一株高效降解直鏈烷基苯磺酸鈉降解菌的分離鑒定及特性研究.pdf

1、從合肥市王小郢污水處理廠的污泥中分離得到一株能以直鏈烷基苯磺酸鈉(Linear Alkylbenzene Sulfonates，LAS)為唯一碳源和能源生長的菌株S1。對其形態(tài)、生理生化特性、分類地位及降解特性進(jìn)行了初步研究，菌株S1呈革蘭氏陰性，桿狀或短桿狀，菌落直徑為2～4mm，邊緣平整，不透明呈乳白色，有土腥味；生理生化特性為：對淀粉水解試驗(yàn)、明膠水解試驗(yàn)、葡萄糖發(fā)酵試驗(yàn)、VP試驗(yàn)、檸檬酸鹽試驗(yàn)、吲哚試驗(yàn)、產(chǎn)氨試驗(yàn)、尿素水解試驗(yàn)、

2、過氧化氫酶試驗(yàn)、運(yùn)動性試驗(yàn)反應(yīng)呈陽性，對甲基紅試驗(yàn)、氧化酶試驗(yàn)、硝酸鹽還原試驗(yàn)呈陰性。為進(jìn)一步確定該降解菌的生物分類學(xué)地位，進(jìn)行了16SrRNA分子鑒定，經(jīng)PCR擴(kuò)增獲得了大小約1.5kb的部分16SrRNA基因片段，對部分16SrRNA進(jìn)行了序列測定，并進(jìn)行同源性分析和系統(tǒng)進(jìn)化樹構(gòu)建。結(jié)果表明，該菌株與GenBank中的人蒼白桿菌(AM114409)同源性最高，為98.5％，結(jié)合形態(tài)學(xué)、生理生化鑒定以及16SrRNA分析結(jié)果將菌株S1

3、鑒定為人蒼白桿菌(Ochrobactrum anthropi)。
　　 菌株S1的培養(yǎng)條件優(yōu)化實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，菌株S1利用LAS生長的最適溫度為30℃，最適pH值為7.0，最適裝液量范圍為80-100ml/250mL三角瓶；不同金屬離子對菌株S1的菌體生長影響差異顯著，Ca2+、Na+、Mn2+離子可以提高菌株S1在液體培養(yǎng)基中的生長，Cu2+、Fe2+離子對菌株S1的生長有明顯的抑制作用，K+、Mg2+對菌株S1生長影響不明顯。

4、通氣量、溫度、氮源三因子正交實(shí)驗(yàn)得到的最佳組合為通氣量：100ml/250ml，蛋白胨：0.5g/L，溫度：30℃，三因子對S1菌體生長的影響程度為溫度＞氮源＞通氣量。
　　 底物濃度對菌株S1生長和底物降解的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，菌株S1在LAS的濃度低于1000mg/L環(huán)境中，對LAS的降解率(36h)在80％以上；菌株S1在LAS濃度達(dá)到3500mg/L環(huán)境中仍能生長。
　　 LAS降解相關(guān)酶定位試驗(yàn)結(jié)果表明，離心后的