花椰菜種質(zhì)資源形態(tài)標(biāo)記與RAPD標(biāo)記研究.pdf

1、本研究以我國(guó)不同生態(tài)類型61份花椰菜為材料，研究了18個(gè)田間形態(tài)性狀，并在上述研究的基礎(chǔ)上，對(duì)61份材料進(jìn)行RAPD分析，從分子水平分析它們之間的親緣關(guān)系，進(jìn)而為花椰菜育種和遺傳改良奠定基礎(chǔ)。主要結(jié)果如下： 1.對(duì)61份花椰菜種質(zhì)材料的18個(gè)形態(tài)性狀的變異進(jìn)行了分析，研究結(jié)果表明：各性狀在不同種質(zhì)材料之間差異顯著，平均變異系數(shù)64.44％。18個(gè)性狀中有10個(gè)質(zhì)量性狀和8個(gè)數(shù)量性狀。質(zhì)量性狀中，“蠟質(zhì)”變異系數(shù)最大，為40.74

2、％；“葉面，變異系數(shù)最小，為10.15％；數(shù)量性狀中，“最大葉長(zhǎng)”變異系數(shù)最大，為265.38％，“球高”變異系數(shù)最小，為12.66％。 2.基于形態(tài)性狀遺傳距離的聚類，結(jié)果表明：在一定程度上反映了材料的地理分布情況，說(shuō)明地理因素對(duì)品種有很大影響。但是，也有極少數(shù)來(lái)自不同地區(qū)的材料遺傳距離表現(xiàn)非常相近，這可能與材料具有相似的環(huán)境條件、相近的人工選擇標(biāo)準(zhǔn)或來(lái)源于同一種質(zhì)資源有關(guān)。 3.經(jīng)條件優(yōu)化獲得應(yīng)用RAPD標(biāo)記分析花椰

3、菜種質(zhì)資源遺傳多樣性的最佳反應(yīng)體系。反應(yīng)采用25μl體系：60 ng模板DNA，0.4 μmol·L<'-1>引物，0.2 mmol·L<'-1>dNTP，1.0 u TaqDNA聚合酶(5U/μl)，1.5 mmmol·L<'-1>MgCh，2.5μl 10xPCR緩沖液，加入滅菌的超純水至25μl。反應(yīng)程序?yàn)椋?4℃預(yù)變性4min后進(jìn)行下列循環(huán)，94℃變性lmin,36℃退火1min,72℃延伸2min，循環(huán)數(shù)40，最后72℃延伸1

4、0min。 4.RAPD分析表明，聚類結(jié)果不能較好地反映品種的地理分布特點(diǎn)，部分不同地區(qū)的材料相互交織在一起。這可能是由國(guó)家或地區(qū)間的品種互引造成的，有些品種地理近源但親緣關(guān)系較遠(yuǎn)，有些品種地理遠(yuǎn)源但親緣關(guān)系較近。 5.形態(tài)標(biāo)記和RAPD標(biāo)記兩種研究方法研究的結(jié)果比較分析：兩種標(biāo)記相似系數(shù)的相關(guān)系數(shù)為0.0342未達(dá)顯著水平。RAPD標(biāo)記檢測(cè)的多態(tài)性是品種DNA水平的差異，而品種的表現(xiàn)型值是品種的基因型值、環(huán)境效應(yīng)和基因