腦CT示基底節(jié)鈣化者的線粒體DNA突變研究.pdf

1、Y911259分類號：R7469密級：單位代碼：10422學(xué)號；200211962⑧山東歲，碩士學(xué)位論文ShendongUnivereityMeeter’曩Theeie論文題目：腦cT示基底節(jié)鈣化者的線粒體DNA突變研究作者姓名專亞指導(dǎo)教師姓名專業(yè)技術(shù)職務(wù)劉新云神經(jīng)病學(xué)劉淑萍副教授李明欣副教授2005年5月13日山東大學(xué)碩士學(xué)位論文腦CT示基底節(jié)鈣化者的線粒體DNA突變研究專業(yè)神經(jīng)病學(xué)碩士研究生劉新云碩士生導(dǎo)師劉淑萍副教授、李明欣副教授

2、摘要目的：基底節(jié)鈣化是腦cT檢查的一個并不少見的征象，以往人們認(rèn)為：腦cT檢查發(fā)現(xiàn)的基底節(jié)鈣化，尤其是蒼白球鈣化者，大多數(shù)沒有神經(jīng)系統(tǒng)病變表現(xiàn)，且年齡在40歲以上，臨床意義如同松果體和脈絡(luò)叢鈣化，屬于生理性鈣化。近年有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)：基底節(jié)鈣化與線粒體功能異常密切相關(guān)。線粒體病是由于線粒體功能異常導(dǎo)致的一組疾病，臨床表現(xiàn)為多系統(tǒng)、多器官受累。目前，我國對線粒體病的研究比較少，臨床上對線粒體病的篩選診斷缺乏有意義的線索，致使很多線粒體病被誤

3、診、漏診。因此，本實驗的目的就是通過對腦cT示基底節(jié)鈣化者的mtDNA點突變進(jìn)行研究，進(jìn)一步探索基底節(jié)鈣化(尤其是蒼白球鈣化)與mtDNA異常的關(guān)系，并探討基底節(jié)鈣化是否可作為線粒體病的篩選診斷指標(biāo)。。材料和方法：收集基底節(jié)鈣化(主要為蒼白球鈣化)病例20例，均為山東大學(xué)齊魯醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院或門診病例。其中17例行肌肉病理活組織檢查，10例確診為MELAS綜合征，3例為血液標(biāo)本。用常規(guī)酚／氯仿法提取肌肉組織的DNA，蛋白酶K鹽析法提取外

4、周血中的DNA，通過PCR方法對以上病例標(biāo)本進(jìn)行mtDNA突變“熱點”一tRNA“’的片段擴(kuò)增。PCR產(chǎn)物用PCRDNA純化試劑盒純化，一部分純化產(chǎn)物用ApaI及AflII限制性內(nèi)切酶酶切(即PCR／RFLP)，12％瓊脂糖凝膠(含EB染液8u1)電泳，另一部分PCR純化產(chǎn)物送上海生工生物技術(shù)有限服務(wù)公司測序，以驗證PCR／RFLP結(jié)果。結(jié)果：1經(jīng)臨床與肌肉病理確診的MELAS病例組：11PCR／RFLP酶切結(jié)果顯示：此組病例中6例檢測