蛋白質濃度測定——考馬斯亮藍染色法(實驗報告)

1、生物化學實驗報告——蛋白質濃度測定:考馬斯亮藍染色法1蛋白質濃度測定蛋白質濃度測定——考馬斯亮藍染色法考馬斯亮藍染色法（實驗報告）（實驗報告）實驗日期：2015年4月28日實驗溫度：室溫實驗地點：生物化學與遺傳學實驗室指導老師：班級：2013級生物技術1班姓名：學號：I.實驗目的實驗目的1.學習考馬斯亮藍法測定蛋白質濃度的原理和方法；2.熟悉蛋白質含量測定的影響因素。II.實驗原理實驗原理考馬斯亮藍是根據蛋白質與染料相結合的原理設計的，

2、這是一種迅速、可靠的通過染色法測定溶液中蛋白質濃度的方法。考馬斯亮藍G250在酸性游離狀態(tài)下呈棕紅色，最大吸收波長465nm，與蛋白質結合后變?yōu)樗{色，最大吸收波長595nm，在一定的蛋白質濃度范圍內吸光度與蛋白質含量成正比。蛋白質與考馬斯亮藍G250結合，反應2min即可到達平衡，復合物在室溫下1h內保持穩(wěn)定。蛋白質—考馬斯亮藍G250復合物吸光系數(shù)，使得在測定蛋白質濃度時靈敏度很高，可測微克級蛋白質含量。III.實驗試劑與儀器實驗試劑

3、與儀器1.實驗試劑生物化學實驗報告——蛋白質濃度測定:考馬斯亮藍染色法3標準蛋白μg數(shù)020406080100A59500.5170.8050.9411.1571.1921.4651.4402.樣品測定中試管2支分別加未知濃度蛋白質（或人正常血漿）0.4mL，各加5.0mL考馬斯亮藍試劑搖勻，室溫放置5min，以“0”號管為空白比色，以所測A595于標準曲線查蛋白質含量。V.實驗結果分析實驗結果分析結果分析：實驗未能達到預期的一條直線，