現(xiàn)代分子生物學(xué)檢測手段相結(jié)合,比較研究了不同精粗比和不同氮源日糧條件下主要纖維降解菌群的變化,并通過瘤胃發(fā)酵規(guī)律和纖維素酶活的檢測來進(jìn)一步探討瘤胃微生物對纖維物質(zhì)的降解機理。試驗分兩期進(jìn)行。 1.不同精粗比日糧對瘤胃纖維降解菌群和纖維物質(zhì)降解的影響 試驗選用9只體況良好、體重50公斤左右的蘇尼特綿羊隨機分為三組,每組3只。Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組精粗比分別為1:9、3:7和5:5。通過傳統(tǒng)檢測方法檢測
2、不同精粗比日糧對瘤胃真菌、細(xì)菌濃度和數(shù)量的影響差異不顯著(P>0.05);密毛蟲、雙毛蟲、頭毛蟲、總纖毛蟲數(shù)量變化顯著(P<0.05),Ⅱ組數(shù)量最高;纖維降解菌的數(shù)量隨精料增加呈下降趨勢,且組間差異顯著(P<0.05),定量雜交方法和定量PCR方法也得到相同結(jié)果。F.succinogenes通過兩種分子生物學(xué)方法檢測受日糧影響均不顯著,但在三株纖維分解菌中占絕對優(yōu)勢:R.albus和R.flavefaciens的定量PCR方法檢測結(jié)果為
3、Ⅱ組顯著高于Ⅲ組(P<0.05)。隨精料增加瘤胃pH呈下降趨勢,組間差異顯著(P<0.01);氨氮和總揮發(fā)性脂肪酸濃度與之相反,Ⅲ組顯著高于I組和Ⅱ組(P<0.01);乙酸摩爾濃度百分比隨精料增加顯著降低(P<0.05),丙酸和丁酸摩爾濃度顯著升高(P<0.05)。不同精粗比日糧對固相食靡流通速率、纖維物質(zhì)的動態(tài)降解率影響不顯著(p>0.05)。不同處理組之間各消化道部位的流通速率、消化率差異均不顯著(p>0.05),但纖維類物質(zhì)在瘤胃
4、的消化率表現(xiàn)為Ⅰ組高于Ⅱ組和Ⅲ組,整個消化道的比較結(jié)果3:7和1:9日糧高于5:5日糧。各組之間液相流通速率差異顯著(p<0.05),即3:7組數(shù)值較高,對瘤胃體積的影響不顯著(p>0.05)。日糧精粗比變化對綿羊瘤胃液相纖維素酶影響不顯著(p>0.05);而對固相酶活有一定影響,結(jié)果為Ⅲ組果膠酶活顯著高于Ⅰ組和Ⅱ組(p<0.05),Ⅰ組濾紙酶活顯著高于Ⅲ組(p<0.05),固相酶活普遍比液相酶活高。 2.不同氮源日糧對纖維降解
5、菌群及纖維物質(zhì)降解的影響 試驗選用12只體況良好、體重50公斤左右的蘇尼特綿羊隨機分為四組,每組3只。Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組分別飼喂氮源為葵粕+玉米蛋白粉、魚粉、棉粕、豆粕的日糧。傳統(tǒng)方法檢測結(jié)果表明Ⅲ組瘤胃真菌數(shù)量顯著高于Ⅱ組和Ⅳ組(P<0.05);熒光實時定量PCR結(jié)果與之相一致。而瘤胃細(xì)菌組間差異不顯著(P>0.05);氮源對均毛蟲、密毛蟲、雙毛蟲、頭毛蟲影響顯著(P<0.05):對內(nèi)毛蟲、總纖毛蟲數(shù)量影響極顯著(P<0.
6、01),總體趨勢為Ⅳ組纖毛蟲多Ⅲ組少;Ⅲ組纖維分解菌顯著高于Ⅱ組和Ⅰ組(P<0.05)。定量PCR法檢測表明Ⅲ組F.succinogenes顯著高于Ⅰ組(P<0.05);R.albus和R.flavefaciens的數(shù)量受氮源影響不顯著(P>0.05)。瘤胃pH受N源影響顯著,其中Ⅲ組顯著高于Ⅳ組(P<0.05);對瘤胃NH<,3>-N濃度、總VFA和丁酸的濃度影響不顯著(P>0.05),乙酸摩爾濃度百分比結(jié)果為Ⅱ組顯著低于其它三組(P
7、<0.05),丙酸摩爾濃度百分比結(jié)果與之相反(P<0.01)。不同N源日糧對固相食靡流通速率、液相食靡流通速率、瘤胃體積、纖維物質(zhì)的動態(tài)降解率影響均不顯著(p>0.05)。瘤胃液相木聚糖酶活受N源影響顯著(p<0.05),其中Ⅱ組顯著高于Ⅲ組和Ⅳ組(p<0.01),Ⅲ組顯著高于Ⅳ組(p<0.05)。瘤胃固相食靡果膠酶為Ⅲ組顯著高于Ⅰ組(p<0.05);糖苷酶為Ⅰ組顯著高于Ⅱ組(p<0.05),而與Ⅲ組、Ⅳ組差異不顯著(p>0.05);木
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