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1、實(shí)習(xí)一、整體及一般檢查,孫 泉Tel:83911344E-mail:sunquan@ccmu.edu.cn,比格犬(Beagle)醫(yī)學(xué)應(yīng)用,實(shí)驗(yàn)外科:心血管外科、腦外科神經(jīng)循環(huán)發(fā)達(dá):動(dòng)脈粥樣硬化、心律失常藥物代謝、毒理學(xué)、新藥臨床前安全評(píng)價(jià)消化系統(tǒng)慢性試驗(yàn),一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?掌握整體狀態(tài)的觀察方法;掌握被毛與皮膚的檢查方法及臨床意義;掌握可視粘膜的檢查方法及臨床意義;掌握體表淋巴結(jié)的檢查方法及臨床意義;掌握體溫、脈搏和呼吸
2、數(shù)測(cè)定方法及其臨床意義。,一、犬的保定-徒手保定,此法適用于小型犬、幼齡大中型犬聽(tīng)診;皮下肌肉注射,犬的保定-扎口保定,適用于性情較兇或有攻擊性的犬,犬的保定-頸圈保定,限制犬回頭舔咬驅(qū)趕或四肢術(shù)部,二、全身狀態(tài)檢查,精神狀態(tài):沉郁?興奮?營(yíng)養(yǎng)狀況:肌肉豐滿?骨骼外露?姿勢(shì):站立?行走?,三、皮膚觀察、觸診,觀察被毛狀態(tài):平順?光澤?脫毛?觀察皮膚顏色:黃染?蒼白?感受皮膚溫度、濕度:鼻端?耳根?檢查皮膚彈性:2s?檢查皮膚
3、是否有腫脹、破損等:穿刺?,,檢查皮膚彈性,四、可視粘膜、體表淋巴結(jié)檢查,檢查眼結(jié)合膜、鼻粘膜、口腔黏膜是否正常:濕潤(rùn)?顏色?分泌物?囊腫?破潰?檢查下頜淋巴結(jié)檢查耳朵:耳廓皮膚?外耳道?,,檢查眼結(jié)合膜,檢查下頜淋巴結(jié),,正常,外耳炎,五、體溫測(cè)定,動(dòng)物站立保定。術(shù)者一手持體溫計(jì),將其水銀柱甩至35攝氏度以下,用酒精棉球消毒,蘸上少許石蠟油。術(shù)者站在動(dòng)物后方,一手抓住尾巴抬起,另一手持體溫計(jì)旋轉(zhuǎn)插入直腸,約二分之一后固定。 5分鐘
4、后,取出體溫計(jì),用一棉球擦去體溫計(jì)上的粘液,然后讀出度數(shù)。,六、脈搏數(shù)測(cè)定,動(dòng)物站立保定。術(shù)者蹲于動(dòng)物正后方,一手抓住尾巴,另一手的食指與中指于股內(nèi)側(cè)觸診股動(dòng)脈。心臟聽(tīng)診,看是否一致。(70-160次/分),七、呼吸數(shù)的測(cè)定,術(shù)者用聽(tīng)診器聽(tīng)取氣管每分鐘的呼吸數(shù)。,,用手背感覺(jué)鼻孔呼出氣流數(shù),實(shí)習(xí)二、呼吸系統(tǒng)檢查,掌握呼吸運(yùn)動(dòng)檢查內(nèi)容、方法及臨床意義上呼吸道檢查內(nèi)容、方法及臨床意義胸部檢查內(nèi)容、方法及臨床意義,一、呼吸運(yùn)動(dòng)檢查,1.呼
5、吸類型:胸式呼吸; 腹式呼吸:提示胸部病變。2.呼吸節(jié)律:犬1:1.64 吸氣延長(zhǎng):上呼吸道狹窄 呼氣延長(zhǎng):支氣管狹窄、肺彈性不足3.呼吸對(duì)稱性:對(duì)稱呼吸 呼吸不對(duì)稱:?jiǎn)蝹?cè)性肺病,二、上呼吸道檢查,1.鼻端檢查:濕潤(rùn)涼爽、無(wú)鼻液 鼻端干燥熱感:熱性疾病2.喉氣管觸診:人工誘咳 陽(yáng)性:炎癥,喉氣管檢查,三、胸部檢查,1.胸廓形狀與對(duì)稱性 觸摸胸壁溫度與敏感性2.肺叩診區(qū)的變化 擴(kuò)大
6、:肺過(guò)度膨脹(肺氣腫)、胸腔積氣(氣胸) 縮?。耗c臌氣、腹腔積液,上界距背中線2-3指寬與脊柱平行的線;前界為自肩胛骨后角并沿其后緣所引直線;后界由三點(diǎn)決定,上界與第12肋骨的交點(diǎn), 髖結(jié)節(jié)水平線與第11肋間交點(diǎn),坐骨結(jié)節(jié)線與第10肋間交點(diǎn),肩關(guān)節(jié)水平線與第8肋間交點(diǎn),將這三點(diǎn)連起來(lái)止于第6肋間。,1.濁音 2.水平濁音 3、4.清音,3.肺扣診音,,4.肺聽(tīng)診音聽(tīng)診時(shí),不論大小動(dòng)物,宜先從中1/3開(kāi)始,向前向后逐漸聽(tīng)取,其次上
7、1/3,最后下1/3。每個(gè)部位聽(tīng)2~3次呼吸音,再變換位置,直至聽(tīng)完全肺。,,肺泡呼吸音增強(qiáng):代償性呼吸機(jī)能亢進(jìn);它標(biāo)志著肺實(shí)質(zhì)的病理變化,具有重要的診斷意義,常見(jiàn)于大葉性肺炎,小葉性肺炎和滲出性胸膜炎等等時(shí)的健康肺區(qū)。肺泡呼吸音減弱:①肺組織的炎癥、浸潤(rùn)、實(shí)變或其彈性減弱、喪失。②進(jìn)入肺泡的空氣量減少③呼吸音傳導(dǎo)障礙。當(dāng)胸腔積液,胸膜增厚,胸壁腫脹時(shí),由于呼吸音傳導(dǎo)不良,則肺泡呼吸音減弱。,實(shí)習(xí)三、心血管系統(tǒng)檢查,掌
8、握心搏動(dòng)、心音形成原因,以及最佳聽(tīng)診、叩診的位置;熟悉心搏動(dòng)、心音的病理變化和臨床意義;掌握脈搏的頻率、性質(zhì)、節(jié)律的變化及臨床意義,一、心搏動(dòng)的檢查,檢查方法:被檢動(dòng)物取站立姿勢(shì),使其左前肢向前伸出半步,以充分暴露心區(qū)。檢查者位于動(dòng)物左側(cè)方。視診時(shí),仔細(xì)觀察左側(cè)肘后心區(qū)被毛及胸壁的振動(dòng)情況;觸診時(shí)。檢查者右手放于動(dòng)物背部,左手緊貼左側(cè)肘后心區(qū),感知胸壁的振動(dòng),主要判定頻率及強(qiáng)度。,聽(tīng)診心率及心音,病理變化,心搏動(dòng)減弱:心臟衰竭引起心
9、室收縮無(wú)力、胸壁增厚、胸腔積水。心搏動(dòng)增強(qiáng):心臟病代償期(心肌炎、心包炎初期)、輕度貧血、疼痛性疾病。心搏動(dòng)移位:心臟受到滲出液、腫瘤等的壓迫。,二、心臟叩診,檢查方法:對(duì)犬等小動(dòng)物用指指叩診,舉其左前肢,以充分暴露心區(qū)。心臟前部為肩胛肌肉掩蓋,肌肉后方的部分接近心臟一半,直接與胸壁接觸的只是心臟的一部分,這一區(qū)域絕對(duì)濁音區(qū);心臟大部分被肺部所掩蓋,這部分半濁音,這一區(qū)域?yàn)樾呐K的相對(duì)濁音區(qū),標(biāo)志心臟大小。犬心絕對(duì)濁音區(qū)左側(cè)第4-
10、5肋間,上緣達(dá)肋骨與肋軟骨結(jié)合部,大致與胸骨平行,下緣受肝濁音影響五明顯界限。,,病理變化,心區(qū)敏感:提示心區(qū)疼痛,常見(jiàn)于心包炎和心膜炎。心臟叩診濁音區(qū)縮?。悍螝饽[。心臟叩診濁音區(qū)擴(kuò)大:可見(jiàn)心肥大、肺萎陷、心擴(kuò)張及滲出性心包炎、心積水。,三、心音的聽(tīng)診,正常心音:心搏動(dòng)的地方可聽(tīng)到“咚-嗒”兩個(gè)有節(jié)律不斷交替出現(xiàn)的聲音。第一心音:心室收縮音,主要是兩個(gè)房室瓣關(guān)閉產(chǎn)生的振動(dòng)。第二心音:主、肺動(dòng)脈瓣關(guān)閉產(chǎn)生的振動(dòng)。犬心音清亮、第一
11、心音與第二心音音調(diào)、強(qiáng)度及持續(xù)時(shí)間大致相同。,犬心音最佳聽(tīng)診點(diǎn),第一心音:二尖瓣口:左側(cè)第5肋間,胸廓下1/3的中央水平線;三尖瓣口:右側(cè)第4肋間,肋骨與肋軟骨結(jié)合部稍下方;第二心音:主動(dòng)脈瓣口:左側(cè)第4肋間,肩關(guān)節(jié)水平線下方一、二指處;肺動(dòng)脈瓣口:左側(cè)第3肋間,靠胸骨的邊緣處。,,心音聽(tīng)診時(shí)主要注意心音的頻率、強(qiáng)度、性質(zhì)及有無(wú)分裂、雜音或心率不齊等變化。心音增強(qiáng):熱病初期、劇烈疼痛、輕度貧血或失血。心音減弱:心機(jī)能障礙后
12、期、頻死期及滲出性胸膜炎或心包炎。心雜音:拍水音、摩擦音。,實(shí)習(xí)四 消化系統(tǒng)檢查,胃腸觸診、聽(tīng)診的方法及其臨床意義糞便樣品采集處理方法糞便酸堿度測(cè)定糞便潛血試驗(yàn)糞便的顯微鏡檢查,腸胃觸診,腸胃聽(tīng)診,(一)糞便酸堿度,一般用pH試紙測(cè)定。酸堿度與飼料成分及腸內(nèi)容物發(fā)酵或腐敗過(guò)程有關(guān)。取新鮮糞便(從糞內(nèi)外層采?。?-3g,至于試管中,加蒸餾水8-10mL,混勻后用pH試紙測(cè)定。當(dāng)腸管內(nèi)糖類發(fā)酵旺盛時(shí),酸度增加;蛋白質(zhì)分解旺盛,堿
13、度增加,見(jiàn)于胃腸炎。(正常弱堿),(二)潛血試驗(yàn),潛血是胃腸道有少量出血,紅細(xì)胞破壞,一直糞便外觀無(wú)異常改變,顯微鏡也不能證實(shí)。肉眼及顯微鏡均無(wú)法檢測(cè)的微量血液稱為潛血或隱血。糞便潛血對(duì)消化道出血的診斷有重要價(jià)值。常用的檢驗(yàn)方法有聯(lián)苯胺法和鄰聯(lián)甲苯胺法。兩者原理和檢驗(yàn)方法基本一致。,,原理:血紅蛋白有氧化酶的作用,能分解過(guò)氧化氫而產(chǎn)生新生態(tài)氧,是聯(lián)苯胺氧化為聯(lián)苯胺藍(lán)而呈現(xiàn)藍(lán)色反應(yīng)。試劑:聯(lián)苯胺冰醋酸溶液:取聯(lián)苯胺少許(約一刀
14、尖)于小試管,加冰醋酸2mL,震蕩溶解;過(guò)氧化氫溶液,,檢查方法:用鑷子取綠豆大小糞塊,與載玻片上涂成約1cm范圍。然后將玻片在酒精燈上緩慢通過(guò)數(shù)次(破壞糞便中的酶類),待玻片冷卻后滴加冰醋酸溶液約1mL及新鮮過(guò)氧化氫溶液1mL,用牙簽攪動(dòng)混合,在白紙上觀察。,,結(jié)果判定:60s出現(xiàn)藍(lán)色反應(yīng)為痕跡反應(yīng),用±表示30s出現(xiàn)藍(lán)色反應(yīng)為陽(yáng)性反應(yīng),用+表示15s出現(xiàn)藍(lán)色反應(yīng)為強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng),用++表示3s出現(xiàn)藍(lán)色反應(yīng)
15、為最強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng),用+++表示陽(yáng)性提示出血性胃腸炎、犬鉤蟲(chóng)病、潰瘍性結(jié)腸炎等能引起胃腸道出血的疾病。,(三) 糞便顯微鏡檢查,生理鹽水涂片法 用竹簽挑取含粘液的膿血部分,成型便取多處,混懸于生理鹽水中制成涂片,厚度以能透視紙上字跡為宜。,生理鹽水1-2滴,挑取少量糞便與鹽水混勻制成涂片。,玻片,,低倍:全片觀察有無(wú)蟲(chóng)卵、原蟲(chóng)與包囊高倍:仔細(xì)觀察病理成分的形態(tài)和結(jié)構(gòu)至少觀察10個(gè)以上視野,White Blood Cells
16、 , 白細(xì)胞,白細(xì)胞為圓形、有核、結(jié)構(gòu)清晰的細(xì)胞,正常糞便中不見(jiàn)或偶見(jiàn)。膿球結(jié)構(gòu)不清晰,常聚集在一起,甚至成堆存在。糞中發(fā)現(xiàn)多量白細(xì)胞及膿球表明腸道有炎癥或潰瘍。,Red Blood Cells , 紅細(xì)胞,正常糞便無(wú)紅細(xì)胞。糞中大量的紅細(xì)胞可能是后部腸道出血。有少量散在、形態(tài)正常的紅細(xì)胞,同時(shí)有多量白細(xì)胞,說(shuō)明腸道有炎癥。,巨噬細(xì)胞,大單核細(xì)胞,核形多不規(guī)則,常吞有顆粒及細(xì)胞碎屑。,上皮細(xì)胞,正常糞便很難見(jiàn)到,有多量上皮細(xì)胞同時(shí)有
17、白細(xì)胞見(jiàn)于腸道炎癥。,寄生蟲(chóng)蟲(chóng)卵,寄生蟲(chóng)感染,,腸胃觸診聽(tīng)診糞便收集處理、pH值測(cè)定潛血試驗(yàn)糞便顯微鏡檢查,實(shí)習(xí)五、泌尿系統(tǒng)檢查(一),一、實(shí)習(xí)內(nèi)容:掌握腎臟、膀胱的檢查方法;掌握尿液的正常顏色、酸堿度、尿蛋白(硝酸法)、尿潛血(聯(lián)苯胺法)的檢查方法。二、動(dòng)物及器材:尿液、PH試紙、試管、滴管、硝酸、聯(lián)苯胺、冰醋酸、過(guò)氧化氫溶液,腎臟觸診,膀胱觸診,一、尿液采集保存,一、尿液采集和保存采集原則:早晨。立即檢驗(yàn),超過(guò)30mi
18、n,夏天可冷藏或加防腐劑。采集方法:自然、導(dǎo)尿、膀胱穿刺(不用于血檢)。保存:防腐劑,3-4滴甲醛(100mL尿液)細(xì)菌學(xué)檢查不可加。,二、尿液化學(xué)檢驗(yàn),一、尿液酸堿度測(cè)定(pH)取決于飼料,植物為主的產(chǎn)生堿性尿;高蛋白谷物及動(dòng)物性蛋白,通常產(chǎn)生酸性尿。哺乳幼齡動(dòng)物均為酸性尿。犬pH:6-7pH降低(酸性尿):熱性病、長(zhǎng)期饑餓、酸中毒(酮血?。﹑H增高(堿性尿):尿道阻塞、膀胱炎。注意:新鮮。二氧化碳減少、細(xì)菌
19、分泌尿素產(chǎn)生氨而使尿液變堿。,,二、尿蛋白定性檢測(cè)原理:蛋白質(zhì)遇酸發(fā)生凝固沉淀。試劑:35%硝酸溶液方法:取一小試管,先加35%硝酸1-2mL,后沿試管壁緩慢滴加尿液,使兩液面重疊,靜置3-5min觀察結(jié)果,兩液面產(chǎn)生白色環(huán)者為陽(yáng)性反應(yīng)。白色越寬,表示蛋白含量越高。,,三、尿潛血測(cè)定(聯(lián)苯胺法)原理:血紅蛋白的鐵具有過(guò)氧化酶的作用,可分解過(guò)氧化氫放出氧,使聯(lián)苯胺氧化成藍(lán)色。方法:取尿3-5mL置潔凈試管中煮沸(破壞
20、其他過(guò)氧化酶)。冷卻后加聯(lián)苯胺冰醋酸溶液數(shù)滴,再加3%過(guò)氧化氫數(shù)滴,混合,數(shù)秒鐘現(xiàn)藍(lán)色反應(yīng),表明尿蛋白陽(yáng)性。,,腎臟、膀胱臨床檢查尿液收集、pH值檢測(cè)尿蛋白檢測(cè)尿潛血測(cè)定,實(shí)習(xí)六、泌尿系統(tǒng)檢查(二),尿糖的測(cè)定尿液酮體的測(cè)定尿液顯微鏡檢查,尿糖的測(cè)定(班氏試劑法),原理:在高熱和強(qiáng)堿溶液中,葡萄糖或其他還原性糖能將溶液中藍(lán)色的硫酸銅還原為黃色的氫氧化銅,進(jìn)而形成紅色的氧化亞銅沉淀。根據(jù)沉淀有無(wú)和色澤變化判斷含量。班氏試
21、劑+氫氧化鈉 葡萄糖酸鈉+氧化亞銅(紅)試劑:班氏試劑:結(jié)晶硫酸銅17.3g,無(wú)水碳酸鈉100.0g,檸檬酸鈉173.0g及蒸餾水若干。先將無(wú)水碳酸鈉和檸檬酸鈉溶于700mL蒸餾水中,加熱促其溶解,另將結(jié)晶硫酸銅溶于100mL蒸餾水中,待硫酸銅溶解后將其緩慢傾入前液中并加蒸餾水至1000mL,過(guò)濾后保存于橙色瓶中備用。方法:取班氏試劑5mL,加尿液0.5mL充分混合,加熱煮沸1-2min,靜置5min觀察。管底出現(xiàn)黃色
22、或紅色沉淀者為陽(yáng)性反應(yīng)。沉淀越多表示尿葡萄糖含量越高。,,,注意事項(xiàng):1.尿中如有蛋白質(zhì),先把尿加熱煮沸,過(guò)濾后再檢。2.尿液與試劑必須按要求加入,否則會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性。,酮體的測(cè)定(郎氏法),原理:丙酮或乙酰乙酸與亞硝基鐵氰化鈉作用后,再與氨液接觸可產(chǎn)生紫紅色化合物。冰醋酸可抑制肌酐產(chǎn)生類似的反應(yīng)。試劑:亞硝基鐵氰化鈉、冰醋酸、濃氨水(28%)檢測(cè)方法:取尿液2mL于小試管內(nèi),加入亞硝基鐵氰化鈉結(jié)晶數(shù)小粒,震蕩使其溶解,再加冰
23、醋酸3-4滴,混勻后,將試管傾斜,沿管壁緩慢加入濃氨水0.5-1mL,觀察。,,結(jié)果判定:在兩液交界處呈現(xiàn)紫紅色環(huán)即為陽(yáng)性。根據(jù)顏色產(chǎn)生的時(shí)間,可做定量判定:立即出現(xiàn)深紫紅色環(huán)(+++) 逐漸出現(xiàn)紫紅色環(huán)(++) 10min內(nèi)出現(xiàn)淡紫色環(huán)(+) 10min后不顯色(—),尿液顯微鏡檢查(尿沉渣),尿沉渣標(biāo)本的制備與檢查方法: 將尿液靜置或
24、低速(1500-200r/min)離心5-10min。倒去上清液,剩余少量尿液,然后混合,用吸管吸少量放在載玻片上,蓋上蓋玻片,在顯微鏡較暗視野下觀察。觀察到大體印象后再轉(zhuǎn)換高倍鏡仔細(xì)觀察。通常無(wú)需染色,即可進(jìn)行尿沉渣檢驗(yàn)。染細(xì)胞-瑞氏染液;脂肪-蘇丹Ⅲ;細(xì)菌-革蘭氏,紅細(xì)胞:小而圓,淡褐色,無(wú)細(xì)胞核。尿中出現(xiàn)紅細(xì)胞,見(jiàn)于腎炎、膀胱炎、尿道炎、結(jié)石及泌尿器官出血。,白細(xì)胞:比紅細(xì)胞略大,有細(xì)胞核。尿中出現(xiàn)大量白細(xì)胞,見(jiàn)于腎及尿路炎癥
25、。,腎上皮細(xì)胞:圓形或多角形,細(xì)胞核大而明顯,核位于細(xì)胞中央。尿中出現(xiàn),表明腎實(shí)質(zhì)損傷,見(jiàn)于急性腎小球腎炎、腎病等。,,腎實(shí)質(zhì)嚴(yán)重?fù)p傷,,尿液中鹽類結(jié)晶的析出與否決定于該物質(zhì)的飽和度及尿液的pH、溫度和膠體物質(zhì)的濃度。,實(shí)習(xí)七、漿膜腔積液檢查,漿膜腔包括胸腔、腹腔、心包腔、關(guān)節(jié)腔。這些腔在生理情況下,其中只有少量的液體,這些正常的少量液體在腔內(nèi)起潤(rùn)滑作用,以減少臟器活動(dòng)的磨擦,一般采集不到。病理情況下,漿膜腔內(nèi)有大量液體潴留而形成漿膜腔
26、積液。因積液部位不同而分胸腔積液(胸水)、腹腔積液(腹水)、心包腔積液和關(guān)節(jié)腔積液。根據(jù)產(chǎn)生的原因及性質(zhì)不同,漿膜腔積液分為漏出液和滲出液。,,(1)漏出液:是通過(guò)毛細(xì)血管濾出,并在組織間隙或漿膜腔內(nèi)積聚的非炎癥性組織液,多為雙側(cè)性。常見(jiàn)原因和機(jī)制有:①毛細(xì)血管流體靜壓增高:常見(jiàn)于靜脈回流受阻、充血性心衰和晚期肝硬化;②血漿膠體滲透壓減低,見(jiàn)于血漿清蛋白的濃度明顯減低的各種疾病,如營(yíng)養(yǎng)不良、腎病綜合癥、嚴(yán)重貧血;③淋巴回流受阻,見(jiàn)于絲
27、蟲(chóng)病、腫瘤壓迫等;④鈉水潴留,見(jiàn)于充血性心力衰竭,肝硬化和腎病綜合癥。,,(2)滲出液:多為炎性積液,多為單側(cè)性,產(chǎn)生機(jī)制是由于微生物的毒素、缺氧以及炎性介質(zhì)等作用,使血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷,血管通透性增高,以致液體、血液大分子物質(zhì)和細(xì)胞從血管內(nèi)滲出至血管外,組織間隙及漿膜腔所形成的積液,常見(jiàn)原因多為細(xì)菌感染所致,也見(jiàn)于腫瘤、外傷、血液、膽汁、胰液和胃液等刺激的非感染性的原因,如結(jié)核性、細(xì)菌性感染、淋巴瘤、間皮瘤、肺梗死、類風(fēng)濕病、SLE等
28、。,腹水的采集,抽取狗等大動(dòng)物腹水,讓狗按自然站立位固定,穿刺部位在恥骨前緣與臍之間,腹中線兩側(cè)。剪毛消毒,局部浸潤(rùn)麻醉。操作者左手拇指、食指緊繃穿刺部位的皮膚,右手控制穿刺深度做垂直穿刺。注意不可刺的太深,以免刺傷內(nèi)臟。穿刺針進(jìn)入腹腔后,腹水多時(shí)可見(jiàn)因腹壓高而自動(dòng)流出。腹水太少可輕輕回抽,并同時(shí)稍稍轉(zhuǎn)動(dòng)一下針頭,一旦有腹水流出,立即固定好針頭及注射器的位置連續(xù)抽取。,,抽取大鼠、小鼠的腹水方法簡(jiǎn)單,用左手拇指及食指捏住動(dòng)物頸部皮膚,無(wú)
29、名指、小手指及手掌夾住其尾巴固定好動(dòng)物,使其腹部略朝上,在腹股溝和腹中線之間,消毒皮膚,用8號(hào)針頭刺入腹腔,如腹壓高腹水自然流出,如腹水太少,可借助注射器抽取。 抽腹水時(shí)注意不可速度太快,腹水多時(shí)不要一次大量抽出,以免因腹壓突然下降導(dǎo)致動(dòng)物出現(xiàn)循環(huán)功能障礙等問(wèn)題。,一般檢查及臨床意義,(一)理學(xué)檢驗(yàn) 1、量:該項(xiàng)目由臨床醫(yī)護(hù)人員測(cè)量或全部送檢驗(yàn)科。積液量可隨病情、部位和抽取目的不同而異,可由數(shù)毫升至上千毫升。 2、透明度:可
30、根據(jù)標(biāo)本不同的情況用“清”“渾濁”報(bào)告,積液的透明度常與其所含細(xì)胞、細(xì)菌、蛋白質(zhì)等程度有關(guān)。漏出液因其含細(xì)胞、蛋白質(zhì)少,且無(wú)細(xì)菌,常為清晰、透明液體。滲出液因含大量細(xì)胞、細(xì)菌等呈不同程度的渾濁。,3、凝固性: 漏出液中含纖維蛋白原甚微,一般不凝固,而滲出液中含較多纖維蛋白原和細(xì)菌、細(xì)胞破壞后稀放的凝血活酶,易凝固,但如果滲出液中含有纖維蛋白溶解酶時(shí),可分解纖維蛋白而不出現(xiàn)凝固。粘稠樣積液多見(jiàn)惡性間皮瘤,其黏稠度高主要是由于其中透明質(zhì)
31、酸含量的增加。含有碎屑樣物質(zhì)的積液多見(jiàn)于類風(fēng)濕性疾病。,4、顏色: 紅色:淡紅色、暗紅色或鮮紅色。見(jiàn)于穿刺損傷、結(jié)核、腫瘤、內(nèi)臟損傷、出血性疾病等。 漿膜液為棕色:常見(jiàn)于阿米巴肝膿腫穿入胸膜腔。 漿膜液為黑色:提示胸膜霉菌感染。 漿膜液為綠色:常見(jiàn)銅綠假單胞菌感染(綠膿桿菌)。,白色:膿性或乳白色,見(jiàn)于化膿性感染時(shí)大量白細(xì)胞和細(xì)菌,胸導(dǎo)管阻塞或破裂時(shí)的炎性乳糜積液,積液含有大量脂肪變性細(xì)胞時(shí)的假性乳糜積液所致。 黃色或淡黃色
32、:見(jiàn)于各種原因的黃疸。,(二)化學(xué)檢查,漿膜黏蛋白定性(Rivalta試驗(yàn))取100mL量筒一個(gè),加100mL清水。然后滴入冰醋酸2滴,混勻。再加入標(biāo)本l-2滴立即觀察結(jié)果。如有明顯白云霧狀混濁,下降很快,沉淀能拖長(zhǎng)20cm左右,為陽(yáng)性反應(yīng)。如混濁不明顯,下降緩慢,中途消失者為陰性反應(yīng)。漏出液為陰性反應(yīng),滲出液為陽(yáng)性反應(yīng)。,(三)顯微鏡檢查,細(xì)胞分類計(jì)數(shù)取適量新鮮漿膜腔積液,離心沉淀,傾去上清液,將沉淀物涂成薄片(必要時(shí)沉淀物內(nèi)
33、加一滴血清,使沉淀物附在玻片上)。如穿刺液本身已甚混濁,可不離心,直接推制涂片。涂片干燥后,用瑞氏染液染色,做血細(xì)胞分類計(jì)數(shù)。,,漏出液內(nèi)細(xì)胞較少,主要是間皮細(xì)胞,體積較大,常聚集成堆,有時(shí)可見(jiàn)少數(shù)淋巴細(xì)胞。滲出液中細(xì)胞較多。嗜中性白細(xì)胞大量出現(xiàn)時(shí),見(jiàn)于急性化膿性疾病。淋巴細(xì)胞大量出現(xiàn)時(shí),見(jiàn)于慢性疾病,如慢性胸膜炎及腫瘤等。嗜酸性白細(xì)胞增多,見(jiàn)于過(guò)敏性疾病及寄生蟲(chóng)病。如見(jiàn)到形態(tài)不規(guī)則而體積較大的細(xì)胞,胞漿中有空泡,核仁
34、或核分裂,可能為腫瘤細(xì)胞,必須慎重鑒定。,瑞氏染色液,原理與用途適用于各種脫落細(xì)胞和血細(xì)胞的形態(tài)觀察前的染色(涂片染色),為臨床觀察血細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)、識(shí)別血細(xì)胞及其異常變化、進(jìn)行白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)及檢查血液內(nèi)寄生蟲(chóng)和細(xì)菌等診斷提供幫助。細(xì)胞核蛋白和淋巴細(xì)胞胞漿是由酸性物質(zhì)組成,它與堿性染料美藍(lán)結(jié)合,染成紫藍(lán)色,而細(xì)胞漿則相反,因含有堿性物質(zhì)而與酸性染料伊紅結(jié)合,染成粉紅色;經(jīng)瑞氏染色后,細(xì)胞核和淋巴細(xì)胞胞漿被染成紫藍(lán)色,細(xì)胞漿染成粉紅色。,
35、,使用方法1. 制作血液或脫落細(xì)胞涂片,自然干燥固定;2. 用蠟筆在血膜兩頭劃線,滴加瑞氏染液3~5滴以覆蓋整個(gè)血膜,固定1~2分鐘;滴加等量或稍多的緩沖液(未加緩沖液涂片上有染料顆粒殘留),吸球吹勻或搖動(dòng)玻片染色5~10分鐘;3. 用流動(dòng)水從玻片的一側(cè)沖去染液,自然干燥(或?yàn)V紙吸干);4. 鏡檢。,,注意事項(xiàng)1. 制作血涂片應(yīng)注意:玻片應(yīng)干凈,推片與載片保持30~45°角,血液推開(kāi)后應(yīng)立即在空氣中揮動(dòng),使其迅速干燥
36、,以免血細(xì)胞變形,固定后方可染色;2. 血膜未干透,細(xì)胞尚未牢固附在玻片上,在染色過(guò)程中容易脫落,因此血膜必需充分干燥;3. 染液的濃度、染色時(shí)間及實(shí)驗(yàn)室的溫度要控制,染液越淡,室溫越低,所需染色時(shí)間越長(zhǎng),因此染色時(shí)間應(yīng)視具體情況而定;所加染液以覆蓋涂片為宜,不能過(guò)少,以免蒸發(fā)而染料沉淀;,,4. 細(xì)胞染色對(duì)氫離子濃度十分敏感,稀釋染液必須用緩沖液,沖洗用水應(yīng)近中性,否則各種細(xì)胞染色反應(yīng)異常,致使細(xì)胞的識(shí)別困難;5. 沖洗時(shí)應(yīng)用流
37、水將染液沖去,不能先倒掉染液,以免染料沉著于血片上;6. 染色液可重復(fù)使用,但不能無(wú)數(shù)次重復(fù),若有沉淀物應(yīng)過(guò)濾后使用;7. 染色過(guò)深可用甲醇或酒精適當(dāng)脫色,最好不復(fù)染。,實(shí)習(xí)八 血液檢查-白細(xì)胞分類計(jì)數(shù),白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)是將血液制備成涂片,瑞氏染色后顯微鏡下根據(jù)白細(xì)胞的形態(tài)特征進(jìn)行分類計(jì)數(shù)。通常分類100個(gè)白細(xì)胞,計(jì)算得出各種白細(xì)胞所占百分比。,器材與試劑,器材:載玻片、染色架、顯微鏡、香柏油、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)器、吸水紙等試
38、劑:瑞氏染液,犬采血,采血時(shí)將動(dòng)物固定,局部剪毛、消毒,在靜脈向心端綁扎血帶或由助手緊握,使血管充盈,將注射器刺入靜脈,放松靜脈近端壓迫,以適當(dāng)速度抽血,一次可抽血10-20mL。采血部位:前肢皮下頭靜脈或后肢小隱靜脈采血,2024/1/22,91,制備血涂片,1)推片:血膜厚薄適中,邊緣整齊,外觀呈舌形,頭、體、尾分明。2)干燥3)標(biāo)記,,染色,1)準(zhǔn)備:血膜干透后,用蠟筆在兩端劃線,以防止染色時(shí)染液外溢。將血涂片放染色架上。
39、2)加染液:在涂片上滴加瑞氏染液數(shù)滴,以染液覆蓋整個(gè)血膜為度,稍靜置1min。3)加緩沖液:滴加緩沖液等量或多些,與上述染液充分混勻。4)染色:染色10min.5)沖洗:不要先倒掉染液,平持血涂片用流水緩緩沖洗干凈。6)干燥:直立血涂片,使其自然干燥。,2024/1/22,93,良好血涂片外觀-羽(子彈頭)狀尾部-周邊有空白-無(wú)劃痕,羽狀尾部,,2024/1/22,94,,不良血涂片,2024/1/22,95,白細(xì)
40、胞分類: 先用低倍鏡選擇厚薄適宜,染色良好,細(xì)胞分布均勻的體尾交界處,滴加香柏油一滴,油鏡下分類計(jì)數(shù)。分類時(shí)要有秩序的連續(xù)進(jìn)行,避免主觀選擇視野。通常分類計(jì)數(shù)100個(gè)白細(xì)胞,計(jì)算并報(bào)告各種白細(xì)胞所占比例。,,低倍鏡下所見(jiàn),結(jié)果記錄方式:Ne 正 一 Ly 正Mo 正Eo 正Ba 正,2024/1/22,96,體尾交界處,,理想?yún)^(qū)域,細(xì)胞重疊 細(xì)胞太稀,理想?yún)^(qū)域,2
41、024/1/22,97,各類成熟白細(xì)胞的形態(tài)學(xué):,中性粒細(xì)胞(Ne):在瑞氏染色血涂片上呈圓形,直徑10~13µm,胞漿染粉紅色,核形一葉(桿狀核)至五葉不等,以三葉者多見(jiàn),染成深紫紅色,胞漿中有許多細(xì)小均勻紫紅色顆粒。,2024/1/22,98,嗜酸性粒細(xì)胞(Eo):較中性粒細(xì)胞稍大,胞核多為兩葉,呈眼鏡、八字形,核染色質(zhì)粗糙染深紫紅色,胞漿內(nèi)充滿粗大均勻的嗜酸性顆粒,瑞氏染色時(shí)呈桔紅色,有折光性。,2024/1/22,99
42、,嗜堿性粒細(xì)胞(Ba):胞漿中含有大小不等的嗜堿性顆粒,瑞氏染色時(shí)呈蘭黑色。于光學(xué)顯微鏡下常見(jiàn)胞漿中有小空泡,乃因嗜堿性顆粒易溶于水或因功能活動(dòng)而脫顆粒所致;核呈淡紫紅色常看不清,呈桿狀或分葉狀。,2024/1/22,100,淋巴細(xì)胞(Ly):胞體呈圓形,直徑介于6~15µm之間,在成人血涂片中以小淋巴細(xì)胞為多見(jiàn),直徑6~9µm,核大呈深紫色致密而濃染,胞漿量極少;大淋巴細(xì)胞胞漿量較多,呈清澈的淡藍(lán)色,可見(jiàn)少量嗜苯胺
43、藍(lán)顆粒,胞核圓或橢圓,常偏向細(xì)胞一側(cè),染色較深。,2024/1/22,101,單核細(xì)胞(Mo):在瑞氏染色涂片上為12~20µm,胞體圓形、橢圓形或不規(guī)則形;核形多種多樣,最重要的特點(diǎn)是染色質(zhì)較細(xì)致疏松,呈絲網(wǎng)狀或條縷狀,著色較淡胞漿較多,淡蘭色,含大量細(xì)小塵土樣顆粒。,2024/1/22,102,正常犬外周血白細(xì)胞分類參考值:Ne 60%~70%Ly 12%~30%Mo
44、 3%~10%Eo 2%~10%Ba 0,[參考值],2024/1/22,103,1.血涂片制備要厚薄適宜、均勻、頭體尾分明,無(wú)溶血、無(wú)空洞。 2.很多因素影響涂片時(shí)血膜的厚度。血滴大、血粘度高、推片角度大、速度快則血膜厚,反之則血膜薄。 3.按一定順序,有秩序地連續(xù)進(jìn)行,避免重復(fù)選擇視野。 4.分類計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)同時(shí)報(bào)告RBC和WBC的形態(tài)是否有異常。退化細(xì)胞不計(jì)
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