神經(jīng)生物學(xué)研究技術(shù)與方法

1、神經(jīng)生物學(xué)研究技術(shù)與方法,,電生理技術(shù)行為學(xué)腦功能成像技術(shù),腦立體定位儀又稱腦固定裝置(stereotaxic apparatus),,它是利用顱骨外面的標(biāo)志或其它參考點(diǎn)所規(guī)定的三度坐標(biāo)系統(tǒng),來確定皮層下某些神經(jīng)結(jié)構(gòu)的位置,以便在非直視暴露下對(duì)其進(jìn)行定向的刺激、破壞、注射藥物、引導(dǎo)電位等研究。動(dòng)物腦立體定位儀是神經(jīng)解剖、神經(jīng)生理、神經(jīng)藥理和神經(jīng)外科等領(lǐng)域內(nèi)的重要研究設(shè)備，用于對(duì)神經(jīng)結(jié)構(gòu)進(jìn)行定向的注射、刺激、破壞、引導(dǎo)電位等操作，可

2、用于帕金森氏病動(dòng)物模型建立，癲癇動(dòng)物模型建立，腦內(nèi)腫瘤模型建立，學(xué)習(xí)記憶，腦內(nèi)神經(jīng)干細(xì)胞移植，腦缺血等研究。,1 腦的立體定位技術(shù)stereotaxic technique of brain,定位原理,,bregma,,,大鼠顱骨表面,,定位圖譜,,海馬,,,,,,Dual Manipulator Stereotaxic Frame with 18° or 45° Ear Bars ■ 此儀器為神經(jīng)解剖、神經(jīng)生理、神

3、經(jīng)外科等領(lǐng)域的重要研究設(shè)備，WPI的立體定位儀可以提供準(zhǔn)確、穩(wěn)定的定位程序，適用於大多數(shù)小型動(dòng)物的實(shí)驗(yàn),Stereotaxic Frame,(a) After a mouse is mounted on a stereotaxic frame and its skull is exposed, the bregma is localized (arrowhead). Antero-posterior (AP) axis is indic

4、ated on left. (b) The needle tip is moved onto the bregma (arrowhead). (c) The tip is moved posteriorly and laterally to an appropriate stereotaxic coordinate. The position of the tip (arrow) is marked by a marker pen. (

5、d) A small hole (arrow) is made in the skull by using an electric drill. (e) The needle is brought down to an appropriate coordinate through the hole (arrow).,,,,,Digital Stereotaxic Frame with 18° or 45°Ear Ba

6、rs,數(shù)位,定位儀,,微量注射器,電動(dòng)顱骨鉆,,,Mouse and Neonatal Rat Adaptor ■ 針對(duì)小鼠及幼大鼠頭部構(gòu)造，提供無創(chuàng)且穩(wěn)定的固定方式,,,1、根據(jù)體重腹腔注射麻醉藥,,待麻醉后固定在定位儀上,,用雙氧水擦除腦膜，直至露出前囟和后囟并標(biāo)記。,,找出需要定位的點(diǎn)，電轉(zhuǎn)打孔。,,進(jìn)針給藥縫合,,2 單細(xì)胞記錄技術(shù),Single-unit recording胞外動(dòng)作電位是指通過微電極在細(xì)胞外記錄到的單細(xì)胞動(dòng)作

7、電位，可以使用玻璃或金屬微電極 If the electrode is a microelectrode, with a tip size of 3 to 10 micrometres, the electrode will often isolate the activity of a single neuron,,,記錄電極,電極材料：鎢、鉑銥合金、不銹鋼等尖端形狀：尖端鈍圓、尖端銳利（角度）絕緣物質(zhì)和絕緣方法：Epoxy、Gl

8、ass記錄電阻(測(cè)量頻率1000Hz)：500k?2M電極尾端電極個(gè)數(shù)：?jiǎn)坞姌O、多電極,單電極尖端,多電極陣列,microelectrode,玻璃微電極,,麻醉狀態(tài)下記錄實(shí)驗(yàn)方法,Plexon放大器玻璃微電極(1-3 MΩ),,麻醉狀態(tài)下記錄,,清醒狀態(tài)下單細(xì)胞記錄裝置,學(xué)習(xí)和記憶的行為學(xué)研究,1 經(jīng)典的條件反射和操作式條件反射2 迷宮學(xué)習(xí)模型,Morris water maze 水迷宮,Eight-arm maze

9、八臂迷宮,Y迷宮Y maze,,學(xué)習(xí)和記憶的行為學(xué)研究,3 一次性被動(dòng)回避,,跳臺(tái)實(shí)驗(yàn),避暗法-達(dá)標(biāo)訓(xùn)練 (Passive avoidance response, trials to criterion),小雞一次性厭惡回避反應(yīng),學(xué)習(xí)和記憶的行為學(xué)研究,延遲性與樣本不匹配操作任務(wù)（delayed nonmatching to sample task)。,正確的百分率和延遲的時(shí)間可作為這一任務(wù)的成績(jī)指標(biāo)。,,其它方法,神 經(jīng)