苦瓜花藥離體培養(yǎng)初探.pdf

1、花藥培養(yǎng)是建立單倍體體系的有效途徑之一，結(jié)合傳統(tǒng)育種方法可以縮短育種周期，加快新品種選擇的進程。有關(guān)苦瓜的組織培養(yǎng)研究相對較少，且其主要是進行苦瓜莖段離體快繁和子葉誘導(dǎo)研究。本試驗以三個苦瓜品種的花藥為外植體材料，從基因型、激素配比、花藥不同發(fā)育時期、預(yù)處理時間、不同碳源及其濃度等方面對苦瓜花藥誘導(dǎo)的影響進行了研究，并將誘導(dǎo)所得的苦瓜花藥愈傷組織分為不同狀態(tài)分別進行分化誘導(dǎo)培養(yǎng)。主要結(jié)論如下： 1.各品種的花蕾大小與花藥發(fā)育時期

2、符合以下相關(guān)性：當(dāng)花蕾長度為2.5～3.5mm時花藥處于四分體時期；花蕾長度為3.5～4.5mm時為單核早期；花蕾長度為4.5～6.0mm時為單核中晚期。 2.當(dāng)MS培養(yǎng)基中2,4-D濃度為2.0mg/L、6-BA濃度2.0mg/L時，各品種的花藥愈傷組織誘導(dǎo)率最高，長白苦瓜達到了94.74％，大白苦瓜為82.14％，碧秀苦瓜為65.91％。6-BA濃度為2.0mg/L時較利于碧秀苦瓜和大白苦瓜花藥愈傷的誘導(dǎo)，高于或低于2.0m

3、g/L時的愈傷組織誘導(dǎo)率均有所下降，而長白苦瓜在6-BA3.0mg/L、2,4-D1.0mg/L和2.0mg/L時愈傷組織誘導(dǎo)率仍保持較高。2,4-D濃度的變化對花藥愈傷組織的誘導(dǎo)影響明顯，低濃度2,4-D處理中各品種出愈率均較低，隨著其濃度增加，各品種花藥愈傷組織誘導(dǎo)普遍更快、更多，但2,4-D濃度越高時愈傷組織的褐化速度越快。 3.每個品種都以單核中晚期的花藥愈傷誘導(dǎo)率最高，顯著的高于四分體時期和單核早期。單核中晚期時，碧秀

4、苦瓜、大白苦瓜、長白苦瓜的愈傷組織誘導(dǎo)率分別達到79.74％、74.79％、89.38％。 4.與很多其它花藥離體培養(yǎng)中低溫預(yù)處理促進花藥誘導(dǎo)的結(jié)論相反，本次試驗中4℃預(yù)處理出現(xiàn)負效應(yīng)。供試的三個苦瓜品種花藥的愈傷組織誘導(dǎo)率均隨著低溫預(yù)處理時間的延長而逐漸下降，均以未經(jīng)過預(yù)處理的花藥愈傷組織誘導(dǎo)率最高。預(yù)處理天數(shù)達4天時，愈傷組織誘導(dǎo)率大幅下降，碧秀苦瓜由53.19％降到18.18％，大白苦瓜由74.82％降到24.38％，長白

5、從88.40％降到26.83％。 5.蔗糖作為碳源比葡萄糖作為碳源更利于花藥愈傷組織的誘導(dǎo)。碧秀苦瓜在蔗糖濃度為3％時誘導(dǎo)率最高，為83.33％，隨著蔗糖濃度增高，出愈率逐漸降低。大白苦瓜和長白苦瓜則在蔗糖濃度為5％時的出愈率高于其他處理，分別達到70.23％和72.73％。以葡萄糖作碳源時，各品種的愈傷組織誘導(dǎo)率普遍明顯降低。葡萄糖濃度為7％時大白苦瓜和長白苦的出愈率均在10％以下，碧秀苦瓜甚至無愈傷組織產(chǎn)生。 6.誘

6、導(dǎo)出的愈傷組織大致可分為兩種類型：一類為黃白色、表面有瘤狀突起，轉(zhuǎn)入分化培養(yǎng)基后較快轉(zhuǎn)綠，體積增大明顯，處理為(2)6-BA2.0mg/L，KT1.0mg/L，NAA0.2mg/L時愈傷生長狀況最好；另一類呈黃白色，表面無瘤狀突起，色澤晶瑩，不容易轉(zhuǎn)綠，體積增長不明顯，在處理(4)6-A3.0mg/L、KT1.0mg/L、麥芽糖30g/L中有所轉(zhuǎn)綠，在處理(1)6-BA1.0mg/L、KT1.0mg/L、NAA1.0mg/L中雖然未轉(zhuǎn)綠