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1、,,,,Chapter 4,血液分析儀檢驗(yàn),黃 輝13594135402 huanghui@tmmu.edu.cn,,血液分析儀,采用血液分析儀對某標(biāo)本進(jìn)行檢測,得到如下結(jié)果:RBC 3.8×1012/L;WBC 10.8×109/L,HB 102g/L,PLT 32×109/L,GRAN 42%, LYM 25%, MID 33%,請問:,病例分析,1.該檢驗(yàn)結(jié)果可以直接發(fā)出嗎? 2.如果不能
2、發(fā)出,應(yīng)對標(biāo)本進(jìn)行如何處理?,一、血液分析儀概述,1948年提出Coulter原理,1953年第一臺血液分析儀,1975年血小板計(jì)數(shù)功能,1985年白細(xì)胞分類,,……,一、血液分析儀概述,一、血液分析儀概述,一、血液分析儀概述,血液分析儀分類,三分群血液分析儀,五分類血液分析儀,,,血液分析儀功能,一、血液分析儀概述,一、血液分析儀概述,血液分析儀功能,,一、血液分析儀概述,,檢測參數(shù)增多多功能擴(kuò)展檢測速度提高應(yīng)用更加方便,一、血
3、液分析儀概述,血液分析儀發(fā)展趨勢,庫爾特原理:懸浮在電解質(zhì)溶液中的血細(xì)胞相對于電解質(zhì)溶液為非導(dǎo)電顆粒,在通過計(jì)數(shù)小孔時可引起電阻的變化,從而實(shí)現(xiàn)對細(xì)胞計(jì)數(shù)和分群。分光光度原理:測定血紅蛋白。,二、電阻抗型血液分析儀,principle of electrical impedance,Coulter principle,二、三分群血液分析儀工作原理及應(yīng)用,檢測原理,Coulter principle,二、電阻抗型血液分析儀,檢測原理,二
4、、三分群血液分析儀工作原理及應(yīng)用,Coulter principle,二、電阻抗型血液分析儀,檢測原理,二、三分群血液分析儀工作原理及應(yīng)用,如何設(shè)計(jì)血液分析儀工作流程,在設(shè)計(jì)過程中我們應(yīng)該注意哪些問題?,二、三分群血液分析儀工作原理及應(yīng)用,血液標(biāo)本,,,1:50000,1:500,RBC/PLT,WBCHb,,,,,PLT,3~30fl,>30fl,RBC,,PDWMPVPCT,,RDWMCVHct,,溶血劑,,Hb,,H
5、b量,,,MCH,,MCHC,,WBC,,,,,,大細(xì)胞區(qū),中間細(xì)胞區(qū),小細(xì)胞區(qū),脈沖,,,脈沖,這種工作流程設(shè)計(jì)還存在什么問題?,,二、三分群血液分析儀工作原理及應(yīng)用,血細(xì)胞直方圖,橫坐標(biāo):細(xì)胞的相對體積 或者溶血素作用 后細(xì)胞的相對體積;縱坐標(biāo):細(xì)胞的相對數(shù)目。,白細(xì)胞直方圖、紅細(xì)胞直方圖、血小板直方圖,二、三分群血液分析儀工作原理及應(yīng)用,小細(xì)胞區(qū):淋巴細(xì)胞 大細(xì)胞區(qū):中性粒細(xì)胞中間
6、細(xì)胞區(qū):單核細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞,,,,二、電阻抗型血液分析儀,正常白細(xì)胞直方圖,二、三分群血液分析儀工作原理及應(yīng)用,小細(xì)胞區(qū):淋巴細(xì)胞 大細(xì)胞區(qū):中性粒細(xì)胞中間細(xì)胞區(qū):單核細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、幼稚細(xì)胞,,,,二、電阻抗型血液分析儀,正常白細(xì)胞直方圖,二、三分群血液分析儀工作原理及應(yīng)用,,中間細(xì)胞區(qū)域出現(xiàn)異常的峰,可能是由于白血病細(xì)胞或者嗜酸性粒細(xì)胞引起,應(yīng)加強(qiáng)鏡檢,二、電阻抗型血液分析儀,異常白細(xì)
7、胞直方圖,二、三分群血液分析儀工作原理及應(yīng)用,淋巴細(xì)胞減少,中性粒細(xì)胞增多,異常白細(xì)胞直方圖,二、三分群血液分析儀工作原理及應(yīng)用,淋巴細(xì)胞增多,中性粒細(xì)胞減少,異常白細(xì)胞直方圖,二、三分群血液分析儀工作原理及應(yīng)用,巨大血小板干擾白細(xì)胞直方圖,異常白細(xì)胞直方圖,二、三分群血液分析儀工作原理及應(yīng)用,正常紅細(xì)胞直方圖,二、三分群血液分析儀工作原理及應(yīng)用,紅細(xì)胞體積增大且大小不均,異常紅細(xì)胞直方圖,二、三分群血液分析儀工作原理及應(yīng)用,此峰是由于
8、治療得當(dāng)引起的,,病人出現(xiàn)巨幼細(xì)胞性貧血時,MCV較大形成右移的RBC峰,二、電阻抗型血液分析儀,異常紅細(xì)胞直方圖,二、三分群血液分析儀工作原理及應(yīng)用,由PLT結(jié)果較高引起,由WBC計(jì)數(shù)較高引起,二、電阻抗型血液分析儀,異常紅細(xì)胞直方圖,二、三分群血液分析儀工作原理及應(yīng)用,病例分析,某戰(zhàn)士,男,頭昏乏力半年有余。體檢:貧血貌、反甲癥。檢驗(yàn):Hb 86g/L,紅細(xì)胞直方圖如下所示,糞便有鉤蟲卵。①該戰(zhàn)士最可能的診斷②血常規(guī)中哪些參數(shù)對
9、 診斷該疾病有重要意義③需要進(jìn)行的進(jìn)一步實(shí)驗(yàn) 室檢查,二、三分群血液分析儀工作原理及應(yīng)用,正常血小板直方圖,二、三分群血液分析儀工作原理及應(yīng)用,異常血小板直方圖,血小板體積增大,二、三分群血液分析儀工作原理及應(yīng)用,血紅蛋白測定,分光光度法測定:Lambert-Beer定律儀器組成:單色光源、檢測池、比色容器和光檢測器常用的溶血劑:改良的氰化高鐵血紅蛋白溶血劑、非氰化高鐵血紅蛋白溶血劑(SLS-月桂酰硫酸鈉),二、三分群血液
10、分析儀工作原理及應(yīng)用,檢測結(jié)果超出實(shí)驗(yàn)室設(shè)定的檢測項(xiàng)目參考值、復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)、臨床疾病標(biāo)本異常和患者人群變異報警意味著檢測結(jié)果直接向臨床報告的可靠性明顯降低,血液分析儀報警,二、三分群血液分析儀工作原理及應(yīng)用,白細(xì)胞,有核紅細(xì)胞,網(wǎng)織紅細(xì)胞,三、血液分析儀研究進(jìn)展,白細(xì)胞檢測研究進(jìn)展,體積電導(dǎo)和光散射法流式細(xì)胞術(shù)、電阻抗、射頻和特殊細(xì)胞染色法鎢光源、激光散射法多角度偏振光散射法……,三、血液分析儀研究進(jìn)展,體積電導(dǎo)和光散射法,體積:
11、Volume,應(yīng)用電阻抗測定細(xì)胞體積;電導(dǎo):Conductivity,高頻電流能通過細(xì)胞膜,測定細(xì)胞的導(dǎo)電性,提供細(xì)胞內(nèi)部化學(xué)成分、核質(zhì)比與顆粒的大小數(shù)量等特征;光散射:Scatter,應(yīng)用光散射技術(shù)檢測細(xì)胞內(nèi)的顆粒性、核分葉性和細(xì)胞表面結(jié)構(gòu)。,三、血液分析儀研究進(jìn)展,射頻電導(dǎo)檢測技術(shù),體積電導(dǎo)和光散射法,三、血液分析儀研究進(jìn)展,光散射檢測技術(shù),體積電導(dǎo)和光散射法,三、血液分析儀研究進(jìn)展,光散射檢測技術(shù),體積電導(dǎo)和光散射法,三、血液
12、分析儀研究進(jìn)展,體積電導(dǎo)和光散射法,三、血液分析儀研究進(jìn)展,核酸熒光染料使細(xì)胞核著色;堿性溶血劑破壞其他細(xì)胞,保留嗜堿性粒細(xì)胞;用硫化氨基酸檢測未成熟粒細(xì)胞信息。,流式細(xì)胞術(shù)、電阻抗、射頻和特殊細(xì)胞染色法,三、血液分析儀研究進(jìn)展,流式細(xì)胞術(shù)、電阻抗、射頻和特殊細(xì)胞染色法,三、血液分析儀研究進(jìn)展,過氧化物酶染色,嗜酸性粒細(xì)胞最強(qiáng),淋巴細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞無過氧化物酶活性;含苯二酸和強(qiáng)酸性表面活性劑稀釋液破壞紅細(xì)胞與血小板,除嗜堿性粒細(xì)
13、胞外,其他所有白細(xì)胞僅剩裸核。,鎢光源、激光散射法,三、血液分析儀研究進(jìn)展,POX散點(diǎn)圖 1.噪聲 2.有核紅細(xì)胞 3.血小板 4.淋巴與嗜堿性粒細(xì)胞 5.大的為染色細(xì)胞 6.單核細(xì)胞 7.中性粒細(xì)胞 8.嗜酸性粒細(xì)胞,鎢光源、激光散射法,三、血液分析儀研究進(jìn)展,應(yīng)用固體激光流式細(xì)胞熒光檢測技術(shù),多角度檢測白細(xì)胞和分類;染料碘化丙啶破壞有核紅細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì),只留下細(xì)胞核,而對有活性的白細(xì)胞有極小滲透性或無滲透性,從而不出現(xiàn)細(xì)胞核染色。
14、,多角度偏振光散射法,三、血液分析儀研究進(jìn)展,多角度偏振光散射法,0° 細(xì)胞大小 和數(shù)量7° 細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)、核染色質(zhì)的復(fù)雜性90° 細(xì)胞內(nèi)部顆粒及分葉狀況90°D 嗜酸性粒細(xì)胞可去偏振光,三、血液分析儀研究進(jìn)展,多角度偏振光散射法,三、血液分析儀研究進(jìn)展,多角度偏振光散射法,三、血液分析儀研究進(jìn)展,網(wǎng)織紅細(xì)胞研究進(jìn)展,非熒光染料染色法:新亞甲藍(lán)、綠唑黑E。熒光染料染色法
15、:非對稱箐、噻唑橙、聚亞甲藍(lán)等。,三、血液分析儀研究進(jìn)展,網(wǎng)織紅細(xì)胞研究進(jìn)展,Ret%、Ret #MRV、MCVrHFR、MFR、LFR,三、血液分析儀研究進(jìn)展,有核紅細(xì)胞研究進(jìn)展,VCS法流式激光/熒光染色法,三、血液分析儀研究進(jìn)展,精密度高、相對準(zhǔn)確度好工作效率:快管理自動化程度:強(qiáng)質(zhì)量管理即時化、信息處理自動化,五、血液分析儀的性能評價,血液分析儀優(yōu)點(diǎn),四、血液分析儀優(yōu)缺點(diǎn)及性能評價,血液分析儀對白細(xì)胞分類是建立在體積
16、大小和細(xì)胞表面或內(nèi)部結(jié)構(gòu)的光學(xué)性能上,與傳統(tǒng)顯微鏡檢查識別不同。血液分析儀只能主要用作健康篩檢,尚不能完全代替顯微鏡檢查!,血液分析儀缺點(diǎn),四、血液分析儀優(yōu)缺點(diǎn)及性能評價,,性能評價,,稀釋效應(yīng):稀釋度和變量之間的線性范圍精密度:批內(nèi)、批間精密度和總精密度攜帶污染率,四、血液分析儀優(yōu)缺點(diǎn)及性能評價,,可比性:儀器檢測結(jié)果與使用常規(guī)程序檢測結(jié)果達(dá)到一致性的能力準(zhǔn)確性:測定值與真值之間的一致性儀器對異常標(biāo)本和干擾物的靈敏度,性能評
17、價,四、血液分析儀優(yōu)缺點(diǎn)及性能評價,2002年,Berend Houwen發(fā)起研究關(guān)于血液分析儀全血細(xì)胞計(jì)數(shù)和白細(xì)胞分類的顯微鏡復(fù)檢規(guī)則。2005年,國際血液學(xué)組織提出了顯微鏡復(fù)檢的41條建議性標(biāo)準(zhǔn)。,五、血液分析儀顯微鏡復(fù)查規(guī)則,WBC PDW RBC
18、 PCT HGB HDWHCT RETMCV
19、HFRMCH MFRMCHC LFRRDW MPV PLT,血液分析儀常用的檢測指標(biāo),Thank
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