幾種蟲草無性型及其相關(guān)真菌混合培養(yǎng)的研究.pdf

1、蟲草是一種名貴的中藥材，它的顯著的藥理活性和生長條件的嚴(yán)格性導(dǎo)致其產(chǎn)量和人類需求之間的矛盾日益加??；目前，人們都致力于利用蟲草無性型人工發(fā)酵物代替野生蟲草的研究。為了充分利用實(shí)驗(yàn)室保存的珍貴的蟲草資源，本研究從蟲草無性型及其相關(guān)真菌混合培養(yǎng)的角度對(duì)蟬棒束孢（Isaria cicadae）和古尼擬青霉（Paecilomyces gunnni）與地頂孢霉（Acremonium terricola）之間的關(guān)系進(jìn)行了研究。
　　 依據(jù)實(shí)

2、驗(yàn)室先前的研究成果，試驗(yàn)中選擇了在成分和活性研究方面比較突出的2株古尼擬青霉和3株蟬棒束孢與1株地頂孢霉進(jìn)行混合培養(yǎng)研究。
　　 利用平板對(duì)峙培養(yǎng)法對(duì)蟬棒束孢、古尼擬青霉和地頂孢霉之間的菌株相容性進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)同一種屬不同菌株間不僅在形態(tài)上差異很大，而且在對(duì)相同對(duì)峙菌株的影響也不一樣，除蟬棒束孢菌株P(guān)2、P6，古尼擬青霉菌株P(guān)5與地頂孢霉菌株G1對(duì)峙培養(yǎng)時(shí)沒有發(fā)現(xiàn)明顯的菌落形態(tài)變化外，其余菌株之間不同程度出現(xiàn)菌落邊緣菌絲稀疏或

3、畸變現(xiàn)象。
　　 通過對(duì)蟬棒束孢和古尼擬青霉與地頂孢霉的液體搖瓶混合培養(yǎng)得到的菌絲體中腺苷、麥角甾醇、甘露醇和多糖的含量以及清除DPPH自由基活性進(jìn)行分析比較，發(fā)現(xiàn)蟬棒束孢菌株P(guān)2與地頂孢霉菌株G1的混合培養(yǎng)時(shí)，在菌絲體得率、菌絲體中麥角甾醇含量、甘露醇含量以及DPPH自由基的相對(duì)清除率均有一定程度的提高，因此對(duì)蟬棒束孢菌株P(guān)2、古尼擬青霉菌株P(guān)5與地頂孢霉菌株G1的混合培養(yǎng)進(jìn)行下一步的研究。
　　 分別繪制了三株蟲草無

4、性型及其相關(guān)真菌菌株純培養(yǎng)和混合培養(yǎng)時(shí)的生長曲線，三種菌株具有三種生長曲線，蟬棒束孢菌株P(guān)2、古尼擬青霉菌株P(guān)5與地頂孢霉混合培養(yǎng)時(shí)的生長曲線都類似于地頂孢霉菌株G1純培養(yǎng)時(shí)的生長曲線，通過對(duì)菌絲體中的成分和清除自由基活性的分析比較，蟬棒束孢菌株P(guān)2與地頂孢霉菌株G1混合培養(yǎng)時(shí)麥角甾醇含量、甘露醇含量以及DPPH自由基的相對(duì)清除率相對(duì)于G1和P2均可以提高的現(xiàn)象得到了驗(yàn)證，而古尼擬青霉菌株P(guān)5與地頂孢霉菌株G1混合培養(yǎng)時(shí)除生物量外其余指

5、標(biāo)均有下降現(xiàn)象。
　　 利用添加了蟬棒束孢菌株P(guān)2和古尼擬青霉菌株P(guān)5的發(fā)酵液的SDY培養(yǎng)基對(duì)地頂孢霉菌株G1的生物量進(jìn)行了測(cè)定，結(jié)果表明加入蟬棒束孢菌株P(guān)2的發(fā)酵液不僅對(duì)地頂孢霉菌絲體的生長具有促進(jìn)作用，同時(shí)還發(fā)現(xiàn)地頂孢霉在SDY搖瓶中培養(yǎng)時(shí)的貼壁物質(zhì)消失，而P5的發(fā)酵液的對(duì)地頂孢霉的生長沒有明顯影響。同時(shí)利用添加了地頂孢霉菌株G1發(fā)酵液的SDY培養(yǎng)基對(duì)蟬棒束孢菌株P(guān)2和古尼擬青霉菌株P(guān)5的生物量進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明地頂孢霉發(fā)酵