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文檔簡介
1、南京森貝伽生物科技有限公司1人血小板衍生生長因子人血小板衍生生長因子(PDGF)(PDGF)酶聯(lián)免疫分析酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中血小板衍生生長血小板衍生生長因子因子(PDGF)(PDGF)的含量。的含量。實驗原理:實驗原理:本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人血小板衍生生長因子(PD
2、GF)水平。用純化的人血小板衍生生長因子(PDGF)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入血小板衍生生長因子(PDGF),再與HRP標記的血小板衍生生長因子(PDGF)抗體結(jié)合,形成抗體抗原酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血小板衍生生長因子(PDGF)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準
3、曲線計算樣品中人血小板衍生生長因子(PDGF)濃度。試劑盒組成試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個1個酶標包被板14819628℃保存標準品:18ngL0.5ml1瓶0.5ml1瓶28℃保存標準品稀釋液1.5ml1瓶1.5ml1瓶28℃保存酶標試劑3ml1瓶6ml1瓶28℃保存樣品稀釋液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存顯色劑A液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存顯色劑B液3ml1
4、瓶6ml1瓶28℃保存終止液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存濃縮洗滌液(20ml20倍)1瓶(20ml30倍)1瓶28℃保存樣本處理及要求樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固1020分鐘,離心20分鐘左右(20003000轉(zhuǎn)分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。2.血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合1020分鐘后,離心20分鐘左右(20003000轉(zhuǎn)分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成
5、,應該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(20003000轉(zhuǎn)分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。南京森貝伽生物科技有限公司3用完,板條應裝入密封袋中保存。2濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。3各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4請每次測定的同時做標準曲線
6、,最好做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(n5)。5封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6底物請避光保存。7嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。計算:計算:以標準物的濃度為橫坐標,
7、OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。(此圖僅供參考)試劑盒性能:試劑盒性能:1.樣品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。2.批內(nèi)與批見應分別小于9%和11%檢測范圍:檢測范圍:0.8ngL15ngL保存條件及有效期:保存條件及有效期:
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