10％氯化鉀注射液的含量測(cè)定

1、張慶英,己酸羥孕酮物理常數(shù)的測(cè)定,1.恒溫干燥箱、己酸羥孕酮2.容量瓶、b形管、毛細(xì)管3.旋光儀,二、實(shí)訓(xùn)內(nèi)容,1.烘干箱烘至恒重2.檢查性狀、測(cè)定溶解度3.測(cè)定熔點(diǎn)、旋光度4.計(jì)算結(jié)果,實(shí)驗(yàn)原理,根據(jù)藥物濃度與折光率的關(guān)系式： a 對(duì)液體供試品 [a]D＝────

2、 ιd 　 100α 對(duì)固體供試品 [a]D＝─────

3、 ιc 式中 [a]為比旋度； D為鈉光譜的D線； t為測(cè)定時(shí)的溫度； ι為測(cè)定管長(zhǎng)度, dm；

4、 α為測(cè)得的旋光度； d為液體的相對(duì)密度； c為每100ml溶液中含有被測(cè)物質(zhì)的重量,g（按干燥品或無水物計(jì)算）。,熔點(diǎn)：（2005年版）附錄Ⅵ ）1.熔點(diǎn)（melting point）：一種物質(zhì)按規(guī)定方法測(cè)定，由固體熔化成液體的溫度或熔融同時(shí)分解的溫度或在熔化時(shí)初溶至

5、全熔經(jīng)歷的溫度范圍。2.意義：鑒別藥物，判斷真?zhèn)?；檢查藥物的純凈程度：不純，熔距增大；晶型。,3.測(cè)定法 易粉碎的固體藥品；不易粉碎的固體藥品（石蠟）；油狀（凡士林）。研成細(xì)粉干燥除水 m.p.＞135℃，105℃干燥；m.p.＜135℃或受熱易分解，P2O5干燥24小時(shí)。,裝樣毛細(xì)管：長(zhǎng)9cm左右，內(nèi)徑1mm，底部熔封。裝樣高度：3mm，要裝緊、裝密、便于傳溫。測(cè)定容器：“b”型管、燒杯傳溫液：m.p.＜80

6、℃ ---------水m.p.＜300℃ -----------液體石蠟、硅油m.p.＞300℃ -----------硫酸鉀—硫酸,溫度計(jì)： 分浸式具有0.5℃刻度，傳溫液液面不得超過 刻度，預(yù)先校正。溫度校正數(shù)值—熔點(diǎn)溫度。 加熱： 溫度計(jì)距燒杯底部2.5cm以上，樣品在水銀球中部，在低于m.p.10℃時(shí)放入傳溫液，控制升溫速度1-1.5℃/min。,,熔點(diǎn)的判斷初熔：供試品開

7、始局部液化（出現(xiàn)明顯液滴）時(shí)的溫度。 全熔：供試品全部熔化（澄明）時(shí)的溫度。熔融同時(shí)分解：變色或產(chǎn)氣。在某一點(diǎn)上完全液化。測(cè)定三次取平均值。,旋光度： （2005年版）附錄Ⅵ ）1.旋光度：偏振光通過含有某些光學(xué)活性的化合物液體或溶液時(shí)，能引起旋光現(xiàn)象，使偏振光的平面相左或向右旋轉(zhuǎn)，此種旋轉(zhuǎn)在一定的條件下，有一定的度數(shù)，稱為旋光度。2.比旋度：在一定溫度下和一定波長(zhǎng)下，偏振光透過長(zhǎng)1dm，每1ml中含有旋光物質(zhì)1g的溶液時(shí)

8、的旋光度稱為比旋度。3.意義：判斷純度、含量測(cè)定。,,[α] c l,α=,λ,t,[α] = ----比旋度c：供試品溶液的濃度，每ml溶液中含有溶質(zhì)的克數(shù)。t：20℃,,α,c l,t,D,相對(duì)密度：（2005年版）附錄Ⅵ ）1.相對(duì)密度：在共同的特定條件下（如同一溫度等），某物質(zhì)的密度與另一參考物質(zhì)的密度之比。即在相同條件下，物質(zhì)比純化水重的倍數(shù)。2.意義：檢查藥品的純雜程度。,,3.測(cè)定方法

9、（1）比重瓶法適用范圍：一般液體，非揮發(fā)性液體測(cè)定法：精稱干燥潔凈的比重瓶，w1，裝滿供試液（＜20℃），裝溫度計(jì)，恒溫20℃擦干。精稱比重瓶，w2。液重= w2-w1供試品相對(duì)密度=,,供試品重量,純化水重量,,注意事項(xiàng)：比重瓶必須是干燥潔凈的。確保稱量瓶充滿液體，不得有氣泡。瓶子外要擦干凈，保持干燥。溫度保持恒定。采用新煮沸數(shù)分鐘并冷卻的水。,,,（2）韋氏比重秤法適用范圍： 測(cè)定易揮發(fā)液體，方法準(zhǔn)確可靠

10、，手續(xù)簡(jiǎn)便迅速，可直接得到相對(duì)密度讀數(shù)。測(cè)定法,,,甾體激素,,己酸羥孕酮,甾體激素,腎上腺皮質(zhì)激素,性激素,雄性激素及蛋白同化激素,孕激素,雌激素,,,基本結(jié)構(gòu)與性質(zhì),1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17,18,19,20,21,環(huán)戊烷并多氫菲母核,1.Δ4-3-酮，C20酮基,2.C11： 或,4.A環(huán)上的酚羥基,5.鹵素(-F)，酯基,,,,,以下主要基團(tuán)可供分析：,一、腎

11、上腺皮質(zhì)激素,3,11,17,20,21,氫化可的松(hydrocortisone),醋酸地塞米松(dexamethasone acetate),,16α-甲基,,21-酯化,,17α-羥基,,9α-氟,,3-酮,,1,2-雙鍵,,11β-羥基,,20-酮,二、雄性激素及蛋白同化激素,甲睪酮(methyltestosterone),丙酸睪酮(testosterone propionate),苯丙酸諾龍(nandrolone p

12、henylpropionate),,,17β-羥基,,,三、孕激素,,黃體酮(progesterone),醋酸甲地孕酮(megestrol acetate ),,,,,米非司酮(mifepristone),四、雌性激素,雌二醇(estradiol),(炔雌醇),炔諾酮(norethisterone),結(jié)構(gòu)-性質(zhì),官能團(tuán)的反應(yīng),① C17-α-醇酮基——還原性,含量測(cè)定—比色法,2,3,5-Triphenyltatrazoliu

13、m chloride TTC(Red tatrazoline RT),甲瓚(Formazan),深紅色 λmax 480~490nm,,,Blue tetrazoline BT,BT-單甲瓚,BT-雙甲瓚,藍(lán)色 λmax 525nm,氫化可的松軟膏的含量測(cè)定,精密量取對(duì)照品溶液及供試品溶液各1ml，分別置干燥具塞試管中，各精密加無水乙醇9ml與氯化三苯四氮唑試液1ml，搖勻，各再精密加氫氧化四甲基銨試液1ml，搖勻，在25

14、℃的暗處放置40min～45min，在485nm的波長(zhǎng)處分別測(cè)定吸收度，計(jì)算，即得,基團(tuán)對(duì)反應(yīng)速度的影響,溶劑、水分的影響,— 無水乙醇(無醛),O2與光線的影響,堿的種類及加入順序,反應(yīng)應(yīng)在強(qiáng)堿性（pH13.75）條件下進(jìn)行以氫氧化四甲基銨的結(jié)果最佳,溫度與時(shí)間,t℃↑→ν↑→甲瓚分解↑→%↓,含量測(cè)定—異煙肼法(Isonicotinic acid hydrazide),專屬性強(qiáng),無水,酸、異煙肼的量,鹽酸 : 異煙肼 = 2 :

15、1,樣品 : 異煙肼 = 1 : 8 →ν↑,② C3–酮基和C20–酮基,,,睪酮,異煙腙（黃色）,,,,,黃體酮,異煙雙腙（黃色）,UV,醋酸地塞米松,③ 甲酮基或活潑亞甲基,④酚羥基,黃體酮,藍(lán)紫色,含量測(cè)定— Kober反應(yīng)比色法,采用本法測(cè)定炔雌醇片及復(fù)方炔諾酮片、復(fù)方炔諾孕酮滴丸、復(fù)方左炔諾孕酮片中的炔雌醇的含量,生物樣品中的甾體激素的分析,,刺激劑麻醉劑β-阻斷劑利尿劑遮蔽劑合成類固醇及β2激動(dòng)劑肽類激素,內(nèi)

16、源性,,興奮劑檢測(cè)特點(diǎn),色譜方法是理想的檢測(cè)手段。1976年使用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用手段檢測(cè)甾體，1980年開始用毛細(xì)管氣相色譜法檢測(cè)，至1984年大體基本定型。,藥物及其代謝物的種類多，變化大，禁用的百余種藥物以原體或一個(gè)或多個(gè)代謝產(chǎn)物的形式存在與人體體液中，因此，需要檢測(cè)和確證的化合物多達(dá)幾百種。除此以外，用藥后的不同時(shí)間，這些化合物的濃度不斷的發(fā)生變化 藥物在人體體液中的濃度很低，藥物在人體體液中的濃度常常是ng級(jí)或更低的水平，因此

17、對(duì)檢測(cè)的靈敏度要求很高。要求準(zhǔn)確的定性和定量，不能有絲毫的疏漏和差錯(cuò)。檢測(cè)者要對(duì)每一種藥的藥物代謝動(dòng)力學(xué)及光譜分析有全面嫻熟的了解及足夠的分析參考資料 ，直到排出體外。,檢測(cè)基質(zhì),1.尿液,尿樣檢測(cè)是興奮劑檢測(cè)的理想樣本。其優(yōu)點(diǎn)在于：取樣方便；對(duì)人無損害；尿液中的藥物濃度高于血液中的藥物濃度；尿液中的其他干擾少。,2.血樣,補(bǔ)充尿樣分析方法的不足，目前尚處于研究探索階段，目前僅用于血液回輸，紅細(xì)胞生成素，生長(zhǎng)激素，絨毛膜促性腺激素，睪

18、酮等的測(cè)量。,3.頭發(fā),在法醫(yī)，毒性分析中已有較長(zhǎng)歷史，但在興奮劑研究中是才興起研究方向。有采樣容易，無損傷，不易作弊的特點(diǎn)，備受關(guān)注。皮質(zhì)類固醇在體內(nèi)消除很快，如果賽前停藥，尿液分析就檢測(cè)不到，而發(fā)樣分析仍可檢出。,4.體液,檢測(cè)步驟,一、篩選方法（1）揮發(fā)性含氮化合物組： 主要檢測(cè)刺激劑。這類藥物多以游離形式排出。（2）難揮發(fā)含氮化合物組： 主要檢測(cè)麻醉陣痛劑和β-阻斷劑。這兩類藥物多以結(jié)合形式排出，因此需先水解，使之游離，再進(jìn)

19、行衍生化后檢測(cè)。（3）利尿劑組： 藥物經(jīng)提取后用高效液相色譜法分析檢測(cè)，此組同時(shí)檢測(cè)2種興奮劑、咖啡因和匹莫林。（4）甾體同化激素組： 此類藥物有的以游離形式，有的以結(jié)合形式排出，我們所用的方法為同時(shí)檢測(cè)。,經(jīng)篩選判為陽性的尿樣，需進(jìn)一步加以確證，根據(jù)規(guī)定，確證結(jié)果須給出藥物或其代謝物的質(zhì)譜圖，因此在確證方法中均使用氣相色譜法-質(zhì)譜聯(lián)用儀，確證時(shí)的分組同篩選方法中所述。（1）揮發(fā)性含氮化合物組 方法同篩選，最后之提取物濃縮后進(jìn)樣于