實(shí)驗(yàn)操作基本規(guī)范

1、行為規(guī)范各人自用的藥品各人負(fù)責(zé)，未經(jīng)本人許可，別人不可外借。公用藥品由指定人員負(fù)責(zé)。未經(jīng)負(fù)責(zé)人許可，不可外借外借藥品應(yīng)該以分裝形式分發(fā)。操作基礎(chǔ)取液不可直接把槍探入試劑瓶。應(yīng)從試劑瓶倒少許入燒杯等容器再取樣新進(jìn)的蛋白酶等公用的試劑要分裝保存。實(shí)驗(yàn)應(yīng)該考慮空白和對照的，空白沒做好前不能做樣品。能用天平和密度表換算的情況下，盡量用天平而不是容積型的量器本實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)超凈工作臺的使用：A鍵――開關(guān)電源，同時開啟紫外燈（使用前開啟紫外燈半個小時

2、，工作時應(yīng)把該燈關(guān)閉）B、C鍵―調(diào)節(jié)風(fēng)力大小D鍵關(guān)閉紫外燈使用超凈臺時，應(yīng)注意觀察紫外燈是否已經(jīng)關(guān)閉！！搖床和恒溫培養(yǎng)箱可放置過夜使用，但鼓風(fēng)干燥箱在離開實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該關(guān)閉其電源。干燥箱的設(shè)置溫度不可超過70度。（已經(jīng)設(shè)置好，無須再調(diào)整干燥箱溫度）可調(diào)電爐，切勿將電線接觸爐壁，小心使用電爐，不可將附近的窗簾等易燃物點(diǎn)燃。電泳邊的試劑有毒，使用時小心。三層架的第一層放置干凈的器皿，第三層放置藥品――這些藥品十分昂貴，使用時切勿浪費(fèi)。PE手套用

3、于做有毒實(shí)驗(yàn)，乳膠手套（較貴）用于做含有腐蝕性藥品的實(shí)驗(yàn)。移液槍的使用：抽屜里有數(shù)把無盒裝的移液槍可使用，另兩把裝于盒中僅能用于PCR實(shí)驗(yàn)，桌上的5把移液槍用于做分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，不可隨便使用。對于揮發(fā)性試劑應(yīng)用特定的移液槍。洗滌器皿：先把器皿用肥皂水浸泡過夜，再用清水洗滌兩次，最后再用蒸餾水洗一遍，最后用干燥箱干燥。電子天平：稱量較貴的藥品時，應(yīng)注意少量多次稱量，避免浪費(fèi)。若稱量過量時不可將藥品重新放回藥盒中，以免污染藥品。藥勺不可交叉

4、使用，使用完后用水沖洗干凈，然后用紙擦干凈。稱量有毒藥品的用具應(yīng)經(jīng)過特殊處理。電冰箱：電冰箱里面有強(qiáng)腐蝕性藥品和一些貴重試劑，切勿將其電源關(guān)閉。開關(guān)冰箱門應(yīng)輕緩。水槽：在水槽中倒入有毒廢棄液后，應(yīng)用大量水沖洗。垃圾：垃圾應(yīng)該分類放置，一個用于放置有毒藥品，一個放置廢棄培養(yǎng)基，一個用于放置生活垃圾。藥品的標(biāo)注：配制藥品本人應(yīng)該在藥品上貼上標(biāo)簽，寫上配制者姓名、配置時間、試劑名稱。開水：燒完開水應(yīng)該把開水放置于對面沒有實(shí)驗(yàn)的桌子上。避免飲用

5、水污染，保證試驗(yàn)人員的身體健康。最后離開實(shí)驗(yàn)室的人應(yīng)該檢查實(shí)驗(yàn)室的窗戶，電源，水源有無關(guān)好，切記關(guān)掉干燥箱電源。微波爐不可放入任何金屬物品。只能用于玻璃或者塑料。做完實(shí)驗(yàn)，應(yīng)清理臺面，尤其要處理掉有毒物品，避免給他人造成損害。注意試驗(yàn)室的告示和各種說明。滅過菌的器皿不可隨意打開，避免污染。注意安全，對于任何不了解的藥品或者儀器設(shè)備，不可觸碰，避免給自己或者試驗(yàn)室造成損失。（四）計(jì)量系統(tǒng)：1.稱量系統(tǒng)：（各種天平）臺秤、托盤天平、鈕力擺動

6、天平、光電分子天平、精密電子分析天平2.液體體積的度量：精：量筒、移液管、微量取液器粗：刻度試管、燒杯、錐形瓶3.pH值測量：pH計(jì)：測定溶液中H的直接電位的儀器，主要通過一對電極，在不同的pH溶液中產(chǎn)生不同的電動勢用pH值表示出來。pH試紙：只適用于培養(yǎng)液、酚飽和液、緩沖液或其它試劑溶液的pH值的粗略估計(jì)。而大部分試劑的配制要求嚴(yán)格的pH值，需精確度高（小數(shù)點(diǎn)后兩位）的pH計(jì)。4.OD值測量：光密度、分光光度計(jì)是利用物質(zhì)在可見光和紫外

7、線區(qū)域中的吸收光譜來鑒定該物質(zhì)的性質(zhì)及其含量的一種儀器。它是由光源、單色器、吸收池、接收器、測量儀表或顯示屏幕所組成。OD值是許多溶液中溶質(zhì)定量的方便指標(biāo)之一，通過所產(chǎn)生的單色光而測定某一溶液對該單色光的吸收值，利用它可進(jìn)行核酸溶液定量和純度的初步判斷。（五）離心機(jī)：離心技術(shù)是研究生物的結(jié)構(gòu)和功能中不可缺少的一種物理技術(shù)手段。因?yàn)楦鞣N物質(zhì)在沉淀系數(shù)、浮力、和質(zhì)量等方面有差異，可利用強(qiáng)大的離心力場，使其分離、純化和濃縮。目前有各種各樣的離

8、心機(jī)。可供少于0.05ml到幾升的樣品離心之用。離心技術(shù)應(yīng)用廣泛，包括收集和分離細(xì)胞、細(xì)胞器和生物大分子等。據(jù)其轉(zhuǎn)速的不同，可分為以下幾種類型：1.普通離心機(jī)：最大轉(zhuǎn)速6000rm，最大離心力6000g①醫(yī)用或臺式離心機(jī)：是離心機(jī)中最簡單而廉價的，最常用于收集快速沉降系數(shù)的物質(zhì)，如紅細(xì)胞、粗大的沉淀物、酵母菌和細(xì)菌等。②低速冷凍離心機(jī)：主要用于細(xì)胞、細(xì)胞核、細(xì)胞膜和細(xì)菌的沉淀和收集等。22.高速離心機(jī)：最大轉(zhuǎn)速25000rm，最大離心力

9、89000g有冷凍和常溫兩種，多用于制備和手收集微生物、細(xì)胞碎片、細(xì)胞、大的細(xì)胞器、硫酸銨沉淀物以及免疫沉淀物等。3.超速離心機(jī)：最大轉(zhuǎn)速9000rm，最大離心力694000g。4.臺式超速離心機(jī)：最大轉(zhuǎn)速12000rm，最大離心力625000g。（六）超凈工作臺：內(nèi)有紫外燈、照明燈、還應(yīng)有酒精燈火焰、75%乙醇等滅菌的設(shè)備，是一種提供局部潔凈度的設(shè)備。其原理是鼓風(fēng)機(jī)驅(qū)動空氣，經(jīng)過低、中效的過濾器后，通過工作臺面，使實(shí)驗(yàn)操作區(qū)域成為無菌

10、的環(huán)境。超凈臺按氣流方向的不同大致有幾種類型：①側(cè)流式：凈化后氣流，從左側(cè)或右側(cè)通過工作臺面，流向?qū)?cè)，或者從上往下或從下往上流向?qū)?cè)，他們都能形成氣流屏障而保障臺面無菌。缺點(diǎn)：在凈化氣流和外邊氣體交界處，可因氣體的流向而出現(xiàn)負(fù)壓，使少量的未凈化氣體混入，而造成污染。②外流式：氣流是面向操作人員的方向流動，從而保證外面氣體不能混入。缺點(diǎn)：在進(jìn)行有害物質(zhì)實(shí)驗(yàn)時，對操作人員不利，但可采用有機(jī)玻璃把上半部分遮擋起來，使氣流往下方流出。（七）電