甲磺隆和直鏈烷基苯磺酸鹽及其降解產(chǎn)物多克隆抗體的制備.pdf

1、為了建立測(cè)定磺酰脲除草劑甲磺隆(Metsulfuron-methyl)殘留的酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)方法(Enzyme linked immunosorbent assay，簡(jiǎn)稱(chēng)ELISA)，以鄰甲酸甲酯苯磺酰胺與琥珀酸酐反應(yīng)合成了半抗原1-[(2-甲酸甲酯)苯磺酰]單胺琥珀酸。以核磁共振H1NMR、薄層色譜、熔點(diǎn)測(cè)定鑒定所制半抗原的化學(xué)結(jié)構(gòu)。用活性酯化法將半抗原分別與牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶聯(lián)制備免疫抗原和包被抗原，并以紫外

2、光譜進(jìn)行鑒定。用抗原免疫新西蘭大白兔獲得了甲磺隆的多克隆抗體，以包被原進(jìn)行包被進(jìn)行間接ELISA法實(shí)驗(yàn)，由方陣滴定確定了包被原的最佳包被濃度為100 ng/mL，此濃度下抗血清的工作濃度(即效價(jià))為1：800000。以此抗體建立的間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA法，得出檢測(cè)甲磺隆的線性范圍在0.7～40 mg/L，最低檢測(cè)限為0.16 mg/L。與甲磺隆結(jié)構(gòu)相似的磺酰脲類(lèi)除草劑的交叉反應(yīng)結(jié)果表明，氯嘧磺隆的交叉反應(yīng)率為38.2％，其他4種除草劑(吡效

3、隆、噻磺隆、胺苯磺隆和氯磺隆)的交叉反應(yīng)率都小于1％。在分別對(duì)檢測(cè)甲磺隆濃度為0.5和5 mg/L的甲醇影響的實(shí)驗(yàn)中，檢測(cè)樣本溶液中添加5～20％的甲醇溶液。結(jié)果表明，隨著甲醇含量的增加，抗體對(duì)甲磺隆的抑制能力不斷減弱，但20％內(nèi)的甲醇含量對(duì)檢測(cè)效果的影響不大。本研究為建立甲磺隆殘留免疫分析方法奠定了基礎(chǔ)。
　　 陰離子表面活性劑直鏈烷基苯磺酸鹽(Linear alkylbenzene sulfonates，簡(jiǎn)稱(chēng)LAS)及其降解

4、產(chǎn)物磺基苯羧酸(Sulfophenyl carboxylic acids，簡(jiǎn)稱(chēng)SPC)共同對(duì)環(huán)境造成了一定危害。根據(jù)LAS和SPC的共同結(jié)構(gòu)磺基苯，制備了抗LAS和SPC的多克隆抗體。通過(guò)磺化4-苯基丁酸合成了4C-SPC作為半抗原，并以紅外、核磁共振H1NMR鑒定所制半抗原的化學(xué)結(jié)構(gòu)。用活性酯化法將半抗原分別與牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶聯(lián)制備免疫抗原和包被抗原。通過(guò)免疫新西蘭大白兔獲得抗LAS和SPC的多克隆抗體，以此