唐氏篩查報告修改

1、染色體遺傳病的產(chǎn)前篩查,蒙自市人民醫(yī)院檢驗科張莉輝,,,什么是血清學產(chǎn)前篩查,通過簡便、經(jīng)濟和較少創(chuàng)傷的檢測方法，從孕婦群體中發(fā)現(xiàn)某些懷疑有先天畸形和遺傳性疾病胎兒的高危孕婦，以便進一步明確診斷。其中對母血清中的特異性標志物進行篩查的方法，稱為母血清產(chǎn)前篩查(Maternal Serum Screening,MSS)。通過該項檢測可以篩查出21三體、18三體、神經(jīng)管缺陷畸形兒，由于主要篩查21三體(唐氏綜合征)，又稱唐氏綜合征篩查。,

2、血清學產(chǎn)前篩查 目標疾?。?1)    唐氏綜合癥(21三體) 2)    開放性脊柱裂 3）愛德華綜合癥(18三體) 標志物： 甲胎蛋白（AFP） 人絨毛膜促性腺激素（總hCG 、游離-βhCG） 游離雌三醇（ uE3) 抑制素A(InhibinA )

3、 以上四項為中孕唐篩四聯(lián)檢,什么是唐氏綜合癥？,唐氏綜合癥就是21三體綜合征，通俗說就是第21對染色體比正常人多出一條，也稱作先天愚型、伸舌樣癡呆等。簡稱DS。因染色體異常，涉及許多基因，臨床表現(xiàn)為多器官，多系統(tǒng)異常，故稱之為“綜合征”,臨床表現(xiàn),明顯智力障礙是本癥最嚴重和突出的表現(xiàn)特殊面容：小頭，小眼、寬眼距，低鼻梁，小耳。張口、流涎、伸舌發(fā)育遲緩：囪門大而遲閉，四肢短，聽覺差重要臟器畸形：50%有先天

4、性心臟病，性發(fā)育障礙，白血病發(fā)病率增加50%皮膚紋理特殊變化：50%為通貫手。拇趾和第二趾間距寬大,為什么要篩查唐氏癥？,唐氏癥患兒不僅體貌異常、智力低下，而且疾病繁多、壽命短暫。并且相對于18-三體和神經(jīng)管缺陷患兒來說，唐氏兒的存活率較高。除患者自身痛苦外，也給家庭帶來極大的精神、經(jīng)濟負擔和社會負擔。目前還無法預防，更無法治療，唯一有效的方法是進行產(chǎn)前篩查，明確診斷后，終止妊娠，防止唐氏兒的出生。,唐氏癥的產(chǎn)前篩查不僅是一個醫(yī)學問題

5、，也是一個社會問題；不僅有助于家庭，也有助于國家。,常見新生兒先天疾病,1:3800,1:58000,1:10000,1:700,哪些孕婦需要進行產(chǎn)前篩查,隨著孕婦年齡的增長，妊娠唐氏兒的風險率也隨之增高。當孕婦年齡>35歲以后，唐氏癥的出生率明顯增高。,不同年齡孕婦占總妊娠的百分率和唐氏癥兒的出生比例,孕齡與唐氏癥兒出生風險率,哪些孕婦需進行產(chǎn)前篩查,需要提及的是：雖然孕齡>35歲以后，唐氏癥的出生率明顯增高，但總出生量

6、只占不到30%，其余70%多均為34歲以下的孕婦所生。并且唐氏綜合征的發(fā)生是完全隨機的，每一個孕婦都面臨生育唐氏綜合征孩子的風險。應該對所有孕婦進行篩查,無創(chuàng)DNA的到來是否可以完全替代傳統(tǒng)唐篩,無創(chuàng)DNA技術：通過采集5 ml孕婦外周血，提取其中游離DNA采用第二代高通量測序技術進行測序，通過生物信息分析，得出胎兒患“染色體非整倍體”的風險率，統(tǒng)稱為NIPT。無創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測對唐氏綜合征的漏檢率只有2%左右，而特異性達到99%

7、左右的水平 。,NIPT與傳統(tǒng)唐氏篩查的對比,,NIPT的唐氏檢出率可以高達99%，為什么不干脆用“無創(chuàng)”取代血清學“唐篩”呢？,一、首先NIPT并不是萬能的，無創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測與唐氏篩查都是用于預防唐氏綜合征的產(chǎn)前篩查檢測 。當NIPT篩查結果提示高風險時，同樣需要進行羊穿做產(chǎn)前診斷，所以并不是一勞永逸的。二、NIPT主要是針對“染色體非整倍體”的檢查，像（21-三體、18-三體、13-三體）綜合征，而神經(jīng)管缺陷是無法篩查到的。但是

8、傳統(tǒng)唐篩可以篩查到，盡管特異性不高，但是可以為臨床醫(yī)生做一個預警。,NIPT的唐氏檢出率可以高達99%，為什么不干脆用“無創(chuàng)”取代血清學“唐篩”呢？,三、NIPT的檢測方法復雜，需要的時間長，檢測需要的設備價格昂貴，檢測費用也比較貴，大約是“唐篩”的10倍。因此無論是從技術上還是從費用上講，無法普遍推廣 。,血清學唐氏篩查的優(yōu)點,--- 非侵入性檢測--- 不需羊水穿刺--- 經(jīng)濟、簡便可行--- 對35歲以上的孕婦提供信心--

9、- 對35歲以下的孕婦進行危險預測--- 增加患者的選擇,如何篩查唐氏征兒？,產(chǎn)前篩查環(huán)節(jié),五步曲,,,臨床信息采集,標本采集和轉運,,生化檢測,,數(shù)據(jù)標化,,風險計算,◆臨床信息采集,年齡、體重、種族、吸煙、糖尿病 史、妊娠方式（母血清篩查的干擾因素）...信息要準確 胎兒B超測量值估算孕齡,,,◆臨床信息采集,糖尿?。阂葝u素依賴性糖尿病輕度降低uE3和hCG水平；母親吸煙

10、AFP升高約3%，分別降低uE3和hCG水平的3%和23%；,體重：母體重升高因稀釋的原因會降低生化指標的結果； 人種：黑種人AFP比白種人和黃種人略高；,◆臨床信息采集,體外受精者與自然妊娠者相比血清hCG明顯身高而AFP明顯降低高血壓：會導致抑制素A增高,,,,母親體重校正曲線,重量(lbs),MoM,MSuE3,MShCG,MSAFP,胎兒B超測量值估算孕周,妊娠周齡,當BPD和LMP兩種方法計算誤

11、差超過10天的，則以BPD為準；不足10天的兩法皆可。當CRL和LMP兩種方法計算誤差超過5天的，則以CRL為準；不足5天的兩法皆可。,末次月經(jīng)時間(LMP)超聲波檢查胎兒雙頂骨間徑(BPD)或頭臀長（CRL),胎兒B超測量值估算孕齡,例：年齡和MOM值29.0/1.03/2.46/1.60,孕周19周1天BPD，三聯(lián)風險1:15537該標本第一次二聯(lián)篩查時是1:50左右較高的高風險分析：該孕婦有21周2天的LMP孕周，如果

12、使用該孕周MOM變?yōu)?.77/2.92/1.04，風險1:302，高風險結果，孕周差了15天，風險差別50倍（差異69%）,△懷有雙胞胎的孕婦生出唐氏寶寶的概率增加；當孕婦懷有雙胎時AFP中位數(shù)數(shù)值比正常單胎妊娠者高一倍左右，而其他生化指標略低于一倍；雙胎的風險值計算，根據(jù)目前現(xiàn)有技術，采取以B超檢測出雙胎中BPD或CRL數(shù)值較大者參與計算,,胎兒B超測量值估算孕齡,◆標本采集與保存取靜脈血2-3ml于室溫放置40分鐘至1小時待

13、血液完全凝集后2000rpm離心10分鐘分離血清，血清用一次性吸管轉入血清管中血清管蓋須擰緊防止血清漏出。血清標本可在2-8℃溫度下保存一般不超過6天，如檢測時間超過7天則置-20℃冰箱保存，-20℃以下保存不超過3月，長期保存應在-70℃避免反復凍融。外來標本在運輸過程中要避免高溫<37 ℃,◆生化檢測,,唐氏綜合癥母血中AFP、?-hCG、uE3、InhibinA的變化原理,生化檢測質量控制(實驗室質量控制),規(guī)范的設

14、備、試劑合理的實驗室人員配置規(guī)范的實驗室操作程序書面的實驗記錄過程和結果對每次實驗檢測結果的審查、評估正確的風險率計算室間質量評價,生化檢測質量控制(實驗室質量控制),,實驗室檢測的質量控制-誤差來源實驗室操作是否規(guī)范數(shù)據(jù)處理算法是否準確儀器測量誤差大小標本采集、保存運輸?shù)目煽啃詷吮拘畔?shù)據(jù)的準確及可靠性,生化檢測質量控制(實驗室質量控制),充足的硬件配備設備空間輔助設施建立嚴格全面的實驗室標準操作程序文件SOP

15、并認真落實加強實驗室人員的再培訓和資格認定長期嚴格開展室內(nèi)質控活動參加全國的室間質評活動定期評估篩查的效果,生化檢測質量控制(室內(nèi)質控),1、在實驗室日常常規(guī)工作的基礎上進行以監(jiān)測系統(tǒng)的穩(wěn)定性2、通過使用質控品確立質控標準間接評價檢驗結果的精 密度3、嚴格遵守設備和試劑廠家對質控的要求4、質控品必須與患者標本同樣條件檢測5、在報告結果前質控品結果必須達到實驗室設定的接受標準,數(shù)據(jù)標化,1、孕齡標化：個體標志物測定值

16、與相同孕周正常孕婦該標志物的中位數(shù)之比AFP中位值15w 30ng/mlAFP中位值20w 70ng/mlAFP測量值為 30ng/ml的孕齡標化：MOM(孕15w)=30/30=1.0MOM(孕20w)=30/70=0.43,2、體重標化個體標志物經(jīng)孕齡標化后的MOM值與相同體重正常孕婦該標志物的中位數(shù)之比AFP孕齡標化后MOM中值50kg 1.

17、10AFP孕齡標化后MOM中值70kg 0.9AFP MOM值為1.10的體重標化：校正MOM（50kg）=1.10/1.10=1.0校正MOM（70kg）=1.10/0.9=1.2,3、標志物測定的標化MOM值=測定值/該組測定值的中位數(shù)（孕周、體重、種種......）,風險值計算R=年齡風險*標志物風險以孕婦年齡和孕婦外周標志物水平共同計算DS妊娠風險,1. AFP下降原因,A

18、FP和白蛋白是胎兒血液的正常蛋白成分，主要由胎兒肝臟合成，通過被動轉運方式向羊水和母血中傳遞。正常孕婦血中的AFP會隨著胎兒的發(fā)育而逐步增高。唐氏癥兒由于肝臟發(fā)育不全，AFP合成減少，所以母血中含量相應減少。,0.2 0.23 0.5 0.7 1.0 1.5 2 4

19、 AFP(MoM),唐氏綜合癥,正常,母血AFP正常人群和唐氏癥人群分布曲線,2. uE3水平下降原因,妊娠期游離雌三醇主要由胎兒-胎盤單位合成，由于胎兒的腎上腺皮質發(fā)育不良，導致uE3的前體---硫酸脫氫表雄酮的合成減少，從而使uE3減少。,0.1 0.5 1.0

20、 2.0MSuE3(MoM),唐氏綜合癥,正常,母血uE3正常人群和唐氏癥人群分布曲線,3. hCG水平升高原因,HCG是由胎盤滋養(yǎng)葉細胞合成和分泌。在懷孕第二孕季或中期妊娠(15-20周，即唐氏癥的篩查時間段)，正常孕婦的血中HCG水平已下降為維持量而唐氏癥兒的胎盤成熟較正常胎兒為晚，有可能仍停留在胚胎發(fā)育初期，所以HCG水平升高,正常,唐氏綜合癥,0.1 0.2

21、 0.5 1.0 2.0 5.0 10 MShCG(MoM),母血HCG正常人群和唐氏癥人群分布曲線,4、妊娠時母體血清中的大量抑制素被認為來源于胎盤的合體滋養(yǎng)層，抑制素-A在孕10～12周時增加并達到高峰，在妊娠中期下降成一個平臺，但到妊娠晚期時

22、再一次升高，足月時達最高水平。,,Inhibin隨孕周變化呈淺U型。,妊娠15周-21周+6天周時抽血5mL,測定InhibinAAFP，HCG，uE3,將孕婦的基本資料填寫在申請單上,ONTD危險度,電腦算出唐氏癥的合并危險度,懷疑ONTD做胎兒超聲波檢查,,,,,,,,唐氏癥兒篩查流程圖,待續(xù),唐氏癥危險度>1/380或≥1000,唐氏癥危險度<1:1000,以超聲波確認孕周,發(fā)陰性報告并追蹤妊娠結果及由新生兒科醫(yī)師來