環(huán)境生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教案

1、1實(shí)驗(yàn)一實(shí)驗(yàn)一污染物對(duì)生物在生物化學(xué)和分子水平上的影響污染物對(duì)生物在生物化學(xué)和分子水平上的影響——空氣中空氣中SOSO2對(duì)植物葉片葉綠素含量對(duì)植物葉片葉綠素含量及葉綠素及葉綠素a、b含量比例的影響含量比例的影響[實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康腯（1）掌握植物葉綠素含量的測(cè)定方法）掌握植物葉綠素含量的測(cè)定方法（2）了解）了解SO2對(duì)植物葉綠素含量的影響對(duì)植物葉綠素含量的影響[實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理]（1）用丙酮提取葉綠素）用丙酮提取葉綠素（2）葉綠素）葉綠素

2、a、b的最大吸收峰分別位于的最大吸收峰分別位于663nm和645nm，根據(jù)，根據(jù)LambertBeer定律，可得：定律，可得：Ca（mgL）=12.7D663－2.69D645Cb（mgL）=22.9D645－4.68D663式中：Ca、Ca為葉綠素a、b的濃度。將Ca與Cb相加即得葉綠素總量CT：CT（mgL）=CaCb=20.21A6458.02A663按下列公式計(jì)算葉綠素在葉片中的含量，并計(jì)算葉綠素按下列公式計(jì)算葉綠素在葉片中的含

3、量，并計(jì)算葉綠素a、b的比例。的比例。mgg??葉綠素濃度提取液最終體積稀釋倍數(shù)葉綠素含量（）=葉片鮮重克數(shù)[實(shí)驗(yàn)器材實(shí)驗(yàn)器材]（1）儀器設(shè)備）儀器設(shè)備：分光光度計(jì)；電子天平；研缽；剪刀；：分光光度計(jì)；電子天平；研缽；剪刀；50mL棕色容量瓶；棕色容量瓶；小漏斗；玻璃棒；定量濾紙；吸水紙；滴管；小漏斗；玻璃棒；定量濾紙；吸水紙；滴管；2mL移液管；移液管；50mL燒杯。燒杯。（2）試劑）試劑：丙酮，：丙酮，80%丙酮，石英砂，碳酸鈣粉。

4、丙酮，石英砂，碳酸鈣粉。（3）實(shí)驗(yàn)材料）實(shí)驗(yàn)材料：經(jīng)：經(jīng)SO2熏氣和未經(jīng)熏氣的植物樣品熏氣和未經(jīng)熏氣的植物樣品[實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟]（1）分別剪取兩種處理植物的葉樣，洗凈，擦干，除去中脈，稱取）分別剪取兩種處理植物的葉樣，洗凈，擦干，除去中脈，稱取0.5g，剪碎。剪碎。（2）將剪碎的葉樣置于研缽中，加少許石英砂和碳酸鈣，再加少許丙酮，）將剪碎的葉樣置于研缽中，加少許石英砂和碳酸鈣，再加少許丙酮，磨成勻漿。再加磨成勻漿。再加15mL左右丙酮

5、，攪拌，靜置左右丙酮，攪拌，靜置3min。（3）將提取液過濾至）將提取液過濾至50mL棕色容量瓶中，多次洗滌研缽、研棒。棕色容量瓶中，多次洗滌研缽、研棒。（4）用滴管吸取丙酮，將濾紙上的葉綠素全部洗入容量瓶。用丙酮定容至）用滴管吸取丙酮，將濾紙上的葉綠素全部洗入容量瓶。用丙酮定容至50mL，搖勻。，搖勻。（5）分別?。┓謩e取2mL葉綠素提取液和葉綠素提取液和2mL80%丙酮于丙酮于50mL燒杯，混勻，成燒杯，混勻，成比色液。比色液。3實(shí)

6、驗(yàn)二實(shí)驗(yàn)二污染物對(duì)生物在個(gè)體水平上的影響污染物對(duì)生物在個(gè)體水平上的影響——藻類急性毒性試驗(yàn)藻類急性毒性試驗(yàn)[實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康腯（1）掌握藻類急性毒性試驗(yàn)的方法）掌握藻類急性毒性試驗(yàn)的方法（2）了解毒性試驗(yàn)在有害物質(zhì)的生態(tài)影響評(píng)價(jià)中的應(yīng)用）了解毒性試驗(yàn)在有害物質(zhì)的生態(tài)影響評(píng)價(jià)中的應(yīng)用[實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理]藻類是水生生態(tài)系統(tǒng)中最重要的初級(jí)生產(chǎn)者，影響藻類生長(zhǎng)的主要因子包影響藻類生長(zhǎng)的主要因子包括光、二氧化碳、溫度、括光、二氧化碳、溫度、pH值

7、及氮、磷、微量元素等營養(yǎng)成分。水環(huán)境中的這值及氮、磷、微量元素等營養(yǎng)成分。水環(huán)境中的這些生態(tài)因子的變化會(huì)刺激或抑制藻類的生長(zhǎng)。些生態(tài)因子的變化會(huì)刺激或抑制藻類的生長(zhǎng)。而有毒有害的化學(xué)物質(zhì)進(jìn)入水體，同樣會(huì)刺激或抑制藻類的生長(zhǎng)。低濃度短時(shí)間的接觸可能會(huì)刺激藻類的生長(zhǎng)，但隨著污染物濃度增加，接觸時(shí)間延長(zhǎng)，最終都會(huì)抑制藻類生長(zhǎng)。污染物毒性越強(qiáng)，抑制效應(yīng)需要的劑量越小。因此，可以用半數(shù)效應(yīng)濃度指示污染物的毒性，評(píng)價(jià)污染物對(duì)水生生態(tài)系統(tǒng)的影響。因此

8、，藻類急性毒性試驗(yàn)一方面可以用來評(píng)價(jià)化學(xué)物質(zhì)的毒性，另一方面可以用來評(píng)價(jià)化學(xué)物質(zhì)對(duì)水生生態(tài)系統(tǒng)的影響。所以，水生生態(tài)系統(tǒng)藻類毒性試驗(yàn)已經(jīng)成為許多國家水環(huán)境質(zhì)量監(jiān)測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)方法之一。藻類藻類生長(zhǎng)狀況的觀察采用生物量指標(biāo)，生物量測(cè)定采用光密度法生物量測(cè)定采用光密度法。[實(shí)驗(yàn)器材實(shí)驗(yàn)器材]（1）儀器設(shè)備）儀器設(shè)備：恒溫水??；分光光度計(jì)；照度計(jì)；：恒溫水?。环止夤舛扔?jì)；照度計(jì)；pH試紙；滅菌鍋；三試紙；滅菌鍋；三角瓶；移液管；量筒；燒杯。角瓶；移

9、液管；量筒；燒杯。（2）實(shí)驗(yàn)材料：受試物：實(shí)驗(yàn)材料：受試物：Cd2試驗(yàn)生物：斜生柵藻試驗(yàn)生物：斜生柵藻Scenedesmusobliguus（3）培養(yǎng)基）培養(yǎng)基[實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟]（1）藻類培養(yǎng)基的配制）藻類培養(yǎng)基的配制按配方配制，高壓滅菌后分裝在三角瓶中。（2）藻類預(yù)培養(yǎng)）藻類預(yù)培養(yǎng)準(zhǔn)備試驗(yàn)藻種，包括接種、純化、同步等過程。（3）預(yù)備試驗(yàn)）預(yù)備試驗(yàn)預(yù)備試驗(yàn)的目的在于探明受試物抑制藻類生長(zhǎng)的半數(shù)效應(yīng)濃度（探明受試物抑制藻類生長(zhǎng)的半數(shù)效應(yīng)