人巨細胞病毒pp65抗原檢測

1、人巨細胞病毒pp65抗原檢測,監(jiān)測免疫抑制病人的CMV感染·,* 人巨細胞病毒（CMV）感染甚為普遍* 人巨細胞病毒（CMV）感染是免疫功能低下者的常見機會感染* 器官移植后活動性HCMV感染率為20-70%，如發(fā)生CMV肺炎，死亡率可達80-90%* CMV還有抑制機體免疫功能的作用，CMV感染可增加真菌和其他機會感染發(fā)生率，* 還可能造成異基因移植物的損害。* 目前對器官移植后CMV病的重點是

2、預(yù)防，包括預(yù)防性抗病毒或針對CMV亞臨床感染(Preemptive)抗病毒治療治療。,,* 早期檢測活動性HCMV感染是pre-emptive治療的前提條件* CMV常規(guī)病毒培養(yǎng)(CCC)往往需4周才能獲陽性結(jié)果,對早期 診斷幫助不大* CMV特異性抗體IgM，在嚴重免疫抑制患者可不出現(xiàn)或延遲出現(xiàn)。* 人巨細胞病毒pp65白細胞抗原血癥較特異性抗體IgM陽性早出現(xiàn)30天1。優(yōu)點是可定量檢測，5小時內(nèi)可出結(jié)果。,

3、研究目的 了解HCMVpp65抗原檢測在免疫功能低下者臨床HCMV疾病預(yù)測或早期診斷中的價值。 了解HCMVpp65抗原檢測在監(jiān)測疾病活動性和指導(dǎo)CMV““亞臨床感染抗病毒”治療中的價值。 應(yīng)用HCMVpp65抗原檢測分析免疫抑制病人CMV感染的危險因素,試驗原理 用免疫熒光標記的單克隆抗體檢測CMV的低基質(zhì)磷蛋白 pp65。 pp65的特點 * CMV病毒復(fù)制

4、的早期蛋白，它出現(xiàn)于病毒感染的早期，在細胞感染后3－4小時即開始出現(xiàn) * 是CMV病毒含量最豐富的蛋白 * 其功能是將病毒的DNA錨定在受感染細胞的核膜上 * 在胞漿的高爾基體內(nèi)合成,然后運回核內(nèi)。,CMV PP65抗原血癥檢測（一)分離白細胞及制片(二) 固定和打孔(三) 免疫熒光染色(四)、讀片和結(jié)果判斷,試驗結(jié)果,討論 一pp65抗

5、原血癥檢測 直接檢測病毒蛋白的方法不受機體免疫功能的響，在檢測免疫抑制病人的CMV活動性感染時尤其有用. 其檢出率明顯高于血清學(xué)方法 特點為快速（手工操作4-5小時）、敏感性高（活動性感染80-90%，CMV病99-100%）和較高的特異性（77-95%）、可以定量測試 用其指導(dǎo)治療明顯降低了死亡率,在骨髓移植中，可在發(fā)病早期診斷，亞臨床感染的檢出率偏低，應(yīng)尋求更好的預(yù)測方法，或調(diào)整診斷標準 不能檢測

6、新毒株和抗原決定簇有變異的毒株 治療后抗原血癥轉(zhuǎn)陰的病人少部分會復(fù)發(fā)，應(yīng)結(jié)合更好的監(jiān)控療效的方法,,一PP65檢測在監(jiān)測骨髓移植后CMV感染中的應(yīng)用1 －－－早期診斷* 骨髓移植后早期用IGM來診斷CMV感染將貽誤治療* pp65抗原檢測可用于早期診斷，甚至預(yù)測發(fā)病* 如果能在骨髓重建的早期檢測到對CMV的細胞免疫或體液免疫異?；蛞种苿t能更準確地預(yù)測CMV感染。,PP65檢

7、測在監(jiān)測骨髓移植后CMV感染中的應(yīng)用 2 － 骨髓移植后CMV感染的危險因素 CD34＋細胞分選 GVHD(FK506) TBI 合并其他病原體感染,PP65檢測在監(jiān)測骨髓移植后CMV感染中的應(yīng)用3 －－治療時間 細胞數(shù)多者和少者癥狀性感染的發(fā)病率是相近的 90％的癥狀性感染首次陽性抗原血癥的PP65陽性細

8、胞數(shù) <10個/1.5×10?（1－7） 我們認為這組病人只要發(fā)現(xiàn)陽性細胞即應(yīng)治療,,首次pp65抗原陽性細胞數(shù)與CMV疾病危險性 首次pp65抗原陽性細胞 發(fā)病/活動性感染 計數(shù) 例數(shù) 1 1/1 2－3

9、 5/5 4－10 5/6 >10 2/2 由于病例數(shù)少，無法進行COX‘S比例危險性分析.,,,,PP65在監(jiān)測自身免疫病病人CMV感染中的應(yīng)用 發(fā)熱的自身免疫病病人出現(xiàn)CMV感染發(fā)病率和死亡率均很高，CMV感染可能

10、是重要的致病原 較之白細胞減少機體免疫狀態(tài)異常和這種異常未被有效控制，可能是病毒活動性復(fù)制的更主要的原因 陽性細胞數(shù)多少可以幫助判斷和預(yù)測CMV癥狀性感染 CMV特異性IgM的陽性檢出率非常低，,CMV感染的危險因素 CMV感染組DRI評分大多>20 合并細菌或感染 病程長、未正規(guī)治療的狼瘡,三 PP65檢測在監(jiān)測血液腫瘤化療后和再障病人中CMV感染中的應(yīng)用,發(fā)熱的血液腫瘤化療后和再障病出現(xiàn)C

11、MV感染發(fā)病率和死亡率均很高幼稚細胞多，分化程度低，無抗病毒作用或病毒 作用很弱，可能是病毒活動性復(fù)制的更主要的原因 CMV特異性IgM的陽性檢出率非常低 合并細菌或其他感染者CMV感染率高，感染可由多種炎癥因子觸發(fā),結(jié)論 人巨細胞病毒pp65白細胞抗原血癥檢測可作為免疫功能低下者活動性CMV感染或HCMV疾病的預(yù)測指標 骨髓移植后或激素沖擊/化療后發(fā)熱患者PP65抗原血癥出現(xiàn)開始抗病