藥品檢驗(yàn)基礎(chǔ)知識(shí)化學(xué)部分講座

1、藥品檢驗(yàn)基礎(chǔ)知識(shí)（化學(xué)部分）講座,XX市食品藥品檢驗(yàn)所 2012.07,講座內(nèi)容,（一）藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（二）藥品檢驗(yàn)常用的分析方法 (三）容量分析法（四）儀器分析法（五）滴定液（標(biāo)準(zhǔn)溶液）,（一）藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 《中國(guó)藥典》—藥典會(huì)頒布，2010年版（第九版） 第一版（1953年）；第二版（1963年） 第三版（1977年）；第四版（1985年）

2、 第五版（1990年）；第六版（1995年） 第七版（2000年）；第八版（2005年）,（一）藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 部頒標(biāo)準(zhǔn)—原衛(wèi)生部和現(xiàn)（食）藥監(jiān)局頒布 衛(wèi)生部部頒標(biāo)準(zhǔn)（包括醫(yī)院制劑規(guī)范） 《國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)》新藥轉(zhuǎn)正標(biāo)準(zhǔn) 《國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)》地標(biāo)升國(guó)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn) 進(jìn)口藥品注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn) 補(bǔ)充檢驗(yàn)方法,（一）藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),地方標(biāo)準(zhǔn) 省級(jí)（食）

3、藥監(jiān)局頒布的標(biāo)準(zhǔn) 主要是補(bǔ)充的醫(yī)院制劑品種 只在本地區(qū)有效,（一）藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),2010年版凡例總則的修訂一、《中華人民共和國(guó)藥典》簡(jiǎn)稱(chēng)《中國(guó)藥典》，依據(jù)《中華人民共和國(guó)藥品管理法》組織制定和頒布實(shí)施。 《中國(guó)藥典》由一部、二部、三部及其增補(bǔ)本組成，內(nèi)容分別包括凡例、正文和附錄。 本部為《中國(guó)藥典》二部。二、國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)由凡例與正文及其引用的附錄共同構(gòu)成。本部藥典收載的凡例、附錄對(duì)藥

4、典以外的其他化學(xué)藥品國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)具有同等效力。五、正文中引用的藥品系指本版藥典收載的品種，其質(zhì)量應(yīng)符合相應(yīng)的規(guī)定。,（一）藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),2010年版凡例總則的修訂六、正文所設(shè)各項(xiàng)規(guī)定是針對(duì)符合《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》的產(chǎn)品而言，任何違反GMP或有未經(jīng)批準(zhǔn)添加物質(zhì)所生產(chǎn)的藥品，即使符合《中國(guó)藥典》或按照《中國(guó)藥典》沒(méi)有檢出其添加物質(zhì)或相關(guān)雜質(zhì)，亦不能認(rèn)為其符合規(guī)定。七、《中國(guó)藥典》的英文名稱(chēng)為Pharmacopeia of the Pe

5、ople’s Republic of China； 英文簡(jiǎn)稱(chēng)為Chinese Pharmacopeia； 英文縮寫(xiě)為Ch.P. 。,（一）藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),2010年版凡例總則的修訂正文八、正文系根據(jù)藥物自身的理化與生物學(xué)特性，按照批準(zhǔn)的處方來(lái)源、生產(chǎn)工藝、貯藏條件等所制定的，用以檢測(cè)藥品質(zhì)量是否達(dá)到用藥要求并衡量其質(zhì)量是否穩(wěn)定均一的技術(shù)規(guī)定。附錄十、附錄主要收載制劑通則、通用檢測(cè)方法和指導(dǎo)原則。制劑通則

6、系按照藥物劑型分類(lèi)，針對(duì)劑型特點(diǎn)所規(guī)定的基本技術(shù)要求；通用檢測(cè)方法系各正文品種進(jìn)行相同檢查項(xiàng)目的檢測(cè)時(shí)所應(yīng)采用的統(tǒng)一的設(shè)備、程序、方法及限度；指導(dǎo)原則系為執(zhí)行藥典、考察藥品質(zhì)量、起草與復(fù)核藥品標(biāo)準(zhǔn)等所制定的指導(dǎo)規(guī)定。,（一）藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),2010年版凡例總則的修訂項(xiàng)目與要求十四、制法項(xiàng)下主要記載藥品的重要工藝和質(zhì)量管理要求。（1）所有藥品的生產(chǎn)工藝應(yīng)經(jīng)驗(yàn)證，并經(jīng)國(guó)務(wù)院藥品監(jiān)督管理部門(mén)批準(zhǔn)，生產(chǎn)過(guò)程均應(yīng)符合《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》的

7、要求。（2）直接用于生產(chǎn)的菌種、毒種、來(lái)自人和動(dòng)物的細(xì)胞、DNA重組工程菌及工程細(xì)胞，來(lái)源途徑應(yīng)經(jīng)國(guó)務(wù)院藥品監(jiān)督管理部門(mén)批準(zhǔn)并應(yīng)符合國(guó)家有關(guān)的管理規(guī)定。（3）來(lái)源于動(dòng)物組織提取的藥品，其所用動(dòng)物種屬要明確，所用臟器均應(yīng)來(lái)自經(jīng)檢疫的健康動(dòng)物，涉及牛源的應(yīng)取自無(wú)牛海綿狀腦病地區(qū)的健康牛群；來(lái)源于人尿提取的藥品，均應(yīng)取自健康人群。上述藥品均應(yīng)有明確的病毒滅活工藝要求以及質(zhì)量管理要求。,（一）藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),2010年版凡例總則的修訂項(xiàng)目與

8、要求十七、……（第二段）對(duì)于生產(chǎn)過(guò)程中引入的有機(jī)溶劑,應(yīng)在后續(xù)的生產(chǎn)環(huán)節(jié)予以有效去除。除正文已明確列有“殘留溶劑”檢查的品種必須依法進(jìn)行該項(xiàng)檢查外，其他未在“殘留溶劑”項(xiàng)下明確列出的有機(jī)溶劑與未在正文中列有此項(xiàng)檢查的品種，如生產(chǎn)過(guò)程中引入或產(chǎn)品中殘留有機(jī)溶劑，均應(yīng)按本版藥典附錄“殘留溶劑測(cè)定法”檢查并應(yīng)符合相應(yīng)溶劑的限度規(guī)定。,（一）藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的側(cè)重點(diǎn)： 1.鑒別真?zhèn)?2.制劑通則項(xiàng)目的檢查 3.安全

9、性檢查 4.有效性檢查 5.含量測(cè)定 6.非法添加（進(jìn)幾年得到重視）,《中國(guó)藥典》2010年版二部的修訂特點(diǎn) 特點(diǎn)一：收載品種增加，修訂品種多 2010年版與2005年版二部比較表,其中：因未收集到樣品而未修訂的品種有345個(gè)，占保留上版品種的17.5%,（一）藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),特點(diǎn)二：藥品安全性得到進(jìn)一步保障對(duì)高風(fēng)險(xiǎn)藥品注射劑重點(diǎn)提高→增加了安全性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原則，滲透壓摩爾濃度為靜注輸液

10、的必檢項(xiàng)目大幅增加了有關(guān)物質(zhì)（雜質(zhì)）檢查→共有565個(gè)品種增加了HPLC雜質(zhì)檢查，有些標(biāo)準(zhǔn)已超過(guò)了EP、BP加強(qiáng)了殘留溶劑的控制→有92個(gè)品種在各論中檢查對(duì)動(dòng)物來(lái)源的品種增加了制法要求增加安全性檢查→增加了細(xì)菌內(nèi)毒素、異常毒性和過(guò)敏反應(yīng)檢查,（一）藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),特點(diǎn)三：藥品有效性和可控性大幅提升檢測(cè)方法專(zhuān)屬性更強(qiáng)→新增了離子色譜法和毛細(xì)管電泳法，新增了335個(gè)品種的HPLC法以取代原有方法紅外光譜的應(yīng)用進(jìn)一步擴(kuò)大→共有50

11、種原料，72種制劑增加了IR鑒別，為打擊假藥提供了科學(xué)有效的手段溶出度、含量均勻度檢查項(xiàng)進(jìn)一步增加→新增99個(gè)品種溶出度，59個(gè)品種含量均勻度,（一）藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),特點(diǎn)四：技術(shù)現(xiàn)代化與國(guó)際化明顯加強(qiáng)擴(kuò)大了對(duì)成熟新技術(shù)方法的收載→附錄新增了離子色譜法、核磁共振波譜法、拉曼光譜法指導(dǎo)原則；液/質(zhì)聯(lián)用、DNA分子鑒定、薄層-生物自顯影技術(shù)等擴(kuò)大了對(duì)新技術(shù)的應(yīng)用→附錄中擴(kuò)大收載新技術(shù)，各論中也進(jìn)一步擴(kuò)大了對(duì)新技術(shù)的應(yīng)用部分品種的控制標(biāo)

12、準(zhǔn)已高于歐美藥典→部分生化品種,（一）藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),品種收載情況,化學(xué)藥中因未收集到樣品而未修訂的品種有306個(gè)，占保留上版品種的21.8%,（一）藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),主要項(xiàng)目收載情況 2010年版與2005年版收載情況比較表,（一）藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),（二）藥品檢驗(yàn)常用的分析方法,（1）重量分析法 （2）容量分析法 （3）電化學(xué)法 （4）比色法 （5）紫外-可見(jiàn)分光光度法 （6）紅外分

13、光光度法 （7）熒光分光度法,（二）藥品檢驗(yàn)常用的分析方法,（8） 原子吸收分光光度法 （9） 薄層色譜法 （10）高效液相色譜法 （11）氣相色譜法 （12）旋光度測(cè)定法 （13）不溶性微粒檢查法 （14）滲透壓摩爾濃度測(cè)定法,（二）藥品檢驗(yàn)常用的分析方法,（15）溶出度測(cè)定法 （16）熱分析法 （17）總有機(jī)碳測(cè)定法 （18）熔點(diǎn)測(cè)定法 ……

14、,（三）容量分析法,一種已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液與被測(cè)物質(zhì)作用，根據(jù)所消耗的體積來(lái)計(jì)算被測(cè)物質(zhì)含量的方法。 直接滴定法 間接滴定法 置換法 回滴法,（三）容量分析法,具備的條件： 1.化學(xué)反應(yīng)迅速（加催化劑或回滴法） 2.化學(xué)反應(yīng)完全（99.9%） 3.有合適的指示劑指示滴定終點(diǎn) 4.不能產(chǎn)

15、生副反應(yīng)或其他物質(zhì)不與滴定液反應(yīng),（三）容量分析法,優(yōu)點(diǎn)：方法經(jīng)典、準(zhǔn)確度高、結(jié)果準(zhǔn)確、 實(shí)驗(yàn)誤差?。ǎ?.1%）、方法簡(jiǎn)單、 反應(yīng)機(jī)理明確 缺點(diǎn)：選擇性差、反應(yīng)機(jī)制不合理、 干擾因素多、操作人員的經(jīng)驗(yàn)和熟練性 原料藥的含量測(cè)定還是以容量分析法為主,（三）容量分析法,1.中和滴定（水溶液滴定） 酸量法和堿量法 酸中的H+離子與堿中的OH-離子反應(yīng)生成水 弱酸或弱

16、堿鹽的電離常數(shù) 直接或間接滴定 選擇合適變色范圍的指示劑 電化學(xué)法指示終點(diǎn),（三）容量分析法,2.非水滴定（有機(jī)溶劑） 用于水中不溶解，弱酸或弱堿物質(zhì)的滴定 酸堿的質(zhì)子理論 電離H+為酸，OH-為堿（所有溶劑中） 常用于有機(jī)堿鹽的滴定 常用溶劑：冰醋酸 滴定液：高氯酸(0.1mol/L),（三）容量分析法,3.永停滴定（亞硝

17、酸鈉法） 亞硝酸與有機(jī)胺的氨基發(fā)生重氮化反應(yīng)外指示劑法：過(guò)量的亞硝酸與碘化鉀在酸性條件下反應(yīng)生成碘并與淀粉顯藍(lán)色。 2NO2-+2I-+4H+ → I2+2NO+2H2O電化學(xué)法（永停滴定法）：鉑-鉑電極間加50mV極化電壓，過(guò)量的亞硝酸使去極化，溶液有電流通過(guò)，電流計(jì)指針偏轉(zhuǎn)并不回復(fù)。（卡氏水分）,（三）容量分析法,4.沉淀滴定（銀量法） 滴定液與被測(cè)物生成難溶性沉淀物。指示劑法：鉻酸鉀→Ag2Cr

18、O4↓（磚紅色） 熒光黃（有機(jī)弱酸染料，陰離子），開(kāi)始沉淀表面為Cl-，終點(diǎn)時(shí)為Ag+，吸附熒光黃。電化學(xué)法：Ag+離子選擇電極,（三）容量分析法,5.絡(luò)合滴定（絡(luò)量法） 絡(luò)合劑(EDTA-2Na)與金屬離子形成絡(luò)合物的反應(yīng)。金屬指示劑：有機(jī)染料，大都為絡(luò)合劑，與金屬離子絡(luò)合生成有色絡(luò)合物。要求：顏色差別、pH值、終點(diǎn)顏色變化明顯、專(zhuān)屬性、穩(wěn)定性、其絡(luò)合物的穩(wěn)定性應(yīng)小于金屬離子與EDTA-2Na形成的

19、絡(luò)合物。電化學(xué)法：要求特殊電極。,（三）容量分析法,6.氧化還原滴定 以氧化還原反應(yīng)為基礎(chǔ)的容量分析，實(shí)質(zhì)是物質(zhì)間發(fā)生了電子轉(zhuǎn)移。失去電子→還原劑 得到電子→氧化劑 如：碘量法、溴量法、溴酸鉀法、高錳酸鉀法、重鉻酸鉀法、鈰量法、高碘酸鹽法、碘酸鉀法等。指示劑法：自身指示或指示劑（淀粉等）電化學(xué)法：鉑-鉑電極，電位滴定,（三）容量分析法,2010年版含量測(cè)定的修改原料藥含量測(cè)定

20、變化的主要特點(diǎn)非水滴定法：革除汞鹽終點(diǎn)變色不明顯的指示劑法：電位滴定法 例：丙硫氧嘧啶（指示劑法改為電位滴定法）紫外或滴定或重量法：HPLC法 例：熒光素鈉（重量法改為HPLC法）,（三）容量分析法,2010年版含量測(cè)定的修改含量測(cè)定（原料藥）：容量分析原料藥的純度達(dá)到98.5%以上時(shí)，首選容量分析法。在非水滴定法中革除汞鹽。有機(jī)堿氫鹵酸鹽，因氫鹵酸在冰醋酸中顯酸性，影響滴定終點(diǎn)的判斷，所以加入醋酸汞使氫鹵酸

21、生成難離解的鹵化汞，以排除氫鹵酸的干擾； 引發(fā)汞污染問(wèn)題，故應(yīng)少用高氯酸滴定法測(cè)定有機(jī)堿氫鹵酸鹽類(lèi)藥物含量，以避免汞污染。,（三）容量分析法,2010年版含量測(cè)定的修改含量測(cè)定（原料藥）：容量分析革除汞鹽的替代方法： （1）加乙酸酐的高氯酸電位滴定法 通過(guò)溶劑的選擇，使終點(diǎn)突躍增大從而取代汞鹽的使用。加入適量的乙酸酐時(shí)溶劑的堿性增強(qiáng)，使滴定突躍明顯增加，結(jié)果即革除了汞鹽，又排除了人為因素的干擾。 該方法使用

22、的較多，如鹽酸二甲雙胍等31個(gè)品種修改。關(guān)鍵是溶劑的篩選，常用冰醋酸-乙酸酐的溶劑組合，通過(guò)調(diào)整兩者的比例，達(dá)到終點(diǎn)易觀察的要求。當(dāng)樣品在冰醋酸中溶解性差時(shí)，也有使用甲酸為溶劑的。,（三）容量分析法,2010年版含量測(cè)定的修改含量測(cè)定（原料藥）：容量分析革除汞鹽的替代方法： （2）以醇類(lèi)為溶劑的氫氧化鈉電位滴定法 可溶于或略溶于醇類(lèi)溶劑的品種，優(yōu)先使用該方法，有一定的局限性。 分子結(jié)構(gòu)中含2個(gè)分子鹽酸的藥物，電

23、位滴定時(shí)通常用兩個(gè)突躍點(diǎn)，第一個(gè)突躍是滴定游離酸根，第二個(gè)突躍是滴定鍵合酸根。在標(biāo)準(zhǔn)中加以了說(shuō)明，以避免誤操作。,（三）容量分析法,2010年版含量測(cè)定的修改含量測(cè)定（原料藥）：容量分析革除汞鹽的替代方法： 在2010年藥典中還有28個(gè)品種保留了原方法。 原因：替代方法與原方法的測(cè)定結(jié)果不一致，有的結(jié)果相差1.5%，這對(duì)容量分析來(lái)講差異是顯著的，在沒(méi)有更好的解決辦法之前仍保留了原方法，有待進(jìn)一步研究和探討。,（四）儀器分析法

24、,1.紫外-可見(jiàn)分光光度法 通過(guò)測(cè)量單色光被樣品吸收的程度計(jì)算含量。 儀器要求： 波長(zhǎng)精度：紫外光區(qū)±1nm 500nm附近±2nm 吸光度準(zhǔn)確度：60mg/L的重鉻酸鉀溶液 雜散光：碘化鈉，亞硝酸鈉溶液 溶劑：,（四）儀器分析法,1.紫外-可見(jiàn)分光光度法 儀器的組成,光源,單色器,樣品室,檢測(cè)器,記錄儀,顯示系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處

25、理系統(tǒng),,,,,,光源,｛,氘燈200-400nm，一般換燈在360nm碘鎢燈400-850nm,（四）儀器分析法,1.紫外-可見(jiàn)分光光度法 單色器組成：進(jìn)光狹縫、出光狹縫、平行光裝置 色散元件、聚焦透鏡、反射鏡,（四）儀器分析法,1.紫外-可見(jiàn)分光光度法,色散元件,｛,棱鏡（波長(zhǎng)不等距，精度不符合）光柵（波長(zhǎng)等距，常用）,結(jié)構(gòu)：?jiǎn)喂馐㈦p光束、雙波長(zhǎng)雙光束,（四）儀器分析法,1.紫外-可見(jiàn)分光光度

26、法 測(cè)定原理 用于測(cè)定UV的藥物絕大部分是由具有不飽和結(jié)構(gòu)的化合物的外層電子躍遷引起的。 如：共軛雙鍵、三鍵，芳香族化合物等 不飽和化合物引入Cl、O、S、N、等元素時(shí)，外層電子更容易躍遷，使吸收波長(zhǎng)變長(zhǎng)（長(zhǎng)移）,（四）儀器分析法,1.紫外-可見(jiàn)分光光度法 定量原理：朗伯-比爾（Lamber-Beer）定律 A=log1/T=ECL,（四）儀器分析法,1

27、.紫外-可見(jiàn)分光光度法 《藥典要求》： 溶劑：以空氣為空白（空杯） 220-240nm，≤0.40 241-250nm，≤0.20 251-300nm，≤0.10 300nm以上，≤0.05 波長(zhǎng)：規(guī)定波長(zhǎng)±2nm 吸光度范圍：0.3-0.7之間,（四）儀器分析法,1.紫外-可見(jiàn)分光光度法 應(yīng)用：

28、鑒別：光譜特性；λmax；λmin；比值 檢查：純度；雜質(zhì)；顏色 含量：對(duì)照品比較（包括比色法） 百分吸收系數(shù)（100以上） 計(jì)算分光光度法 比色法 *導(dǎo)數(shù)光譜法（計(jì)算，不推薦）,（四）儀器分析法,2.紅外分光光度法（IR、FT-IR） 結(jié)構(gòu)分類(lèi)：付立葉變換紅外光譜儀

29、 光柵型紅外光譜儀 原理：化合物受紅外輻射照射后，使分子的振動(dòng)和轉(zhuǎn)動(dòng)運(yùn)動(dòng)由較低能級(jí)向較高能級(jí)躍遷，從而導(dǎo)致對(duì)特定頻率紅外輻射的選擇性吸收。,（四）儀器分析法,2.紅外分光光度法（IR、FT-IR） 紅外區(qū)分為3個(gè)區(qū)域： 近紅外區(qū)：780-2500nm，0.78-2.5μm，12800-4000 cm-1 中紅外區(qū)：2500-25000nm，2.5-25μm，4000-400 cm-1

30、 遠(yuǎn)紅外區(qū)：25-1000μm，400-10 cm-1 應(yīng)用的是中紅外區(qū),（四）儀器分析法,2.紅外分光光度法（IR、FT-IR） 波長(zhǎng)范圍：2.5-25μm； 以波數(shù)表示：cm-1 ;范圍：4000-400 cm-1 儀器要求： 波數(shù)精度：3000 cm-1附近，±5 cm-1 1000 cm-1附近，±1 c

31、m-1 分辨率：用聚苯乙烯薄膜 3110-2850 cm-1 ，分辨出7個(gè)峰,（四）儀器分析法,2.紅外分光光度法（IR、FT-IR） 制備：固體分散劑（KBr，KCl）壓片 液體池，溶劑（四氯化碳，二甲基亞砜） 糊狀物 固體粉末 應(yīng)用：

32、鑒別：對(duì)照品和對(duì)照光譜比較一致性 晶型檢查 異構(gòu)體檢查 含量測(cè)定（個(gè)別）,（四）儀器分析法,3.電化學(xué)法（pH值，電位滴定） 是容量分析中用以確定終點(diǎn)或核對(duì)指示劑變色域的方法。用于： 氧化還原法 中和法（水溶液、非水溶液） 沉淀法 重氮化法 卡氏水分電極系統(tǒng)： 指示電極：隨被測(cè)離子濃度的變化而變化； 參比電極：電極電位固定不變。

33、終點(diǎn)時(shí)被測(cè)離子濃度急劇變化的電位突躍（曲線(xiàn)拐點(diǎn)）,（四）儀器分析法,3.電化學(xué)法（pH值，電位滴定） 常用電極組合： 鉑-飽和甘汞，氧化還原法 玻璃-飽和甘汞，中和法（水溶液、非水溶液） 銀-玻璃，銀量法 鉑-鉑，重氮化法（永停滴定） 與指示劑法相比，電位滴定是首選,（四）儀器分析法,4.旋光度測(cè)定法 測(cè)定具有光學(xué)活性化合物。使平面偏振光產(chǎn)生偏轉(zhuǎn)的現(xiàn)象，記錄偏轉(zhuǎn)的角度。

34、 光源：?jiǎn)紊?，通常為鈉光燈，589.3nm 儀器精度：≤0.01°（滿(mǎn)足藥檢要求） 測(cè)定溫度：20℃ “+”-右旋，順時(shí)針?lè)较?“-”-左旋，逆時(shí)針?lè)较?（四）儀器分析法,4.旋光度測(cè)定法 應(yīng)用： 比旋度：濃度為1g/ml的溶液，在1dm的光路中的旋光度。物理常數(shù) 檢查純度 檢查雜質(zhì) 檢查消旋體-旋光度 測(cè)定含量-缺

35、乏專(zhuān)屬性，少用,（四）儀器分析法,4.旋光度測(cè)定法：2010年版要求區(qū)別比旋度與旋光度兩個(gè)項(xiàng)目。比旋度作為光學(xué)異構(gòu)體的物理性質(zhì)，列在“性狀”項(xiàng)下；旋光度作為檢查外消旋體混合物中兩對(duì)映異構(gòu)體的比例的簡(jiǎn)易方法，列在“檢查”項(xiàng)下，限度一般為 -0.1°→+0.1°比旋度測(cè)定時(shí)所選擇的溶劑應(yīng)盡量與歐美藥典或相關(guān)文獻(xiàn)一致，使最終限度具備可參考性；另關(guān)于測(cè)定溫度，附錄規(guī)定為20℃，如果測(cè)定溫度不同于20℃，應(yīng)在各論項(xiàng)下明

36、確測(cè)定溫度，如：葡萄糖的測(cè)定,（四）儀器分析法,5.滲透壓摩爾濃度測(cè)定法 溶劑通過(guò)半透膜（人體細(xì)胞膜、毛細(xì)血管壁）由低濃度溶液向高濃度溶液擴(kuò)散的現(xiàn)象（滲透），阻止擴(kuò)散的壓力為滲透壓。 測(cè)定原理：冰點(diǎn)下降原理。 儀器組成：制冷系統(tǒng)、 熱敏探頭、樣品室、振蕩器和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。 單位：毫滲透壓摩爾濃度，mOsmol/kg 2010年版增加了滲透壓控制的品種數(shù)量 大容量注射劑，部分滴眼劑,（

37、四）儀器分析法,5.滲透壓摩爾濃度測(cè)定法 人體血液的滲透壓摩爾濃度： 285-310mOsmol/kg 0.9%氯化鈉溶液：286mOsmol/kg（≈等滲） 應(yīng)用： 直接測(cè)定滲透壓摩爾濃度： 氯化鈉注射液：260-320mOsmol/kg 計(jì)算滲透壓摩爾濃度比： 供試品溶液與0.9%氯化鈉溶液的比值 滴眼液:比值應(yīng)為0.9-1.1(258

38、-314mOsmol/kg),,（四）儀器分析法,6.高效液相色譜法 儀器的組成,溶劑,恒流泵,進(jìn)樣器,色譜柱,檢測(cè)器,顯示系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng),,,,,,脫氣裝置,自動(dòng)、手動(dòng),柱溫箱,UVDAD熒光電化學(xué)蒸發(fā)光散射示差,,,,,（四）儀器分析法,6.高效液相色譜法 測(cè)定原理 正相-固定相的極性大于流動(dòng)相的極性 反相-固定相的極性小于流動(dòng)相的極性 吸附色譜法

39、 分配色譜法 離子交換色譜法 分子排阻色譜法,（四）儀器分析法,6.高效液相色譜法 性能指標(biāo) 恒流泵：流速的精度和穩(wěn)定性 進(jìn)樣系統(tǒng)：定量環(huán)（忽略誤差）、自動(dòng)、手動(dòng) 色譜柱：差別較大（選擇、使用、保養(yǎng)、貯存） 檢測(cè)器：靈敏度、精度、重復(fù)性,（四）儀器分析法,6.高效液相色譜法 測(cè)定條件： 固定相

40、（色譜柱）種類(lèi)、品牌（特定應(yīng)注明） 、 規(guī)格（粒徑、 尺寸） 檢測(cè)器（類(lèi)型、波長(zhǎng)、靈敏度） 流動(dòng)相（組分、比例、 流速） 溫度（根據(jù)柱壓） 進(jìn)樣量（根據(jù)檢測(cè)靈敏度） 溶液濃度（根據(jù)進(jìn)樣量）,（四）儀器分析法,6.高效液相色譜法 色譜評(píng)價(jià)（系統(tǒng)適用性試驗(yàn)）： 理論板數(shù)：評(píng)價(jià)色譜柱分離效能 分離度： 評(píng)價(jià)色譜柱分離程度 重復(fù)性： 評(píng)價(jià)

41、色譜系統(tǒng)響應(yīng)值的重復(fù)性 脫尾因子：評(píng)價(jià)色譜峰的對(duì)稱(chēng)性，與測(cè)量精度有關(guān) 峰面積計(jì)算時(shí)影響不大 峰高計(jì)算時(shí)有影響，0.95-1.05,（四）儀器分析法,6.高效液相色譜法 應(yīng)用： 鑒別：保留時(shí)間一致 檢查：雜質(zhì)、異構(gòu)體、其他檢查的含量測(cè)定 含量測(cè)定： 計(jì)算：峰面積、峰高 內(nèi)標(biāo)法 外標(biāo)法 面積歸一化法 主成分自身對(duì)照法

42、 加校正因子的主成分自身對(duì)照法,6.高效液相色譜法2010年版二部，色譜柱的使用情況,（四）儀器分析法,6.高效液相色譜法2010年版二部，采用檢測(cè)器情況,（四）儀器分析法,,（四）儀器分析法,7.氣相色譜法 儀器的組成,載氣,進(jìn)樣器,色譜柱,柱溫箱,檢測(cè)器,色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng),,,,,,高純氮,直接進(jìn)樣頂空進(jìn)樣,控制加熱器,FIDTCDECDFPDNPDMS,,,,,（四）儀器分析法,7.氣相色譜法

43、 原理：吸附和分配 與液相不同，流動(dòng)相為氣體（固定），更換固定相 吸附色譜法 氣-固 分配色譜法 氣-液,（四）儀器分析法,7.氣相色譜法 性能指標(biāo) 氣源：N2、H2等，要求高純（99.99%以上） 進(jìn)樣系統(tǒng)：自動(dòng)進(jìn)樣器 手動(dòng)進(jìn)樣-誤差大、需要經(jīng)驗(yàn) 色譜柱：差別較大（選擇、使用、保養(yǎng)、貯存） 檢測(cè)

44、器：靈敏度、精度、重復(fù)性,（四）儀器分析法,7.氣相色譜法 測(cè)定條件： 固定相（色譜柱）種類(lèi)、規(guī)格（粒徑、 尺寸） 檢測(cè)器（類(lèi)型、靈敏度） 流動(dòng)相（氣體種類(lèi)、分流比、流速） 溫度（氣化室、柱相、檢測(cè)器） 進(jìn)樣量（根據(jù)檢測(cè)靈敏度） 溶液濃度（根據(jù)進(jìn)樣量） 色譜評(píng)價(jià)：同液相,（四）儀器分析法,7.氣相色譜法 應(yīng)用： 鑒別：保留時(shí)間一致 檢查：

45、雜質(zhì)、異構(gòu)體、殘留溶劑 含量測(cè)定： 計(jì)算：峰面積、峰高 內(nèi)標(biāo)法 外標(biāo)法 面積歸一化法 主成分自身對(duì)照法 加校正因子的主成分自身對(duì)照法,（四）儀器分析法,7.氣相色譜法 應(yīng)用常識(shí)： （1）色譜柱的老化：固定液涂層時(shí)使用了有機(jī)溶劑，使用前應(yīng)在其最高使用溫度20℃以下進(jìn)行老化；平時(shí)使用后也應(yīng)高溫吹掃。 （2）溫度：氣化室和檢測(cè)器溫度一般高于柱溫30-50 ℃，且

46、檢測(cè)器溫度不低于150℃。 （3）氣體流速比率：例如FID 氮?dú)猓簹錃猓嚎諝?1：1：10,8.總有機(jī)碳測(cè)定法通過(guò)測(cè)定水中的二氧化碳，間接測(cè)量水被有機(jī)物污染的程度方法與原理 氧化：燃燒、氧化劑、光照 檢測(cè)：直接電導(dǎo)、薄膜電導(dǎo)、非色散紅外對(duì)TOC儀器的要求 能區(qū)分水中的有機(jī)碳和無(wú)機(jī)碳，能排除無(wú)機(jī)碳的干擾 滿(mǎn)足系統(tǒng)適用性試驗(yàn)要求（易氧化和不易氧化試劑的能力） 滿(mǎn)足靈敏度的要求儀器選擇：視用途

47、選擇,（四）儀器分析法,（四）儀器分析法,8.總有機(jī)碳測(cè)定法 儀器要求： 1.能區(qū)分無(wú)機(jī)碳和有機(jī)碳并能排除其干擾 2.能滿(mǎn)足系統(tǒng)適用性試驗(yàn)(響應(yīng)效率)的要求 3.檢測(cè)靈敏度：含碳量≤0.05mg/L(50ppm) 一般進(jìn)口儀器都能達(dá)到1ppm以下,（四）儀器分析法,8.總有機(jī)碳測(cè)定法 對(duì)照品溶液： 1.蔗糖：易氧化的有機(jī)物，含碳0.50mg/L

48、 2.1,4-對(duì)苯醌：難氧化的有機(jī)物，含碳0.50mg/L 總有機(jī)碳檢查用水：25℃時(shí) 含碳量＜0.10mg/L，電導(dǎo)率＜1.0μS/cm,（四）儀器分析法,9.原子吸收分光光度法(火焰光度法) 藥用明膠空心膠囊中鉻超標(biāo)事件 全國(guó)性監(jiān)督檢驗(yàn) 生產(chǎn)企業(yè)批批檢自查 國(guó)家局公告 2012年10月1日后具備自檢能力 儀器選型、采購(gòu)（價(jià)

49、格） 人員培訓(xùn)、檢驗(yàn)?zāi)芰?（四）儀器分析法,9.原子吸收分光光度法(火焰光度法)原子吸收:當(dāng)待測(cè)元素?zé)舭l(fā)出的特征譜線(xiàn)通過(guò)供試品經(jīng)原子化產(chǎn)生的原子蒸氣時(shí)，被蒸氣中待測(cè)元素的基態(tài)原子所吸收，通過(guò)測(cè)定輻射光強(qiáng)度減弱的程度，求出供試品中待測(cè)元素的含量方法。原子發(fā)射(火焰光度法)：供試品溶液以氣溶膠的形式，靠火焰的熱能將供試品元素原子化并激發(fā)出特征光譜，通過(guò)光電檢測(cè)系統(tǒng)測(cè)量出待測(cè)元素的譜線(xiàn)強(qiáng)度，求出供試品中待測(cè)元素的含量方法。,

50、（四）儀器分析法,9.原子吸收分光光度法(火焰光度法)儀器組成：,火焰型電熱型（石墨爐）氫化物型（As）冷蒸氣發(fā)生型（Hg）,光源,,原子化器,,,電源、自動(dòng)進(jìn)樣器、循環(huán)水冷卻機(jī),,單色器,,檢測(cè)器,,顯示系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng),（四）儀器分析法,9.原子吸收分光光度法(火焰光度法)原子化器-火焰原子化器: 由霧化器及燃燒燈頭組成。 將供試品溶液霧化成氣溶膠后，再與燃?xì)饣旌?，進(jìn)入燃燒燈產(chǎn)生的火焰中，使供試品中的待測(cè)元素經(jīng)干

51、燥、蒸發(fā)、離解形成基態(tài)原子。 燃?xì)猓阂胰?助燃?xì)猓嚎諝猓諌簷C(jī)）、氧化亞氮、氧氣 檢出限：ppm級(jí),（四）儀器分析法,9.原子吸收分光光度法(火焰光度法)原子化器-石墨爐原子化器: 由電熱石墨爐及電源組成，通常配自動(dòng)進(jìn)樣器。 將供試品溶液干燥、灰化，再經(jīng)高溫原子化使待測(cè)元素形成基態(tài)原子。保護(hù)氣：氬氣（石墨為發(fā)熱體，通入保護(hù)氣防氧化并能輸送試樣蒸氣）輔助設(shè)備：循環(huán)水冷卻機(jī)；耗材：石墨管 檢出限：ppb級(jí),（四

52、）儀器分析法,9.原子吸收分光光度法(火焰光度法)原子化器-氫化物發(fā)生原子化器（As,Sb,Sn,Se等）: 由氫化物發(fā)生器和原子吸收池組成。 將待測(cè)元素在酸性介質(zhì)中還原成低沸點(diǎn)、易受熱分解的氫化物，再由載氣導(dǎo)入由石英管、加熱器組成的原子吸收池，在吸收池中氫化物被加熱分解并形成基態(tài)原子。載氣：氬氣還原劑：硼氫化鈉 檢出限：ppb級(jí),（四）儀器分析法,9.原子吸收分光光度法(火焰光度法)原子化器-冷蒸氣原子化器（測(cè)Hg

53、）: 還原裝置通常由氫化物發(fā)生器代替。 在汞蒸氣發(fā)生器中，汞離子被還原成汞，將汞蒸氣直接導(dǎo)入原子吸收池中測(cè)定。載氣：氬氣還原劑：硼氫化鈉 檢出限：ppb級(jí),（四）儀器分析法,9.原子吸收分光光度法(火焰光度法)測(cè)定法: 第一法（標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法） 對(duì)照品溶液至少3個(gè)點(diǎn)+對(duì)照空白；n=3 以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。供試品溶液+空白；n=3 測(cè)定值應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)范圍內(nèi)。,（四）儀器分析法,9.原

54、子吸收分光光度法(火焰光度法)測(cè)定法: 第二法（標(biāo)準(zhǔn)加入法） 制備至少4份供試品溶液，其中1份不加標(biāo)準(zhǔn)溶液，制備從零開(kāi)始的對(duì)照品溶液至少4個(gè)點(diǎn)；n=3 以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。供試品溶液+空白；n=3 僅適用于第一法標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)呈線(xiàn)性并通過(guò)原點(diǎn)的情況。,（四）儀器分析法,9.原子吸收分光光度法(火焰光度法)測(cè)定法: 第二法（標(biāo)準(zhǔn)加入法）,,,,,,,,,,,,,,0.1,0.2,0.3,(1),

55、(2),(3),(4),吸光度,待測(cè)元素加入量,,供試品溶液取用量中待測(cè)元素的含量,（四）儀器分析法,9.原子吸收分光光度法(火焰光度法)測(cè)定法: 第二法（標(biāo)準(zhǔn)加入法-雜質(zhì)限度檢查） 制備2份供試品溶液 供試品溶液+標(biāo)準(zhǔn)溶液（對(duì)照品溶液）；a值 供試品溶液；b值 b值應(yīng)小于（a-b）,（四）儀器分析法,9.原子吸收分光光度法(火焰光度法)應(yīng)用：（根據(jù)需求選配儀器） 火焰法（大部分金屬元素，以2價(jià)為主）

56、 鑒別：發(fā)射光譜/通過(guò)特征譜線(xiàn)鑒別/Na,589.6nm 檢查：限度檢查、含量測(cè)定 含量測(cè)定：,（四）儀器分析法,9.原子吸收分光光度法(火焰光度法)應(yīng)用：（根據(jù)需求選配儀器） 石墨爐法（大部分金屬元素） 檢查：限度檢查、含量測(cè)定 含量測(cè)定：,（四）儀器分析法,9.原子吸收分光光度法(火焰光度法)應(yīng)用：（根據(jù)需求選配儀器） 氫化物法（主要測(cè)砷等非金屬元素） 檢查：限度檢查、含量測(cè)定

57、 含量測(cè)定： 冷蒸氣法（測(cè)汞） 檢查：限度檢查、含量測(cè)定,（四）儀器分析法,9.原子吸收分光光度法(火焰光度法)應(yīng)用：（根據(jù)需求選配儀器） 無(wú)機(jī)物原輔料分析： 具備火焰法和石墨爐法 中藥材：重金屬及有害元素檢查 Pb、Cd:石墨爐法 As：氫化物法 Hg：冷蒸氣法 Cu：火焰法 ICP-MS:電感耦合等離子體質(zhì)譜法（條件不具備）,（四）儀器分析法,9.原子吸收分光光

58、度法(火焰光度法)前處理方法及設(shè)備： 一、微波消解法 微波消解儀、聚四氟乙烯消解罐、趕酸器 二、濕法消解 凱氏燒瓶、電加熱或直火加熱 三、干法消解 瓷坩堝、電加熱或直火加熱、高溫爐,（四）儀器分析法,9.原子吸收分光光度法(火焰光度法)例：明膠空心膠囊中鉻的測(cè)定 取本品0.5g，置聚四氟乙烯消解罐中，加硝酸5-10ml，混勻，浸泡過(guò)夜，蓋上內(nèi)蓋，旋緊外套，置適宜的微波消解爐內(nèi)，進(jìn)行消解。消解完

59、全后，取消解內(nèi)罐置電加熱板上緩緩加熱至紅棕色蒸氣揮盡并近干，用2%硝酸轉(zhuǎn)移至50ml量瓶中，并用2%硝酸稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。同法制備試劑空白溶液；另取鉻單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液，用2%硝酸稀釋制成每1ml含鉻1.0μg的鉻標(biāo)準(zhǔn)貯備液，臨用時(shí)，分別精密量取鉻標(biāo)準(zhǔn)貯備液適量，用2%硝酸溶液稀釋制成每1ml含鉻0-80ng的對(duì)照品溶液。取供試品溶液與對(duì)照品溶液，以石墨爐為原子化器，照原子吸收分光光度法（第一法），在357.9nm的波長(zhǎng)處測(cè)

60、定，計(jì)算，即得。含鉻不得過(guò)百萬(wàn)分之二。,（四）儀器分析法,9.原子吸收分光光度法(火焰光度法)例：明膠空心膠囊中鉻的測(cè)定 為解決應(yīng)急檢驗(yàn)中遇到的問(wèn)題，中檢院下發(fā)了 《明膠藥用空心膠囊鉻檢測(cè)方法指導(dǎo)原則》 《膠囊殼中鉻測(cè)定方法答疑匯總》,（四）儀器分析法,10.薄層色譜法(薄層掃描) 11.不溶性微粒檢查法 12.溶出度、釋放度測(cè)定法 13.熱分析法 14.熒光分析法

61、 15.電泳法（毛細(xì)管） 16.離子色譜法 ……,（五）滴定液（標(biāo)準(zhǔn)溶液）,滴定液：指在容量分析中用于滴定被測(cè)物質(zhì)含量的標(biāo)準(zhǔn)溶液，具有準(zhǔn)確的濃度（取4位有效數(shù)字）；濃度以“mol/L”表示；滴定液的濃度值與名義值之比，稱(chēng)為“F”值，常用于容量分析中的計(jì)算標(biāo)定：指根據(jù)規(guī)定的方法，用基準(zhǔn)物質(zhì)或已標(biāo)定的滴定液準(zhǔn)確測(cè)定滴定液濃度（mol/L）的操作過(guò)程，要嚴(yán)格按照藥典中各滴定液項(xiàng)下的方法進(jìn)行標(biāo)定,（五）滴定液（標(biāo)準(zhǔn)溶

62、液）,標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定過(guò)程中的量值傳遞過(guò)程（或朔源）,國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),基準(zhǔn)物質(zhì),天平、琺碼,容量器具,滴 定 液,滴 定 液,,,,,,,,,（五）滴定液（標(biāo)準(zhǔn)溶液）,標(biāo)定標(biāo)準(zhǔn)溶液的規(guī)定 配制滴定液的水（純化水）應(yīng)符合規(guī)定配制滴定液的試劑最好用分析純（AR）用于標(biāo)定的試劑必須是基準(zhǔn)試劑，有證書(shū)基準(zhǔn)試劑如是顆?；蚪Y(jié)晶，應(yīng)先研細(xì)，恒重3個(gè)月內(nèi)應(yīng)用（最多不得過(guò)6個(gè)月）過(guò)期應(yīng)重新標(biāo)定（除另有規(guī)定外）,（五）滴定液（標(biāo)準(zhǔn)溶液）,標(biāo)定標(biāo)準(zhǔn)溶

63、液的規(guī)定 盛滴定液的容器（質(zhì)量好，密封好，注意避光）所用容量?jī)x器必須校正滴定管中的溶液每次必須從零開(kāi)始標(biāo)定與使用的溫度相差未超過(guò)10℃，濃度值可不加溫度修正值；超過(guò)10℃，應(yīng)加溫度修正值移取滴定液應(yīng)傾出后吸取，不能直接取用,（五）滴定液（標(biāo)準(zhǔn)溶液）,標(biāo)定標(biāo)準(zhǔn)溶液的規(guī)定 低濃度（0.02mol/L以下）的滴定液，用稀釋法部分滴定液應(yīng)先配制儲(chǔ)備液，備用滴定液存放于干燥，陰涼處，使用前搖勻兩人以上參加標(biāo)定每人各做平行試驗(yàn)3

64、份以上,（五）滴定液（標(biāo)準(zhǔn)溶液）,標(biāo)定標(biāo)準(zhǔn)溶液的規(guī)定 3份平行試驗(yàn)結(jié)果的相對(duì)平均偏差，不大于0.1%每人平均值之間的相對(duì)偏差，不大于0.1%,（五）滴定液（標(biāo)準(zhǔn)溶液）,相對(duì)平均偏差（%）=,,平均絕對(duì)偏差,算數(shù)平均值,×100%,=,,｜X1-X｜+｜X2-X｜+………….+n,¯,¯,n X,¯,×100%,相對(duì)偏差（%）=,,｜測(cè)得值-算數(shù)平均值｜,算數(shù)平均值,×100