梅毒診斷研究進(jìn)展

1、梅毒診斷研究進(jìn)展,,He who knows syphilis,knows medicine,,,一、概述二、梅毒螺旋體三、梅毒四、梅毒的實驗室診斷五、我國梅毒診斷試劑的現(xiàn)狀六、中國藥品生物制品檢定所簡介,一、概述,,名 詞,梅毒（Syphilis）由梅毒螺旋體感染引起的一種慢性全身性性傳播疾病是我國衛(wèi)生部規(guī)定的8種重點防治性病之一《中華人民共和國傳染病防治法》規(guī)定的乙類傳染病世界衛(wèi)生組織列為世界上最常見的50

2、種傳染病之一 梅毒螺旋體（Treponema pallidum，TP ）是梅毒的病原體，因其透明，不易著色，故又稱蒼白螺旋體,溯 源,關(guān)于梅毒(syphilis)的起源和傳播有很多爭執(zhí) 梅毒來源于美洲：有記載，1493年哥倫布發(fā)現(xiàn)新大陸，其水手從西印度群島上感染了梅毒，1497年回到歐洲，其水手帶回去的梅毒很快在歐洲廣泛流行。亦有考證在美洲印地安人的骨骼上留有梅毒病損的遺跡1498年梅毒傳到印度1510年傳入日本，隨后

3、蔓延全世界。大約于1505年由印度傳入我國廣東，當(dāng)時稱為“廣東瘡”、“楊梅瘡”，此后梅毒向內(nèi)地傳播解放前梅毒在我國的傳播甚為廣泛，一些大城市的發(fā)病率達(dá)４．５－１０．１％，某些少數(shù)民族地區(qū)高達(dá)４８％解放后，我國政府采取措施，只花費了十幾年時間就控制了梅毒等性病的流行。爾后，撤銷了大部分性病防治機(jī)構(gòu)，醫(yī)學(xué)院校也取消了性病課程，許多中青年醫(yī)務(wù)人員壓根兒就沒見到過早期梅毒，至于一般年輕人甚至還沒聽說過這種病。 80年代初，梅毒和其他性傳

4、播疾病一樣在我國死灰復(fù)燃，而且迅速蔓延,二、梅毒螺旋體,,分類,螺旋體目（Spirochaetales）螺旋體科（Spirochaetaceae）密螺旋體屬（Treponema）蒼白螺旋體種（Treponema pallidum）分幾個亞種,生物學(xué)特性—形態(tài)學(xué)1,細(xì)長，5～15×0.1～0.2um，形似細(xì)密的彈簧，螺旋彎曲規(guī)則，平均8～14個，兩端尖直電鏡下顯示結(jié)構(gòu)復(fù)雜，從外向內(nèi)分為：外膜（主要由蛋白質(zhì)、糖及類脂組成

5、）、軸絲（主要由蛋白質(zhì)組成）、圓柱形菌體（包括細(xì)胞壁、細(xì)胞膜及胞漿內(nèi)容物）,生物學(xué)特性—形態(tài)學(xué)2,透明不易染色，姬姆薩染色則可染成桃紅色 在暗視野顯微鏡下觀察，螺旋體浮游于組織中 有三種特征性的運動方式：①旋轉(zhuǎn)式，依靠自己的長軸旋轉(zhuǎn)，向前后移動②伸縮螺旋間距離活動，不斷地拉長身體，使一端附著，再收縮旋距而前進(jìn)；③蛇行式，彎曲，像蛇爬行，是常見的方式,生物學(xué)特性—形態(tài)學(xué)3,細(xì)胞質(zhì)外有三層細(xì)胞質(zhì)膜，有柔軟而較堅固的粘蛋白包繞，以維

6、持其一定的結(jié)構(gòu)，外膜含有豐富的脂類及少量的蛋白6條內(nèi)鞭毛圍繞其內(nèi)層細(xì)胞壁和外層細(xì)胞膜之間的空間旋轉(zhuǎn)，是負(fù)責(zé)運動的收縮成分表面有特異性抗原，能刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性的凝集抗體及密螺旋體制動或溶解抗體,繁 殖,繁殖方式與其生活環(huán)境有關(guān)近年來電子顯微鏡觀察，在培養(yǎng)條件下或在體內(nèi)適宜環(huán)境中為橫斷分裂，分裂時將軀干分裂成長短兩段分裂增代時間為30—33小時當(dāng)條件不利時，以分芽子繁殖生活發(fā)育周期:顆粒期、球形體期及螺旋體期，與所致疾病周

7、期、隱伏發(fā)作及慢性病程有關(guān),培 養(yǎng),一般不能人工培養(yǎng)Nichols株（有毒株）能接種在家兔睪丸中或眼前房內(nèi)繁殖，能保持毒力轉(zhuǎn)種至加有多種氨基酸的兔睪丸組織碎片的特殊培養(yǎng)基中，25℃厭氧環(huán)境下能使螺旋體保持運動能力4-7天1981年Fieldsteel等采用棉尾兔單層上皮細(xì)胞在1.5%氧的大氣環(huán)境進(jìn)行培養(yǎng)，經(jīng)9-12天孵育后，螺旋體數(shù)比接種數(shù)平均增加49倍，對兔仍保持毒力Reiter株能生長繁殖，已喪失致病力Nichols株

8、和Reiter株已廣泛用作多種梅毒血清學(xué)的診斷抗原,生存條件,厭氧寄生物，在人體內(nèi)可長期生存，體外不易生存干燥、肥皂水及一般消毒劑如1：1000苯酚、新潔爾滅、稀酒精均可于短時間將其殺死在血液中4℃經(jīng)3日可死亡，故在血庫冰箱冷藏3日以上的血液就無傳染性溫度的影響：41-42℃時可生活1-2小時，在48℃僅半小時即失去感染力，100℃立即死亡。對寒冷抵抗力大，在0℃時，可生活48小時，如將梅毒病損標(biāo)本置于冰箱內(nèi)，經(jīng)1周仍可致病。在低

9、溫（-78℃）保存數(shù)年，仍可保持其形態(tài)、活動及毒性在封存的生理鹽水稀釋的組織液中可生活10小時左右在潮濕的器具或濕毛巾中，亦可生存數(shù)小時在干燥環(huán)境中可見迅速死亡,宿 主,梅毒螺旋體只感染人類人是梅毒的唯一傳染源,毒力因子,目前未證明具有內(nèi)毒素或外毒素粘多糖和粘多糖酶是其主要毒力因子 莢膜樣的粘多糖能保護(hù)菌體免受環(huán)境中不良因素的傷害，在體內(nèi)可阻止大分子物質(zhì)（如抗體）穿透，從而保護(hù)菌體，還有抗吞噬作用 粘多糖酶與對組織細(xì)胞

10、的吸附，對組織基質(zhì)的分解和莢膜的合成有密切關(guān)系,致 病 性,由于其表面有賴以生存的莢膜樣的粘多糖，莢膜中含有的N-乙酰-D-半乳糖胺，不能自行合成，須從宿主細(xì)胞獲得其粘多糖酶吸附含粘多糖的組織細(xì)胞表面的粘多糖受體上，分解宿主細(xì)胞的粘多糖、獲取合成莢膜所需的物質(zhì)由于粘多糖是宿主組織和血管支架的重要基質(zhì)成分，粘多糖被梅毒螺旋體分解后，組織受到損傷破壞，從而引起血管的塌陷，血供受阻，造成管腔閉合性動脈內(nèi)膜炎，動脈周圍炎及壞死，潰瘍等病

11、變,抗 原,分為三類：1．表面特異性抗原：刺激機(jī)體產(chǎn)生特異凝集抗體及密螺旋體制動或溶解抗體，后者加補體可溶解螺旋體2．螺旋體內(nèi)類屬抗原：可產(chǎn)生補體結(jié)合抗體，與非病原性螺旋體有交叉反應(yīng)3，螺旋體與宿主組織磷脂形成的復(fù)合抗原：當(dāng)螺旋體侵入組織后，組織中的磷脂可粘附在螺旋體上，形成復(fù)合抗原，此種復(fù)合抗原可刺激機(jī)體產(chǎn)生抗磷脂的自身免疫抗體，稱為反應(yīng)素（Aegagin），可與牛心肌或其他正常動物心肌提取的類脂質(zhì)抗原起沉淀反應(yīng)（康氏試驗）或

12、補體結(jié)合反應(yīng)（華氏試驗）,免 疫,以細(xì)胞免疫為主，體液免疫只有一定的輔助防御作用當(dāng)螺旋體從體內(nèi)清除后可再感染，而且仍可出現(xiàn)一期梅毒癥狀此病周期性潛伏與再發(fā)的原因可能與體內(nèi)產(chǎn)生的免疫力有關(guān)機(jī)體免疫力強(qiáng)，螺旋體能變成顆粒形或球形，在體內(nèi)一些部位潛伏起來，一旦機(jī)體免疫力下降，螺旋體又可侵犯體內(nèi)某些部位而復(fù)發(fā)。,三、梅 毒,,分 類,人是梅毒的唯一傳染源由于感染方式不同可分：先天性梅毒：患梅毒的孕婦經(jīng)胎盤間接傳染給胎兒

13、后天性梅毒：出生后感染的，其中95%是由性交直接感染，少數(shù)通過輸血感染,先天性梅毒,又稱胎傳梅毒梅毒螺旋體經(jīng)胎盤進(jìn)入胎兒血循環(huán)，引起胎兒全身感染螺旋體在胎內(nèi)兒臟（肝、脾、肺及腎上腺）及組織中大量繁殖，造成流產(chǎn)或死胎如胎兒不死則稱為梅毒兒，會出皮膚梅毒瘤、骨膜炎、鋸齒形牙、神經(jīng)性耳聾等癥狀,后天獲得性梅毒,表現(xiàn)復(fù)雜，依其傳染過程可分為三期：一、二期梅毒又統(tǒng)稱為早期梅毒，此期傳染性強(qiáng)而破壞性小三期梅毒又稱為晚期梅毒，該期傳染性小，

14、病程長、破壞性大,初期梅毒,梅毒螺旋體侵入皮膚粘膜約三周后，在侵入局部出現(xiàn)無痛性硬結(jié)及潰瘍，稱硬性下疳局部組織鏡檢可見淋巴細(xì)胞及巨噬細(xì)胞浸潤下疳多發(fā)生于外生殖器，其潰瘍滲出物含有大量梅毒螺旋體，傳染性極強(qiáng)下疳?？勺匀挥霞s2～3個月無癥狀的隱伏期后進(jìn)入第二期,二期梅毒,此期的主要表現(xiàn)為全身皮膚粘膜出現(xiàn)梅毒疹，全身淋巴結(jié)腫大，有時亦累及骨、關(guān)節(jié)、眼及其他器官在梅毒疹及淋巴結(jié)中有大量螺旋體。不經(jīng)治療癥狀一般可在3周～3個月后自然消

15、退而全愈；部分病例經(jīng)隱伏3～12個月后可再發(fā)作二期梅毒因治療不當(dāng)，經(jīng)過5年或更久的反復(fù)發(fā)作，而進(jìn)入三期,三期梅毒,主要表現(xiàn)為皮膚粘膜的潰瘍性損害或內(nèi)臟器官的肉芽腫樣病變（梅毒瘤）嚴(yán)重者在經(jīng)過10～15年后引起心血管及中樞神經(jīng)系統(tǒng)損害，導(dǎo)致動脈瘤、脊髓癆及全身麻痹等此期的病灶中螺旋體很少，不易檢出,梅毒分類總結(jié),Early（infectious）syphilisTime after exposure9-90 days

16、 primary6weeks-6months secondary(4-8weeks after primary lesion)≤2 years (early)Latent Late(non-infectious)syphilis

17、>2 years (late)Latent3-20years Tertiary Gummatous Cardiovascu

18、lar Neurosyphilis Congenital syphilis<2 years since birth early congenital syphilis(includes stillbirth)≥2years

19、 Late congenital syphilis,防治原則,梅毒是一種性病，預(yù)防的主要措施是加強(qiáng)衛(wèi)生宣傳教育和社會管理目前尚無疫苗預(yù)防對病人應(yīng)早診、早治，現(xiàn)多采用青霉素3個月～1年，以血清中抗體陰轉(zhuǎn)為治愈指標(biāo),四、梅毒的實驗室診斷,,梅毒檢測的應(yīng)用,臨床診斷及篩查血源篩查出入境人員等的體檢,梅毒螺旋體檢查,1．暗視野顯微鏡檢查2．免疫熒光染色3．活體組織檢查梅毒螺旋體，如用銀染色法（Warthin-s

20、tarry）法或（Levoaditis法)或熒光抗體染色,螺旋體的鑒別,與雅司、地方性梅毒、品他三種非性病性螺旋體鑒別，還應(yīng)與齒大螺旋體、齒小螺旋體、軟螺旋體、生殖器螺旋體相鑒別 1．雅司、地方性梅毒、品他三種非性病螺旋體：形態(tài)上不能區(qū)別2．齒大螺旋體：為疏螺旋體，比梅毒螺旋體長，存在于口腔中，尤其在齒縫內(nèi)最多； 3．齒小螺旋體：比梅毒螺旋體短，旋距也短，運動不規(guī)則，兩端較中部略寬。主要見于齒垢中； 4．軟螺旋體：為疏螺旋體，螺

21、旋較少，運動不規(guī)律且快，常不斷改變其形態(tài)。寄生于皮膚潰瘍中。 5．生殖器螺旋體：比梅毒螺旋體短小，螺旋體大而不規(guī)則，生于陰垢內(nèi)，不經(jīng)常清洗者檢出率較高。 6．其他：與螺旋形網(wǎng)狀纖維、纖維蛋白細(xì)絲、纖毛、串狀紅細(xì)胞等呈螺旋狀的物體相鑒別。,基因診斷技術(shù)檢測梅毒螺旋體,梅毒螺旋體不能進(jìn)行體外培養(yǎng)。檢測臨床標(biāo)本中梅毒螺旋體最敏感、可靠的方法是兔感染試驗（RIT），RIT能證實活的梅毒螺旋體存在，是檢測梅毒螺旋體常用的標(biāo)準(zhǔn)方法 目前有四套

22、擴(kuò)增梅毒螺旋體DNA的系統(tǒng)：擴(kuò)增47KDa膜抗原基因（tpp47基因），擴(kuò)增39KDa堿性膜蛋白基因（bmp基因），擴(kuò)增TpF1蛋白基因（tpf-1）或TyF1蛋白基因（tyf-1）和擴(kuò)增tmpA基因,梅毒血清試驗,非梅毒螺旋體抗原血清試驗 (非特異性) 梅毒螺旋體抗原血清試驗 (特異性),非梅毒螺旋體抗原血清試驗,用心磷脂作抗原，測定血清中抗心磷脂抗體，亦稱反應(yīng)素敏感性高而特異性較低，且易發(fā)生生物學(xué)假陽性早期梅毒

23、患者經(jīng)充分治療后，反應(yīng)素可以消失，早期未經(jīng)治療者到晚期，部分病人中反應(yīng)素也可以減少或消失目前一般作為篩選和定量試驗，觀察療效，復(fù)發(fā)及再感染,非梅毒螺旋體抗原血清試驗(早期),1906年Wassermann等首先提出補體結(jié)合試驗（瓦氏反應(yīng))Kahn在1922年發(fā)明了一種更為簡單的康氏試驗其后又在沉淀反應(yīng)的基礎(chǔ)上發(fā)展為絮狀反應(yīng)，如Kline試驗三種試驗其抗原是采用牛心肌粉酒精浸液提取，謂之心肌脂抗原 類似方法據(jù)統(tǒng)計有幾十種,非梅毒

24、螺旋體抗原血清試驗,1．性病研究實驗室試驗（Venereal Disease Research Laboratory test，VDRL）；用心磷脂、卵磷脂及膽固醇為抗原， 缺點：抗原每天配制；血清標(biāo)本加熱滅活；結(jié)果在顯微鏡下觀察 2．不加熱血清反應(yīng)素玻片試驗（Unheated Serum Reagin USR）也是VDRL抗原的改良，敏感性及特異性與VDRL相似，仍需顯微鏡下觀察3．快速血漿反應(yīng)素試驗（Rapid Plasma r

25、eagin test， RPR）：是VDRL抗原的改良，敏感性及特異性與VDRL相似，加入特制炭粉，可肉眼讀出結(jié)果4．甲苯胺紅不加熱血清試驗（Toluidine red untreated serum test , TRUST）：加特制的甲苯胺紅，穩(wěn)定、顆粒均勻，生產(chǎn)批間差小，結(jié)果易觀察,非梅毒螺旋體抗原血清試驗的特點,敏感性相似，對I、II期梅毒有診斷價值，可作篩查和療效隨訪特異性較差，正常人群陽性率達(dá)0.1%敏感性:抗心磷脂抗

26、體晚于特異性抗體的出現(xiàn)，晚期可能轉(zhuǎn)陰不適合I期梅毒早期、III期梅毒，對潛伏梅毒和神經(jīng)梅毒也不敏感陽性時應(yīng)結(jié)合病史、臨床癥狀綜合判斷，并用梅毒螺旋體試劑盒確證,梅毒螺旋體抗原血清試驗,用活的或死的梅毒螺旋體或其成分來作抗原測定抗螺旋體抗體敏感性和特異性均高，一般用作確證試驗檢測血清中抗梅毒螺旋體IgG抗體，即使患者經(jīng)過足夠治療，仍能長期存在，甚至終身不消失，血清反應(yīng)仍持續(xù)存在陽性，不能用于觀察療效,梅毒螺旋體抗原血清試驗,TPI

27、 梅毒螺旋體制動試驗（1949）　　TPA 梅毒螺旋體凝集試驗（1953）　　TPIA 梅毒螺旋體免疫吸附試驗（1953）　　TPCP 梅毒螺旋體補體結(jié)合試驗（1953）　　TPMB 梅毒螺旋體甲基蘭試驗（1956）　　WTPCP 梅毒螺旋體（全部）補體結(jié)合試驗（1957）　　RFCFR Riter蛋白補體結(jié)合試驗（1957）　　TWR 螺旋體瓦色曼反應(yīng)試驗（1957）　　FTA-200 熒光螺旋體抗體試驗200（196

28、0）　　FTA-ABS 熒光螺旋體抗體吸收試驗（1964）　　TPHA 梅毒螺旋體血凝集試驗（1966）　　TPPA 梅毒螺旋體明膠凝集試驗　　19S-IgM-TPHA 19S-IgM梅毒螺旋體血凝試驗　　IgM-SPHA IgM固相血凝試驗　　TP-IgM-HA 梅毒螺旋體IgM血凝試驗　　IgM-Cap-ELISA 梅毒螺旋體IgM抗體捕捉酶聯(lián)免疫吸附試驗　　19S-IgM-FTA-ABS 19S-IgM熒光螺旋體抗

29、體吸收試驗,梅毒螺旋體制動試驗,梅毒螺旋體制動試驗（Treponema Pallidum immobilization ，TPI）；用Nichol株螺旋體（活的）加病人血清（含抗體）后，在補體的參與下可抑制螺旋體的活動。如≥50%梅毒螺旋體停止活動，則為陽性。此試驗特異性、敏感性均高，但設(shè)備要求高，操作難，僅供研究用,目前常用的梅毒螺旋體抗原血清試驗,1．熒光梅毒螺旋體抗體吸收試驗（fluorescent treponema antib

30、ody absorption ，F(xiàn)TA-ABS Test）2．梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗（T.pallidum particle agglutination ，TPPA）3．梅毒螺旋體酶聯(lián)免疫試驗(Treponema Pallidum ELISA),FTA-ABS,間接熒光抗體技術(shù)較敏感和較特異的試驗，公認(rèn)為金標(biāo)準(zhǔn)梅毒螺旋體Nichols株作抗原，Reiter株進(jìn)行吸收FITC標(biāo)記的抗人抗體步驟多，對照多，結(jié)果判定需要經(jīng)驗

31、,TPPA,敏感性和特異性均高，操作簡便TPPA取代TPHA明膠顆粒取代紅細(xì)胞用于抗原的致敏，不需要吸收過程非特異性凝集少對板、槍頭要求較高,TP-ELISA,抗原采用超聲破碎的螺旋體抗原或重組抗原檢測IgM或IgG敏感性和特異性與其他試劑基本一致應(yīng)作進(jìn)一步評價,重組梅毒螺旋體抗原,目前已重組的TP抗原有近20多種，如TpN15、TpN17、TpN19、TpN29～35（TpD）、TpN44.5（TmP a）、TpN47、

32、TpN35(Tmp c) TP15kD抗原 ：15kD蛋白是一種脂蛋白，首先由Hensel等1985年分離鑒定，它在TP膜蛋白中的含量相對較少，但在免疫印跡試驗中與人梅毒血清間顯示了超強(qiáng)的反應(yīng)性 TmP A：TmP a是一個分子量為42kD的TP膜蛋白 ，血清學(xué)診斷中的意義 ：一期梅毒76%、二期梅毒100%、早期穩(wěn)性梅毒98% TP47kD抗原：該蛋白為TP整合性膜蛋白抗原，1986年Norgard等[12]在大腸桿菌中首先克隆

33、及表達(dá)了重組47kD抗原。多中心研究發(fā)現(xiàn)[13]，此蛋白有很強(qiáng)的免疫原性，在TP中含量非常豐富，且為致病菌特有的蛋白,梅毒血清假陽性反應(yīng),技術(shù)性假陽性反應(yīng)：如實驗室操作錯誤，標(biāo)本溶血等，如重復(fù)試驗，無梅毒患者血清試驗成為陰性。生物學(xué)假陽性反應(yīng)：因非螺旋體抗原血清試驗是非特異性的，在其它一些疾病，尤以感染性疾病，也可釋放心擬脂至血液中，產(chǎn)生反應(yīng)素，如麻風(fēng)、麻疹、瘧疾、傳染性肝炎、病毒性肺炎、傳染性單核細(xì)胞增多癥，系統(tǒng)性紅斑狼瘡，非典型性

34、肺炎、甚至妊娠都可出現(xiàn)陽性，但這類患者血清反應(yīng)滴度低，很少超過1：8。而且半年內(nèi)漸轉(zhuǎn)成陰性。另外可用特異性的梅毒血清反應(yīng)證實。如用FTA－ABS試驗,梅毒血清假陽性反應(yīng)的原因,Disease or condition Nontreponemal Treponemal Autoimmune disease Yes

35、 Yes Malaria Yes No Recent immunizations Yes No Dermatologic diseases

36、 Yes Yes Cardiovascular disease Yes Yes Tuberculosis Yes

37、 No Leprosy Yes Yes Intravenous drug abuse Yes No Viral infection

38、 Yes No Febrile illness Yes Yes Pregnancy Yes

39、 No HIV Yes No Other STD Yes No Age

40、 No Yes Multiple blood transfusions Yes No Lyme disease No

41、 Yes Endemic treponematoses Yes Yes Transient unknown cause Yes Yes Technical errors

42、 Yes Yes,梅毒感染及檢測,血清學(xué)檢測的幾個特點,在最初的兩周可能是陰性結(jié)果FTA、TPPA和ELISA在所有階段都最敏感VDRL和RPR在三期梅毒期可能為陰性VDRL-CSF僅用于診斷神經(jīng)性梅毒,梅毒血清試驗結(jié)果判斷,RPR/TRUST TPHA FTA-ABS TPPA 反應(yīng)結(jié)果判斷 陰性

43、陰性 陰性 陰性 排除梅毒感染初期，尚未產(chǎn)生任何 抗體； AIDS病人合并感染梅毒 陰性 陰性 陽性 陽性 既往患梅毒，對FTA-ABS及TPPA非

44、 特異性反應(yīng) 陽性 陰性 陰性 陰性 生物性假陽性(BFP)，可疑早期梅毒 陽性 陰性 陽性 陽性 早期梅毒，陳舊性梅毒 陰性 陽性 陰性 陰性 梅毒治愈，對TPHA非特異性反應(yīng) 陰性 陽性

45、 陽性 陽性 先天梅毒，梅毒治愈，其它螺旋體感染 陽性 陽性 陰性 陽性 可疑既往患梅毒，梅毒螺旋體抗體消失 陽性 陽性 陽性 陽性 梅毒(治愈或未治愈),假陽性反應(yīng),確無性接觸史、性病史、流產(chǎn)史、梅毒病征(如鞍鼻、胡金森氏齒、樹膠腫、下疳及梅毒疹等)，及無抗梅治療史其父母或配偶無梅毒癥狀、體征及梅毒血清反應(yīng)陽性史，其本人亦

46、無臨床癥狀在6月內(nèi)無特殊抗梅治療，血清反應(yīng)自動轉(zhuǎn)為陰性者 有發(fā)熱或其他疾病，經(jīng)2-4周或更長時間后再驗血，血清反應(yīng)轉(zhuǎn)為陰性者在一次陽性血清反應(yīng)之前，經(jīng)數(shù)次驗血皆為陰性者，亦無性接觸及輸血史 孕婦梅毒經(jīng)正規(guī)抗梅治療完畢，其所生初生兒的臍帶血呈陽性者，追蹤觀察嬰兒血清，3～6月后血清反應(yīng)呈陰性非梅毒螺旋體抗原試驗RPR或USR l：2陽性患者，經(jīng)查TPHA及TPPA皆陰性。,假陰性反應(yīng),在梅毒螺旋體感染后1～2周內(nèi)可呈陰性反應(yīng)梅

47、毒螺旋體感染不久即開始治療晚期梅毒患者的血清中反應(yīng)素含量低，敏感性低的梅毒血清試驗易出現(xiàn)陰性反應(yīng)在二期梅毒時RPR試驗也可出現(xiàn)陰性反應(yīng)，前帶現(xiàn)象(prozone phenomenon),抗梅毒治療后的血清反應(yīng),(1)血清陰轉(zhuǎn)(2)血清滴度降低不陰轉(zhuǎn)，血清抵抗體內(nèi)仍有潛在的活動性病變存在病人體內(nèi)的免疫力持久(反應(yīng)素長久存在)對抗梅藥物有耐藥性或劑量不足 (3)血清反應(yīng)復(fù)發(fā),各期梅毒的血清學(xué)檢出率,梅毒血清學(xué)檢測策略,CDC于

48、2002年度在《疾病率和死亡率周報》（MMWR） 發(fā)表的性傳播疾病診斷和治療指導(dǎo)原則 中，對于梅毒血清學(xué)試驗指出：The use of only one type of serologic test is insufficient for diagnosisWHO推薦同時采用非梅毒螺旋體和梅毒螺旋體抗原血清試驗用于篩查和和診斷,國外的情況,1、美國和歐洲一些國家如法國、比利時采用非梅毒螺旋體抗原血清試驗用于篩查2、最近美國開始采用梅

49、毒螺旋體抗原血清試驗用于血源篩查3、一些歐洲國家，如德國、荷蘭采用梅毒螺旋體抗原血清試驗用于篩查4、英國采用兩種方法聯(lián)合使用篩查,各種梅毒螺旋體抗原血清試驗所采用的抗原,FTA-ABS 完整螺旋體TPHA 純化和超聲破碎螺旋體TPPA 純化和超聲破碎螺旋體EIA

50、 純化和超聲破碎螺旋體 Immunoblots 純化和超聲破碎螺旋體EIA 重組抗原Latex agglutination 重組抗原,英國PHLS梅毒血清學(xué)工作組的建議-1,由于早期I期梅毒的血清陰性窗口期，對近期有性傳播疾病感染病人的追蹤是必要的鑒于可能的假陰性結(jié)果，不推薦單獨采用非螺旋體檢測進(jìn)行篩查單獨采

51、用TP-ELISA或非螺旋體檢測和螺旋體檢測聯(lián)用（VDRL/RPR和TPHA）適合在英國進(jìn)行篩查篩查出的陽性標(biāo)本需要用同樣敏感性的另一種試劑進(jìn)行確證，最好特異性更好,英國PHLS梅毒血清學(xué)工作組的建議-2,對于確證試驗中不一致的標(biāo)本需要進(jìn)一步的檢測；幾個指定試驗室可提供服務(wù)所有確證陽性標(biāo)本應(yīng)送到指定試驗室做檢測，并收集相關(guān)數(shù)據(jù)對于確證陽性標(biāo)本，應(yīng)檢測病人的標(biāo)本，以證實結(jié)果和確為該病人在梅毒感染患者中，應(yīng)進(jìn)行定量非螺旋體試驗和/或

52、特異性IgM檢測，以評估感染階段和監(jiān)測治療效果,五、我國梅毒診斷試劑的現(xiàn)狀,,我國梅毒診斷試劑的發(fā)展,RPR、TRUST生產(chǎn)廠家：5、7TP-ELISA生產(chǎn)企業(yè)： 16膠體金生產(chǎn)企業(yè)： 5進(jìn)口試劑—TPPA： 1,血源篩查用試劑批批檢制度,HIV、HCV、HBV、ABO、梅毒1994年開始進(jìn)行批批檢批批檢梅毒試劑包括： RPR、TRUST、TP-ELISA、TPPA,1997-2

53、002年梅毒血清學(xué)診斷試劑批批檢一覽表,1997 1998 1999 2000 2001 2002 共計RPR 22 16 14 18 13 12 95 TRUST 20 25 29 37 40 36 187間接

54、法 3 6 6 15雙抗原夾心法 2 26 50 78TPPA 4 4

55、 8,中國藥品生物制品檢定所,位于崇文區(qū)天壇西里2號由成立于1950年的中央人民政府衛(wèi)生部藥物食品檢驗所和生物制品檢定所于1961年合并成立的衛(wèi)生部藥品生物制品檢定所1986年改名為中國藥品生物制品檢定所檢定所是國家藥品監(jiān)督管理局的直屬事業(yè)單位國家檢驗藥品生物制品質(zhì)量的法定機(jī)構(gòu)和最高技術(shù)仲裁機(jī)構(gòu),中國藥品生物制品檢定所,檢定所現(xiàn)有職工703人，包括各類專業(yè)技術(shù)人員576人，其中正副研究員、正副主任藥師（技師）96人