免疫學(xué)檢查

1、1,概述(P411),免疫學(xué)（immunology）是研究機(jī)體自我識(shí)別和對(duì)抗原性異物排斥反應(yīng)的一門(mén)科學(xué) 。臨床免疫學(xué)檢查常用于感染性疾病、自身免疫性疾病、變態(tài)反應(yīng)性疾病、免疫缺陷病、腫瘤等疾病的診斷與療效監(jiān)測(cè)。,2,,抗原與抗體,3,特 異 性 體 液 免 疫　　　　　　　絮狀沉淀　沉淀反應(yīng)　 環(huán)狀沉淀　　　　　　 免疫濁度　補(bǔ)體結(jié)合 　　凝集試驗(yàn),,,三大標(biāo)記技術(shù),三大血清反應(yīng),,4,傳統(tǒng)的免疫標(biāo)記技術(shù)同位素；

2、( 125I 3H ) RIA IRMA　　　　　 熒光抗體技術(shù)(ANA)熒光標(biāo)記　時(shí)間分辯熒光技術(shù)　　　　　 熒光偏振免疫 (TDX)酶標(biāo)記（ELISA),,其他標(biāo)記技術(shù),5,,其他標(biāo)記技術(shù)發(fā)光物標(biāo)記 　電化學(xué)發(fā)光　　金標(biāo)記技術(shù)　　　硒標(biāo)記技術(shù)　　　　免疫印跡技術(shù),6,,標(biāo)記,7,第一節(jié)　免疫球蛋白（Ig）的檢測(cè),8,Ig的產(chǎn)生、結(jié)構(gòu)與功能 Ig通常是指具有抗體活性和(或)抗體樣結(jié)構(gòu)的球蛋

3、白，由漿細(xì)胞產(chǎn)生，有特異性識(shí)別抗原的功能，但必須與抗原結(jié)合形成免疫復(fù)合物后才能啟動(dòng)效應(yīng)功能。包括：IgG、A、M、D、E,9,一、IgG,參考值：7.0-16.6g/L, 占70-80％特點(diǎn)：長(zhǎng)效、能透過(guò)胎盤(pán)，抗菌、抗病毒測(cè)定方法：?jiǎn)蜗蛎庖邤U(kuò)散（手工） 速率散射比濁（儀器）意義：感染、肝病、 SLE、 －多克隆↑ 免疫增殖、多發(fā)性骨髓瘤－單克隆↑ 減低：免疫缺陷、重鏈病、輕鏈

4、病、 腎病、免疫抑制劑…等,10,二、IgA,參考值：0.7-3.5g/L，存在于各種分泌物中特點(diǎn)：分泌型(SIgA）:粘膜抵抗力 血清型：?jiǎn)误w方法：同上意義：↑粘膜抵抗力、IgA單克?。╩onoclonal）　　　　 感染、多克隆增高 ↓反復(fù)呼吸道感染 非IgA單克隆，如SLE、 免疫缺陷等,11,三、IgM,參考值：0.5-2.6g/L,占5-10％特

5、點(diǎn)：五聚體，大分子 如天然凝集素抗A、抗B意義：早期抗體，出現(xiàn)早，消失快。 感染初期、巨球蛋白血癥　　　　降低情況同上類(lèi)似　　　　方法同上。,12,四、IgD、IgE,IgD:含量低、作用不很明確IgE：含量最少，0.1-0.9mg/L 變態(tài)反應(yīng)如過(guò)敏、寄生蟲(chóng)病有關(guān)　　　　過(guò)敏、哮喘、嗜酸性細(xì)胞增多癥 　　　　降低情況與上類(lèi)似　　　　ELISA法測(cè)定,13,五、血清

6、M蛋白測(cè)定檢測(cè)方法：血清蛋白電泳、免疫電泳主要疾病及M蛋白：　多發(fā)性骨髓瘤：IgG、IgA 、IgE 少見(jiàn)IgD 　巨球蛋白血癥：大量IgM　重鏈?。?Ig重鏈　輕鏈病： Ig輕鏈,14,M蛋白血癥,M：Monoclonal,15,第二節(jié)　補(bǔ)體的測(cè)定,補(bǔ)體是一組具有酶原活性的糖蛋白一、總補(bǔ)體活性“CH50”測(cè)定 溶血素（抗體）致敏綿羊紅細(xì)胞 　補(bǔ)體 溶血 總補(bǔ)體活性＝(1/血清量)×稀釋倍數(shù) 正常

7、參考值：50-100ｋu/L,,,16,總補(bǔ)體活性CH50測(cè)定,,,,17,CH50的臨床意義補(bǔ)體傳統(tǒng)途徑的活化程度增高：急性感染、組織損傷、惡性腫瘤降低：免疫復(fù)合性疾?。I炎)、SLE、 肝病，重癥營(yíng)養(yǎng)不良,18,二、C3與C4測(cè)定,C3含量最高，傳統(tǒng)、旁路途徑都需C3激活　　(是激活的關(guān)鍵) 含量: C3:0.8-1.5g/L C4:0.44-0.66g/L 方法：?jiǎn)蜗蛎庖邤U(kuò)散法

8、（SRID) 同Ig測(cè)定 速率散射免疫比濁法 補(bǔ)體測(cè)定的意義：↑：炎癥、腫瘤 ↓：腎炎、自身免疫病,19,第三節(jié)　細(xì)胞免疫的測(cè)定,一、T細(xì)胞亞群的測(cè)定 1.E花環(huán)（RFC) 原理：T細(xì)胞表面具SRBC受體 正常 58-72％左右 2.淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)（LCT) 原理：淋T PHA 淋母細(xì)胞 正常：同上 意義：T細(xì)胞數(shù)量↓

9、免疫缺陷、腫瘤、免疫病,,20,3．淋巴細(xì)胞分化抗原測(cè)定 T細(xì)胞：CD3-總T標(biāo)志 CD4-TH標(biāo)志 CD8-Ts標(biāo)志 B細(xì)胞： CD19、CD20、CD22等　　　　細(xì)胞的熒光免疫標(biāo)記技術(shù)　　　　流式細(xì)胞儀的應(yīng)用,21,四、細(xì)胞因子測(cè)定 1.白介素2（IL-2)或IL-2R 2.腫瘤壞死因子（TNF) 3.干擾素（IFN) ELISA法，科研，非

10、特異 各組分檢測(cè)意義不同。,22,第四節(jié) 腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)（P418）,腫瘤標(biāo)志物（tumor marker)是指在腫瘤發(fā)生和增殖過(guò)程中，由腫瘤細(xì)胞本身合成、釋放或者是由機(jī)體對(duì)腫瘤細(xì)胞反應(yīng)而產(chǎn)生的一類(lèi)物質(zhì)。這類(lèi)物質(zhì)可反映細(xì)胞惡變各階段表型及基因特征性。腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)的意義是：腫瘤普查、輔助診斷、觀察療效和判斷預(yù)后。,23,一、蛋白質(zhì)類(lèi)1.AFP（甲胎蛋白）： 胎兒早期肝臟合成的糖蛋白，對(duì)診斷肝細(xì)胞癌有重要臨床意義。

11、 [方法]：RIA；ELISA；化學(xué)發(fā)光 [參考值]：300μg/L,24,2.CEA（癌胚抗原）： [方法]：RIA；ELISA；化學(xué)發(fā)光 [參考值]：<5μg/L [臨床意義]：非特異性--部分惡性腫瘤，特別是消化道腫瘤患者中可升高，對(duì)腸癌復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移有重要意義。,25,3.組織多肽抗原（略）4.PSA（前列腺特異抗原）－－存在于前列腺管道的上皮細(xì)胞中，在前列腺癌時(shí)血清水平明顯升高，敏感性、特異性高。 游離PS

12、A的檢測(cè)及其PSA/fPSA比值,26,5.鱗狀上皮癌抗原（SCC)參考值：血清<1.5μg/L 臨床意義：鱗狀上皮癌，肺、宮頸癌二、糖類(lèi)抗原腫瘤標(biāo)志物,27,1. CA199－－胰腺癌和消化道癌時(shí)，患者血清 CA199水平可明顯升高. 2.CA125（癌抗原125）－－為一種糖蛋白性腫瘤相關(guān)抗原，存在于卵巢腫瘤的上皮細(xì)胞內(nèi)，對(duì)診斷卵巢癌有較大臨床價(jià)值。3.CA153（癌抗原153）－－對(duì)乳腺癌有重要的輔助診斷作用

13、,28,腫瘤標(biāo)志物的臨床應(yīng)用,篩查：高危人群診斷、良/惡鑒別：輔助指標(biāo)療效觀察：外科—手術(shù)切除/殘瘤/姑息 保守—藥效、放療效果4 預(yù)后：病員分群,標(biāo)志物: 5 隨訪(fǎng)……,29,第五節(jié)　自身抗體檢測(cè) （P423）,--自身免疫病是指免疫系統(tǒng)對(duì)自身成分的免疫耐受性減低或破壞，產(chǎn)生自身抗體損傷含有相應(yīng)自身抗原的組織器官而造成的疾病。,30,一、類(lèi)風(fēng)濕因子（RF） 是變性IgG刺激機(jī)體產(chǎn)生的一種

14、自身抗體 方法：膠乳凝集法；RIA；ELISA 臨床意義：類(lèi)風(fēng)濕性疾病時(shí)，RF ↑，70-90％ 其他自身免疫性疾病， RF 亦可↑,31,二、抗核抗體檢測(cè)1.ANA:　是一種泛指抗各種細(xì)胞核成分的自身抗體，是血清中存在的一類(lèi)和自身組織細(xì)胞的細(xì)胞核發(fā)生反應(yīng)的自身抗體的總稱(chēng)。 無(wú)器官和種屬特異性臨床意義：陽(yáng)性多見(jiàn)于未治療的SLE，陽(yáng)性率達(dá)80％一100％，亦可見(jiàn)于其他自身免疫性疾病。,32,2.抗ds

15、-DNA抗體：　靶抗原是細(xì)胞核中DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu) 方法：免疫熒光法、放射免疫法 [臨床意義]　SLE的高特異性試驗(yàn)，但敏感性較低，活動(dòng)期SLE陽(yáng)性率70％-90％,33,3.可提取性抗原抗體譜（ENA） 可提取性核抗原多肽抗體譜－包括抗Sm、核糖體、ScL70、Jo－1、SSB、SSA和RNP等的抗體。 [方法]免疫印跡 [臨床意義] （見(jiàn)P424 表4-8-2） 抗Sm抗體：SLE的特異性標(biāo)志之一 ，抗dsDNA和

16、抗Sm抗體同時(shí)檢測(cè)，可提高SLE診斷率。 抗SSA、SSB抗體－－干燥綜合征 抗RNP抗體--混合性結(jié)締組織病,34,第六節(jié)　感染的免疫學(xué)檢查　　　　?。≒434）　一、細(xì)菌感染免疫?。保埂癘”抗體測(cè)定 抗溶血性鏈球菌(感染）抗體 溶血法 膠乳法：<500u 速率散射法 意義：風(fēng)濕、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕性心臟病、 腎炎時(shí)↑同時(shí)測(cè)血沉,35,２．肥達(dá)氏反應(yīng)：原理：是利用傷寒和副

17、傷寒沙門(mén)菌菌液為抗原，檢測(cè)病人血清中有無(wú)相應(yīng)抗體的一種凝集試驗(yàn)。傷寒第三周后陽(yáng)性率達(dá)80%，初期陰性方法：直接凝集法　　 H<1:160 鞭毛抗原 記憶反應(yīng) O<1:80 甲<1:80 乙<1:80 副傷寒 丙<1:80,,36,二、病毒感染的免疫學(xué)檢測(cè)（一）TORCH弓型蟲(chóng)、風(fēng)疹、巨細(xì)胞病毒、單純泡疹（三）性傳播疾病的免疫學(xué)檢測(cè)（STD)　　　支原體、衣原

18、體?。ń饦?biāo)法）　 　　　梅毒　初篩RPR、確診T-PHA　　　HIV 初篩ELISA、蛋白印跡試驗(yàn),37,（一）梅毒感染檢測(cè) 1.篩選試驗(yàn)：RPR－快速血漿反應(yīng)素試驗(yàn) 2.確診試驗(yàn)：TPHA－梅毒螺旋體血凝試驗(yàn)（二）HIV感染檢測(cè) 1.篩選試驗(yàn)：ELISA法測(cè)HIV抗體 2.確診試驗(yàn)：蛋白印跡試驗(yàn)或RT-PCR測(cè)HIV-RNA,38,第九章（P452） 　 第四節(jié) 肝炎血清標(biāo)志物測(cè)定,一、甲

19、型肝炎 IgM抗體（ELISA法測(cè)定）：現(xiàn)實(shí)感染，診斷意義 IgG抗體（ELISA法） ：流行病學(xué)意義,39,二、乙型肝炎 1.最常用的檢測(cè)項(xiàng)目（兩對(duì)半-見(jiàn)表4-5-4） 方法：ELISA、放射免疫法（RIA），發(fā)光免疫法 2.乙肝DNA定量PCR檢測(cè)：病毒復(fù)制的指標(biāo) 正常：PCR(-)或<10-3 Copy / ml 拉米夫定(賀普丁）、干擾素治療效果主要指標(biāo)。,40,乙肝常見(jiàn)的檢