檢測系統分析性能驗證及確認

1、檢測系統分析性能驗證及確認,宋鑒清,------《論語·衛(wèi)靈公》,檢測系統：是指完成一個檢驗項目所涉及的儀器、試劑、校準品、操作程序、質控品、樣品、質量控制、保養(yǎng)計劃、操作者等的組合。檢測系統的用途：為患者提供準確的檢驗結果。,,要記?。簡螁我粋€試劑盒上的所謂分析性能，一定不就是試劑盒的！因為只有試劑沒有儀器的合作，就沒有這些分析性能！同樣，儀器廠商宣傳的那些分析性能一定是在該儀器上使用了某個廠商的試劑盒才具有的！

2、因此所有的分析性能一定是一個檢測系統的！不是試劑盒的、也不是某個儀器的！,常見檢測系統,配套檢測系統-性能驗證： A+A+A 封閉系統 A+B+B 配套開放系統自建檢測系統-性能確認： A+B+C 非配套開放系統,LDH 乳酸脫氫酶性能特征(羅氏)-1,LDH 乳酸脫氫酶性能特征(羅氏)-2,ISO 15189認可準則的要求,CNAS CL02：2012 5.5.1.3,性能驗證與確認的區(qū)別,性能驗證項目的選擇（一）

3、,5.5檢驗方法和程序的分析性能驗證內容至少應包括正確度、精密度和可報告范圍。 CNAS-CL38：2012《醫(yī)學實驗室質量和能力認可準則在臨床化學檢驗領域的應用說明》,5.5檢驗方法和程序的分析性能驗證內容至少應包括：檢出限，精密度（包括重復性和中間精密度）、符合率，并 應明確檢驗項目的預期用途，如篩查、診斷、確認。CNAS-CL39：2012《醫(yī)學實驗室質量和能力認可準則在臨床免疫學檢驗領域的應用說明》,性能驗證項目的選擇（

4、二）,5.5尿液干化學分析儀性能驗證的內容至少應包括陰性和陽性符合率CNAS-CL41：2012《醫(yī)學實驗室質量和能力認可準則在體液學檢驗領域的應用說明》,5.5血液分析儀的性能驗證內容至少應包括正確度、精密度、可報告范圍等。CNAS-CL43：2012《醫(yī)學實驗室質量和能力認可準則在臨床血液學檢驗領域的應用說明》,WS/T 403-2012《臨床生物化學檢驗常規(guī)項目分析質量指標》WS/T 406-2012《臨床血液學檢驗常規(guī)

5、項目分析質量要求》WS/T 408-2012《臨床化學設備線性評價指南》WS/T 492-2016《臨床檢驗定量測定項目精密度與正確度性能驗證》,EP5-A3 .Evaluation of precision of quantitative measurement procedures; approved guideline-third edition. 2014 EP15-A3. User verification of pr

6、ecision and estimation of bias；approved guideline-third edition.2014EP9-A2. Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples;Approved Guideline—Second Edition EP6 A. Evaluation of the Linearity of Quantita

7、tive Measurement rocedures:A Statistical Approach; Approved GuidelineEP10 A2. Preliminary Evaluation of Quantitive Clinical of Laboratory Methods; Approved Guideline—Second Edition.,性能驗證相關的基本概念,精密度（precision）:在規(guī)定的條件下，

8、對同一或類似被測對象重復測量所得示指或測得值間的一致程度。精密度的度量通常以不精密度（SD、方差或CV）表示。批（Run）：在檢測系統真實性和精密度穩(wěn)定的間隔期，一般不超過24小時或不少于2小時。正確度(trueness)：無窮多次重復測量所得量值的平均值與一個參考量值間的一致程度。與系統測量誤差有關，與隨機測量誤差無關，以偏倚（Bias）表示。準確度(accuracy)：單次檢測結果與參考值間的一致程度，以總誤差（TE）表

9、示。,性能驗證相關的基本概念,線性（linearity）：檢測樣本時，在一定范圍內可以直接按比例關系得出分析物含量的能力?？傉`差(total error)：實驗室用某方法在多次獨立檢測中分析某樣品所得各個結果值與靶值之差在一定置信區(qū)間內的最大允許范圍。靈敏度(analytical sensitivity)：校準曲線的斜率，即對于規(guī)定量的變化分析程序產生信號的變化。檢測限(detection limit)：分析程序具有適當的確

10、定檢出的分析物的最小濃度或量。檢測限依賴于空白讀數大小。,性能驗證的實施過程,對檢驗程序的性能驗證涉及到多方面工作，為了得到可靠結果，實驗室負責人或實驗主持人應對此項工作有一個概括了解，先制定一個方案，包括如下工作： 1、性能驗證項目的選擇、質量目標確定、性能驗證方案制定及實施工作計劃； 2、實驗前準備（人員培訓、儀器維護及校準、樣本留取及制備）； 3、實驗操作、數據收集、處理； 4、結論。,分析質量指標的確定

11、,分析質量指標（analytical quality specifications）;又稱質量目標（quality goals）、質量規(guī)范（quality specification）、質量標準（quality standards）和分析性能目標（analytical performance goals）。判斷臨床檢驗結果精密度、正確度和準確度水平高低的指標，或臨床檢驗結果應達到的精密度、正確度和準確度要求，通常用不精密度、偏倚和

12、總誤差來表示。,設定質量目標的層次模式和方法,,質量目標,精密度驗證,采用2個濃度的質控物，每天分析1個批次，每個濃度重復檢測4次，連續(xù)5天。數據經過離群值檢驗，收集2×20=40個有效數據，并通過統計分析評價方法計算總精密度和批內精密度，與允許范圍進行比較，判斷結果是否接受。將估計的批內精密度和室內精密度與本室規(guī)定的相應的允許范圍(CV批內<1/4總允許誤差，CV總<行業(yè)標準)比較，判斷驗證是否通（同時參考C

13、LIA規(guī)定的TEa、廠商聲明）。 ——參考《臨床檢驗方法學評價》EP15-A2WS/T 492-2016,,臨床血液學,批內精密度 試驗方案批內精密度以連續(xù)檢測結果的變異系數為評價指標，使用1份正常濃度水平的臨床標本，按常規(guī)方法重復檢測11次，計算后10次的算術平均值、標準差及變異系數，與允許的變異系數進行比較，判斷結果是否接受?！?/p>

14、參考WS/T 406-2012《臨床血液學檢驗常規(guī)項目分析質量要求》）,日間精密度 試驗方案日間精密度以室內質控在控結果的變異系數為評價指標，使用Sysmex配套質控品（低值、中值、高值）當前批號累積的變異系數，與允許的變異系數進行比較，判斷結果是否接受。——（參考WS/T 406-2012《臨床血液學檢驗常規(guī)項目分析質量要求》）,臨床血液學,

15、,臨床案例1,臨床案例1,臨床案例1,鈣更換試劑,A試劑,B試劑,正確度驗證,WS/T 406-2012《臨床血液學檢驗常規(guī)項目分析質量要求》WS/T 492-2016《臨床檢驗定量項目精密度與正確度性能驗證》EP9-A3:Measurement procedure comparison and bias estimation using patient samples; approved guideline- third e

16、dition. 2013EP9-A2：Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples; Approved Guideline - Second Edition，2002EP15-A2：User Verification of Performance for Precision and Trueness ,2005EP15-A3. User verific

17、ation of precision and estimation of bias；approved guideline-third edition.2014,臨床血液學,1試驗過程1.1 樣本的準備選取10份檢測結果在參考區(qū)間內的新鮮臨床樣本。1.2 試驗步驟 ① 10份標本分別在該儀器上檢測2次，記錄各項目20次檢測結果，計算均值；② 相同樣本在臨檢室標準儀器（J-3001-LJ）上同樣檢測2次，記錄各項目20次檢測結果，

18、計算均值，設為靶值；③ 該儀器檢測結果均值與靶值計算偏倚。1.3 質量控制 整個試驗階段檢測儀器狀態(tài)正常，各批次質控結果均符合要求。2 試驗數據分析 各試驗數據的統計分析方法參考《臨床血液學檢驗常規(guī)項目分析質量要求》。3 試驗結果的判定標準各項目的偏倚應符合表6的要求。,,,正確度初步評價 先用5個定值PT樣品進行正確度初步評價，每個樣品測量1次，計算5個樣品與靶值之間的平均偏倚，若≤允許偏差（衛(wèi)生行

19、業(yè)標準）初步評價通過，直接進行正確度確認；若不通過則進行校準，初步評價通過后再進行正確度確認。,,,,,,,,,,,檢測PT樣品5份，每個樣品重復測量3次，計算每個樣品均值與靶值的相對偏倚；檢測參考方法定值的新鮮血清樣品5份，每個樣品重復測量3次，計算每個樣品重復測量的均值與靶值的相對偏倚；用實驗方法和參考方法同時檢測40份新鮮樣品，每天測量10個樣品，每個樣品測量1次，連續(xù)4天。以參考方法結果為橫座標X，實驗方法為縱座標Y，繪制散

20、點圖，計算回歸方程，計算參考區(qū)間兩端和醫(yī)學決定水平處的相對偏倚。 （--EP9-A3）偏倚≤允許偏差，正確度得到確認。,確認實驗方法,有證參考物質（CRMs）：已用參考方法或決定性方法定值，可從美國國家標準局（NIST）或其他國際組織認可的提供者獲得;從能力驗證試驗（PT）中獲得的參考物：如CAP和衛(wèi)生部檢驗中心能力驗證試驗中提供的調查品;廠商提供的正確度

21、確認物或質控物;室間質量評價計劃中使用的質控物;由第三方提供的已用不同方法定值的物質。,定值參考物質檢測的回收實驗,比 對,試驗方案收集樣本20份，其濃度應均勻分布整個分析測量范圍。采用試驗方法和比較方法分別檢測20份樣本，試驗持續(xù)4天，每天測定5份樣本。每種方法對于每個樣本重復測定2次，將樣本按1、2、3、4、5的順序進行第一次測定，再按反向順序測定第二次。順序中的樣本濃度盡量隨機排列。其測定結果經過方法內、方法間離群值檢驗，

22、X值合適范圍檢驗，離散度均勻性檢查等步驟，繪制散點圖，粗略分析方法間是否呈線性關系。通過線性回歸分析估計在醫(yī)學決定水平處的預期偏倚的95%可信區(qū)間大?。换蛘呷鐢祿x散度均勻，可計算各濃度的平均偏倚及平均百分比偏倚大小。將兩種偏倚與偏倚的允許范圍進行比較以判定是否符合要求。——參考《臨床檢驗方法學評價》EP9-A2WS/T 407-2012 醫(yī)療機構內定量檢驗結果的可比性驗證指南,方法內離群值檢驗,方法間離群值檢驗,X值合適范圍

23、的檢驗,,,CNAS-CL38：2012《醫(yī)學實驗室質量和能力認可準則在臨床化學檢驗領域的應用說明》,質控數據比對分析,臨床案例2,臨床案例2,,,臨床案例2,,,臨床案例2,,,,臨床案例2,,,,臨床案例2,,,,臨床案例2,,可報告范圍,臨床可報告范圍,,分析測量范圍,線性評價方法,目測法:主觀、粗略、不能確定每個點的線性程度；改良Doumas方法（平均斜率法）； CAP設備委員會（IRC）采用的多項式回歸分析方法(CAP-I

24、RC法)；CLSI EP-6A法（定量檢驗方法的線性評價）。,樣本來源,病人標本；低濃度的標本（或推薦的稀釋液）稀釋高濃度標本；病人樣本中添加分析物（如CaCl2、Glu)、加入量原則上少于總體積的10%；商業(yè)質控物/校準物/線性驗證物質。,,線性：0.11-41.6,6.84,19.85,,,？？？,6.84,19.85,平均斜率法評價分析測量范圍（改良Doumas方法）,試驗方案選取接近儀器標注的分析測量范圍上限（其樣本

25、濃度不低于標定分析范圍上限的85%）和下限的兩個分析濃度的樣本(H和L)，按照1L、0.8L＋0.2H、0.6L+0.4H、0.4L+0.6H、0.2L+0.8H、1H的比例關系配制6個系列濃度的樣本。對每個混合樣本進行多次(至少2次)檢測。經統計后擬合回歸線y＝bx+a。試驗結果的判定標準將擬合回歸線的相關系數r≥0.975（r2≥0.95），b值在1±0.05范圍作為判斷標準?！糠謪⒖肌杜R床檢驗質量管理技術基

26、礎》（馮仁豐）、EP6,,CLSI EP-6A法（定量檢驗方法的線性評價）,花絮,尿液線性驗證：細菌血白細胞(高值樣品)-濃縮尿紅細胞,,,,,,,,,,,,,可視化管理,Visual Management,5S,精益Lean,單件流1 PieceFlow,標準工作Standard Work,拉動系統Pull,制造拉動式生產Create signals to pull on demand, obvious when so

27、mething is very empty,減少差異和 復雜性Reduce variation &complexity,邁向單件處理 Move away from batching, backlog and queue,能夠看到 Ability to see,維持流動Organized to Flow:1.整理2.整頓3.清掃4.清潔5.素養(yǎng),精益化性能驗證-單件流:線性驗證，高值樣品？？,設備性能評估-1,設