馬鈴薯花藥培養(yǎng)和再生植株鑒定.pdf

1、試驗(yàn)對(duì)38個(gè)基因型的馬鈴薯花藥進(jìn)行培養(yǎng)，分析了馬鈴薯基因型、培養(yǎng)基種類對(duì)花藥愈傷組織誘導(dǎo)和分化的影響；以訥16、克新13、克新17、克新18、花525、波C為試驗(yàn)材料，研究花粉發(fā)育時(shí)期、預(yù)處理、激素濃度、蔗糖濃度以及培養(yǎng)基附加物硝酸銀、維生素C、活性炭，馬鈴薯提取液等因素對(duì)馬鈴薯花藥愈傷組織誘導(dǎo)率及褐化率的影響；同時(shí)對(duì)馬鈴薯花藥培養(yǎng)獲得的再生植株進(jìn)行細(xì)胞學(xué)鑒定；并對(duì)獲得的雙單倍體進(jìn)行了農(nóng)藝性狀鑒定。 試驗(yàn)結(jié)果表明： 1.

2、馬鈴薯花蕾的大小、花藥的大小和顏色基本可以作為判斷小孢子發(fā)育時(shí)期的一個(gè)簡便而可靠的指標(biāo)，當(dāng)小孢子處于單核靠邊期時(shí)，花蕾大小6.0～8.5mm左右，花藥3.0～5.0mm，顏色為淺綠色。 2.在相同的培養(yǎng)條件下不同基因型材料的愈傷組織的誘導(dǎo)率有較大的差異。訥16愈傷組織的誘導(dǎo)數(shù)最多，共接種花藥960個(gè)，誘導(dǎo)愈傷組織達(dá)42個(gè)，誘導(dǎo)率為4.3％；波C其次，誘導(dǎo)率為3.5％。 3.低溫預(yù)處理能明顯地提高馬鈴薯愈傷組織的誘導(dǎo)率，但

3、時(shí)間過長或過短，都不利于愈傷組織的誘導(dǎo)。在4℃條件下處理2 d效果最好。接種后的馬鈴薯花藥在33℃高溫處理，處理時(shí)間為2d效果最佳。有利于促進(jìn)愈傷組織的產(chǎn)生。 4.甘露醇預(yù)處理馬鈴薯品種訥16和波C，隨著處理的天數(shù)增加，出愈率均呈現(xiàn)了先升后降的趨勢(shì)，預(yù)處理時(shí)間為4d時(shí)愈傷組織誘導(dǎo)率達(dá)到最大值。 5.植物激素在馬鈴薯花藥培養(yǎng)中起著重要的作用，在MS培養(yǎng)基上采用不同濃度的NAA、2.4-D、KT配比，結(jié)果表明，MS+NAA

4、0.5mg/L+2，4-D 0.5 mg/L+KT0.5 mg/L適合愈傷組織的誘導(dǎo)。 6.蔗糖濃度為6％時(shí)，馬鈴薯愈傷組織的誘導(dǎo)率最高。馬鈴薯提取液能夠促進(jìn)愈傷組織的發(fā)生，濃度為50g/L效果較好。 7.培養(yǎng)基中加入20mg/L硝酸銀能有效地減輕花藥的褐化程度，并能提高愈傷組織的誘導(dǎo)率。培養(yǎng)基中添加不同濃度的Vc，隨著Vc濃度的提高，花藥的褐化程度減輕。 8.培養(yǎng)基中加入活性炭，花藥的褐化程度可以減輕，但對(duì)于愈