糖尿病抗體三項(xiàng)

1、糖尿病自身抗體的檢測(cè),,,概述1型糖尿?。鹤陨砻庖呦到y(tǒng)錯(cuò)誤地攻擊和損傷胰島β細(xì)胞，使胰島素的合成和分泌減少或完全缺乏的自身免疫性疾病2型糖尿?。阂砸葝u素抵抗為主伴胰島素分泌不足特發(fā)型糖尿病和妊娠糖尿病,,1、抗谷氨酸脫羧酶抗體(GAD)2、抗胰島細(xì)胞抗體(ICA)3、抗胰島素IgG抗體(IAA)意義：自身免疫性糖尿病的診斷依據(jù)，I-DM的協(xié)助診斷、預(yù)報(bào)和高危人群的預(yù)防。,抗谷氨酸脫羧酶抗體(GAD),1.檢測(cè)原理（ELISA

2、） 微孔板上包被純化GAD抗原，與患者血清標(biāo)本中的GAD特異IgG抗體發(fā)生反應(yīng)，形成GAD-抗體復(fù)合物，從微孔中洗掉過(guò)量的或未結(jié)合的血清蛋白，然后加入酶標(biāo)抗體，與之前形成的GAD-抗體復(fù)合物結(jié)合，洗掉過(guò)量的未反應(yīng)的酶偶聯(lián)物，加上底物顯色，用酶標(biāo)儀比色，顏色的強(qiáng)弱代表了患者標(biāo)本中GAD抗體的濃度。,,2.檢驗(yàn)結(jié)果的判定以3個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品（濃度分別為0.4U/ml,1.1U/ml,1.9U/ml）的濃度和測(cè)定的OD值作標(biāo)

3、準(zhǔn)曲線，通過(guò)此曲線把患者標(biāo)本的OD值轉(zhuǎn)化為濃度。,,3.結(jié)果解釋樣本GAD值判定如下：GAD值 結(jié)果1.05 陽(yáng)性1.00-1.05 臨界值,,陽(yáng)性結(jié)果說(shuō)明患者體內(nèi)有GAD抗體。陰性結(jié)果說(shuō)明患者血樣中不含或低至測(cè)不到GAD抗體的水平。臨界值時(shí)，樣本應(yīng)當(dāng)重測(cè)，如重測(cè)陰性，則結(jié)果為陰性；如重測(cè)陽(yáng)性

4、，則結(jié)果為陽(yáng)性；如仍為臨界值，則應(yīng)當(dāng)重新抽血測(cè)定。注意：盡管高濃度GAD可以產(chǎn)生高的OD值，但本方法只是半定量測(cè)試。,,4.檢測(cè)方法的局限性本實(shí)驗(yàn)室每次測(cè)定過(guò)程中帶一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品，濃度是1.1U/ml，測(cè)定結(jié)果隨時(shí)間推移會(huì)降低，可能會(huì)對(duì)患者結(jié)果有一定影響。純手工操作，會(huì)有差異（加樣、洗板等）。底物液暴光,抗胰島細(xì)胞抗體(ICA),1.檢測(cè)原理（ELISA） 微孔板上包被純化胰島細(xì)胞抗原，與患者血清標(biāo)本中的抗體發(fā)生

5、反應(yīng)，形成復(fù)合物，從微孔中洗掉過(guò)量的或未結(jié)合的血清蛋白，然后加入特異的酶標(biāo)抗體，與之前形成的復(fù)合物結(jié)合，洗掉過(guò)量的未反應(yīng)的酶偶聯(lián)物，加上底物顯色，用酶標(biāo)儀比色，顏色的強(qiáng)弱與標(biāo)本中的ICA濃度成正比。,,2.檢驗(yàn)結(jié)果的判定 每次實(shí)驗(yàn)必須將陽(yáng)性質(zhì)控、陰性質(zhì)控、參考質(zhì)控和未知樣本同時(shí)測(cè)定，以保證結(jié)果的有效性。比率值：樣本OD值S除以參考質(zhì)控OD值R,,3.結(jié)果解釋ICA比率值 結(jié)果1

6、.05 陽(yáng)性0.95-1.05 不確定（臨界）,,樣本比率值1.05，表示高水平ICA抗體比率值在0.95-1.05之間被認(rèn)為不確定，建議重新測(cè)定注意:作為有效的實(shí)驗(yàn)，N1.05 高低度的ICA可以產(chǎn)生高的OD值，但是本方法只是定性試驗(yàn)。,,4.檢測(cè)方法的局限性隨時(shí)間推移，參考質(zhì)控的值也會(huì)有變化純手工操作，會(huì)有差異（加樣、

7、洗板等）。底物液暴光,抗胰島素IgG抗體(IAA),IAA除了微孔中包被的物質(zhì)（人胰島素）與ICA不同，其他（檢驗(yàn)原理、結(jié)果判讀與解釋、影響因素等）都與ICA相同。,臨床應(yīng)用,IAA在50%的1型糖尿病患者血清中可檢出，它不是糖尿病的特異性抗體，在胰島素自身免疫綜合征,甲狀腺疾病也可出現(xiàn)，甚至有些正常人也是陽(yáng)性。 單純IAA陽(yáng)性對(duì)發(fā)展為1型糖尿病的預(yù)測(cè)價(jià)值是較低的，單純的IAA陽(yáng)性不能作為1型糖尿病的標(biāo)志，僅表明有發(fā)展為糖尿病的

8、自身免疫傾向。,臨床應(yīng)用,ICA對(duì)所有的胰島細(xì)胞均起直接作用，在70%-90%的1型糖尿病患者血清中可檢出，正常人僅0.5%可出現(xiàn)。 在新診斷出1型糖尿病的患者中陽(yáng)性率為65%～85%，隨著病程延長(zhǎng)，陽(yáng)性率逐漸降低，診斷后2～5年陽(yáng)性率降至20%。ICA陽(yáng)性患者隨病程進(jìn)展可變成ICA陰性，這種陰性提示已經(jīng)出現(xiàn)胰島細(xì)胞功能的衰竭。,臨床應(yīng)用,若患者IAA和ICA同時(shí)陽(yáng)性，其發(fā)展為1型糖尿病的風(fēng)險(xiǎn)比單獨(dú)存在任何一種抗體的個(gè)體顯著增高。,

9、臨床應(yīng)用,GAD可作為1型糖尿病預(yù)測(cè)的指標(biāo)，在初發(fā)1型糖尿病患者中，GAD的檢出率很高，一般為60%～80%，最多的可達(dá)95%，而2型糖尿病和正常人中的檢出率很低(1%～2%),臨床應(yīng)用,GAD在患者出現(xiàn)1型糖尿病臨床表現(xiàn)前數(shù)年甚至十余年即可出現(xiàn)，是最早出現(xiàn)的自身抗體 。 目前認(rèn)為GAD是破壞胰島細(xì)胞，引起1型糖尿病的關(guān)鍵抗原，并且極可能是1型糖尿病自身免疫的始動(dòng)靶抗原。,臨床應(yīng)用,GAD、ICA和IAA三種抗體是1型糖尿病自然病

10、程中β細(xì)胞功能損傷的一個(gè)預(yù)測(cè)指標(biāo) ，也是1型糖尿病與2型糖尿病相鑒別的重要免疫學(xué)標(biāo)志，對(duì)糖尿病分型和指導(dǎo)治療有重要意義。,臨床應(yīng)用,大量研究表明,一旦檢出GAD,大多伴有ICA、IAA陽(yáng)性。單獨(dú)ICA、IAA檢測(cè)陽(yáng)性率低于GAD ,若三者聯(lián)合檢測(cè),可大大提高1型糖尿病的檢出率,對(duì)于篩選高危人群可獲得很高的滿意度。 國(guó)內(nèi)外多篇統(tǒng)計(jì)資料顯示：3種自身抗體聯(lián)合檢測(cè)的敏感性、陽(yáng)性預(yù)報(bào)率和符合率均顯著高于單項(xiàng)或雙項(xiàng)測(cè)定，避免漏診。,小結(jié)