番茄溫敏核不育系的離體扦插和花藥培養(yǎng)研究.pdf

1、本論文主要研究番茄溫敏核不育系的離體扦插和花藥培養(yǎng)兩方面。扦插方面主要從不同基質(zhì)、不同莖段部位、不同激素種類及濃度等方面進(jìn)行研究；花藥培養(yǎng)方面主要從外植體的選擇與滅菌，愈傷組織的誘導(dǎo)、繼代增殖和分化，愈傷組織的倍性鑒定等方面進(jìn)行研究。
　　 1、扦插試驗(yàn)結(jié)果表明：
　　 （1）扦插基質(zhì)以泥炭+珍珠巖+菜園土（2：1：1）組合處理效果最好，T7成活率達(dá)70.00％，平均每株生根數(shù)23.50條；T8成活率達(dá)68.33％，平均

2、每株生根數(shù)21.82條。
　　 （2）枝條上部的莖段扦插效果最好，T7成活率達(dá)75.00％，平均每株生根數(shù)28.06條，T8成活率達(dá)73.33％，平均每株生根數(shù)26.75條，與中部、下部莖段的差異均達(dá)極顯著水平。
　　 （3）激素處理對(duì)番茄溫敏核不育系扦插效果的影響明顯。單一激素以IBA9mg/L的處理效果最好，T7成活率達(dá)63.33％，平均每株生根數(shù)32.10條，T8成活率達(dá)65.00％，平均每株生根數(shù)30.98條；不

3、同激素配合以IBA6mg/L+ABT50mg/L的處理效果最好，T7成活率達(dá)100％，平均每株生根數(shù)48.03條，T8成活率達(dá)96.67％，平均每株生根數(shù)45.52條。
　　 2、花藥培養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)果表明：
　　 （1）0.1％HgCl2和10％ NaClO兩種滅菌劑配合使用的滅菌效果優(yōu)于單一滅菌劑，滅菌效果最佳的處理為：0.1％HgCl28min+10％NaClO8min，T7的污染率和出愈率分別為1.95％和71.73％

4、，T8的污染率和出愈率分別為2.08％和68.34％。
　　 （2）三種基本培養(yǎng)基對(duì)番茄溫敏核不育系花藥愈傷組織的誘導(dǎo)效應(yīng)：MS>Miller>B5。在這三類培養(yǎng)基中，T7花藥愈傷組織誘導(dǎo)率依次為：70.56％、62.86％、53.07％；T8花藥愈傷組織誘導(dǎo)率依次為：69.24％、64.03％、52.19％。
　　 （3）小孢子處于單核靠邊期的花藥愈傷組織誘導(dǎo)率最高，T7和T8的花藥愈傷組織誘導(dǎo)率分別為70.12％和6

5、8.81％，與四分體時(shí)期、單核早中期、雙核期有極顯著差異；處于單核靠邊期的花蕾花藥長(zhǎng)度在5～7.5mm，花藥多為黃綠色或淡黃色。
　　 （4）4℃低溫預(yù)處理1d可提高花藥愈傷組織的誘導(dǎo)率，減輕花藥褐變現(xiàn)象，T7愈傷組織誘導(dǎo)率和花藥褐變率分別為70.64％和27.67％，T8愈傷組織誘導(dǎo)率和花藥褐變率分別為69.36％和27.18％，與對(duì)照處理及4℃低溫預(yù)處理3d、5d有極顯著差異。
　　 （5）對(duì)接種后花藥暗培養(yǎng)10d再

6、進(jìn)行光照培養(yǎng)，可提高愈傷組織誘導(dǎo)率，T7、T8的愈傷組織誘導(dǎo)率分別達(dá)71.28％、70.32％，與全暗、光照培養(yǎng)有極顯著差異。
　　 （6）2，4-D能有效的誘導(dǎo)出花藥愈傷組織，適宜濃度為1mg/L，T7和T8的花藥愈傷組織誘導(dǎo)率分別為70.56％和69.24％，與其他濃度有極顯著差異。
　　 （7）一定濃度范圍內(nèi)的6-BA、KT和2，4-D、NAA間的配組對(duì)番茄溫敏核不育系花藥愈傷組織的誘導(dǎo)起促進(jìn)作用。愈傷組織誘導(dǎo)的最

7、佳培養(yǎng)基為MS+2，4-D1mg/L+ KT1mg/L，T7、T8的花藥愈傷組織誘導(dǎo)率分別達(dá)到81.82％、79.36％。
　　 （8）蔗糖適宜濃度為35g/L時(shí)，T7、T8的花藥愈傷組織誘導(dǎo)率均最高，分別達(dá)到76.13％、74.29％，與其他處理比較差異達(dá)極顯著水平。
　　 （9）培養(yǎng)基中添加適當(dāng)濃度活性炭（0.01％～0.1％）對(duì)減輕花藥培養(yǎng)中花藥褐變有利，但對(duì)愈傷組織誘導(dǎo)有不利影響。
　　 （10）添加30

8、0mg/L的水解乳蛋白可以提高番茄溫敏核不育系花藥誘導(dǎo)愈傷組織的能力，T7、T8的愈傷組織誘導(dǎo)率分別達(dá)68.82％、68.16％。
　　 （11）基本培養(yǎng)基MS比Miller、B5更利于番茄溫敏核不育系花藥愈傷組織的增殖，產(chǎn)生的愈傷組織質(zhì)量好。在這三類培養(yǎng)基中，T7愈傷組織增殖倍數(shù)依次為4.10、2.53、2.33； T8愈傷組織增殖倍數(shù)依次為4.05、2.45、2.29。
　　 （12）番茄溫敏核不育系花藥愈傷組織的增

9、殖以MS+6-BA2mg/L+NAA0.5mg/L為最佳培養(yǎng)基，T7、T8的愈傷組織增殖倍數(shù)分別為4.37和4.20。
　　 （13） T7的花藥愈傷組織繼代到第六代，增殖倍數(shù)最大，達(dá)12.56倍，T8的愈傷組織在第五代達(dá)到最大值，為12.21倍。
　　 （14）番茄溫敏核不育系花藥愈傷組織分化出不定根，但未分化出不定芽。
　　 （15）分化出的不定根經(jīng)染色體計(jì)數(shù)基本為2n=2x=24，但有一個(gè)T7的細(xì)胞染色體數(shù)