花椰菜畢業(yè)論文

1、目錄摘要………………………………………………………………………………………1引言………………………………………………………………………………………11材料與方法……………………………………………………………………………31.1材料………………………………………………………………………………31.2實驗方法…………………………………………………………………………31.2.1花椰菜無菌的準(zhǔn)備………………………………………………………31.2

2、.2不同苗齡的外植體的獲得………………………………………………31.2.3AgNO3對不定芽分化的影響……………………………………………31.2.4不定芽的生根培養(yǎng)及再生植株的移栽…………………………………41.3再生頻率與每塊外植體再生芽數(shù)的計算………………………………………42結(jié)果分析………………………………………………………………………………42.1激素濃度對不定芽分化的影響…………………………………………………42.2不同基因型

3、和苗齡對不定芽分化的影響………………………………………52.3AgNO3對外植體分化能力的影響…………………………………………………53小結(jié)與討論……………………………………………………………………………5謝辭………………………………………………………………………………………6參考文獻…………………………………………………………………………………72.外植體類型及部位可實現(xiàn)再生的花椰菜外植體有子葉、下胚軸、葉片、莖段、大田植株的花蕾、花

4、藥、原生質(zhì)體等，而通過子葉、下胚軸和子葉節(jié)直接再生可以保持原有品質(zhì)或親本的優(yōu)良性狀，雖然其對農(nóng)桿菌比較敏感，但因不受時間的限制，再生率很高，且操作方便，是近年來組織培養(yǎng)和遺傳轉(zhuǎn)化應(yīng)用最多的外植體來源。3.苗齡和苗態(tài)在進行花椰菜離體培養(yǎng)時，子葉、下胚軸等外植體的生理年齡也是決定離體培養(yǎng)能否成功的關(guān)鍵因素之一。不同組織由于分化程度、生理狀態(tài)和處理條件等不同，其分化和脫分化的能力不同，再生的難易程度也不一樣。苗齡對外植體的再生有重要的影響，原

5、因可能是細胞在特定的生長發(fā)育時期容易進行分化和脫分化。有學(xué)者認(rèn)為幼嫩的外植體更容易誘導(dǎo)再生芽，分化能力隨著苗齡的增加而下降。一般來說無菌苗苗齡為67d的下胚軸為最佳外植體。苗齡太長，下胚軸導(dǎo)管細胞的形成不利于芽的誘導(dǎo)；相反，若苗齡太短，則不能獲得大量的下胚軸用于實驗，且不利于實驗操作，容易切到生長點，形成假陽性植株。4.培養(yǎng)基建立良好再生體系的一個主要工作是篩選出最佳培養(yǎng)基。一般花椰菜組織培養(yǎng)采用MS和MSB（MSB5有機）為基本培養(yǎng)基

6、，除此之外用于花椰菜組織培養(yǎng)的使用其他培養(yǎng)基進行還未見報道。5.激素成分對于芽的分化最重要的是選擇最佳激素組合。一般來說細胞分裂素有利于芽的分化，生長素有利于根的分化和愈傷組織的形成，細胞分裂素與生長素的比值高有利于芽的分化[3]。6BA是蕓薹屬作物轉(zhuǎn)化中最常用的一種激素，花椰菜、甘藍等以子葉為外植體時，單獨使用以45mgL為宜，與其他激素結(jié)合使用時濃度應(yīng)適當(dāng)減少[4]。嚴(yán)慧玲、潘仰星等[10]用13mgL6BA和NAA相配合也得到了花