實(shí)驗(yàn)動物微生物學(xué)分類及控制

1、實(shí)驗(yàn)動物微生物學(xué)分類及控制,第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)動物微生物學(xué)控制,,實(shí)驗(yàn)動物如受到病原微生物、寄生蟲的污染，其正常狀態(tài)的平衡將遭致破壞，引起動物發(fā)病，從而給動物的生產(chǎn)及實(shí)驗(yàn)的正常進(jìn)行帶來嚴(yán)重影響。有的不立即發(fā)病，但處于可能發(fā)病的污染狀態(tài)，即機(jī)會致病因子的潛在性感染時，如再施加做為附加因素的實(shí)驗(yàn)處理，動物可能發(fā)病。,一.實(shí)驗(yàn)動物微生物質(zhì)量控制的原因,病原體在動物體內(nèi)增殖和導(dǎo)致動物發(fā)病，致使降低動物的生產(chǎn)效率及動物質(zhì)量，使動物生產(chǎn)設(shè)施蒙受重大經(jīng)濟(jì)

2、損失，影響實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行。此外還存在許多人獸共患的傳染病，從事動物生產(chǎn)、實(shí)驗(yàn)的飼養(yǎng)者，實(shí)驗(yàn)人員也有發(fā)病的危險。,1．引起實(shí)驗(yàn)動物的疾病和死亡 不同的實(shí)驗(yàn)動物遺傳背景不同,對某種疾病的易感性也不同.某些烈性傳染病如鼠痘、兔出血癥、犬細(xì)小病毒性腸炎等的流行，可導(dǎo)致動物大批死亡或質(zhì)量下降，從而給動物的生產(chǎn)和實(shí)驗(yàn)的正常進(jìn)行帶來嚴(yán)重影響。,2.干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果 實(shí)驗(yàn)動物的微生物和寄生蟲感染可不同程度干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果，從而影響研究工作的準(zhǔn)確性和可靠性，甚至

3、得出錯誤的結(jié)論。隱性感染常導(dǎo)致動物生理生化指標(biāo)的改變，使實(shí)驗(yàn)得不到應(yīng)有的結(jié)果?；蛞?qū)嶒?yàn)處置，動物抵抗力下降，使隱性感染顯性化，導(dǎo)致疾病的發(fā)生。,,,掠奪宿主的營養(yǎng);體外寄生蟲對動物的騷擾;對宿主機(jī)體產(chǎn)生機(jī)械性損傷;對宿主產(chǎn)生毒性作用;對宿主生理、生化和免疫系統(tǒng)的影響。,實(shí)驗(yàn)動物感染寄生蟲后，不僅蟲體對機(jī)體造成一定的損害，動物機(jī)體也對蟲產(chǎn)生反應(yīng)，使動物機(jī)體的生理、生化及免疫學(xué)指標(biāo)發(fā)生改變，從而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。,3.人獸共患病 許多

4、實(shí)驗(yàn)動物傳染病為人獸共患性疾病，這些傳染病可在人與動物之間傳播流行，因而也對飼養(yǎng)和研究人員的健康構(gòu)成威脅。特別是那些在動物呈隱性感染、而對人類呈致死性感染的病原微生物（如流行性出血熱病毒），應(yīng)引起我們高度重視。,4．影響生物制品的質(zhì)量 使用在人身上的血清、疫苗和別的生物制品必須是安全的、無污染的。如病原微生物污染了細(xì)胞培養(yǎng)物、腫瘤移植物或以動物組織和細(xì)胞為生產(chǎn)原料的生物制品，不僅干擾實(shí)驗(yàn)，而且還可將病原擴(kuò)散，以至危害人類的健康。如果實(shí)

5、驗(yàn)動物是用于生產(chǎn)生物制品的目的，其來源必須擺脫大量的能引發(fā)人類潛在人獸共患病的、帶有特別病原體的動物群體。,,隨著現(xiàn)代科學(xué)的發(fā)展和西方動物保護(hù)主義運(yùn)動的影響，實(shí)驗(yàn)動物科學(xué)已從過去注重于動物的飼養(yǎng)管理和實(shí)驗(yàn)操作，愈來愈集中于動物的福利和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的質(zhì)量。實(shí)驗(yàn)動物使用總量下降，高質(zhì)量實(shí)驗(yàn)動物使用量增加。,早在七十年代，發(fā)達(dá)國家的實(shí)驗(yàn)動物在使用量上已經(jīng)趨于平衡。但是，高質(zhì)量實(shí)驗(yàn)動物的使用數(shù)量呈上升趨勢，普通級、清潔級動物逐漸被SPF級取代。目前

6、發(fā)達(dá)國家使用的大、小鼠等小型實(shí)驗(yàn)動物大多為SPF級. 2019年在全國基本普及使用清潔級實(shí)驗(yàn)大鼠、小鼠。某些重點(diǎn)科研項(xiàng)目用實(shí)驗(yàn)動物，達(dá)到SPF級水平。,1.感染源 (1)內(nèi)源性 (2)外源性 2.傳播途徑: 實(shí)驗(yàn)動物;生物材料;工作人員;材料和設(shè)備 3.易感動物,二、實(shí)驗(yàn)動物微生物和寄生蟲感染的基本要素,重要的人獸共患病主要的烈性傳染病常見的微生物和寄生蟲感染,三、實(shí)驗(yàn)動物常見感染性疾病,流行性出血熱弓

7、形蟲病淋巴細(xì)胞脈絡(luò)從腦膜炎沙門菌病狂犬病猴B病毒感染猴結(jié)核病,1.重要的人獸共患病,鼠痘兔出血癥（兔瘟）,2.主要的烈性傳染病,鼠肝炎病毒感染仙臺病毒感染鼠肺支原體病嗜肺巴斯德桿菌病小鼠呼腸孤3型病毒感染球蟲病犬細(xì)小病毒感染犬瘟熱,3.常見的微生物和寄生蟲感染,不同等級嚙齒類、兔、犬和猴等實(shí)驗(yàn)動物要求排除的細(xì)菌、病毒、寄生蟲應(yīng)根據(jù)國家技術(shù)監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布的有關(guān)實(shí)驗(yàn)動物微生物學(xué)等級及監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn)(GB14922

8、.2—2019、GB14922.1—2019)。,四、實(shí)驗(yàn)動物的微生物和寄生蟲控制國家標(biāo)準(zhǔn),第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)動物的微生物等級,GB 14922-1994《實(shí)驗(yàn)動物 微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)監(jiān)測等級（嚙齒類和兔類）》 將我國實(shí)驗(yàn)動物分為四級，即一級動物（普通級）、二級動物（清潔動物）、三級動物（無特殊病原體動物）和四級動物（無菌動物）。 GB 14922.2-2019《實(shí)驗(yàn)動物 微生物學(xué)等級及監(jiān)測》(2019年5月1日開始實(shí)施)新標(biāo)準(zhǔn)對

9、實(shí)驗(yàn)動物等級進(jìn)行了重新設(shè)定，將實(shí)驗(yàn)小鼠和大鼠的微生物學(xué)等級分為清潔級、無特定病原體級（SPF）和無菌級，取消了普通級。豚鼠、地鼠和兔仍保留四級。犬和猴分為普通級和SPF級。,一、普通級動物,定義普通級動物（Conventional Animal CV）是在微生物學(xué)控制上要求最低的動物，它要求不攜帶人獸共患病和動物烈性傳染病的病原。如鼠痘病毒、流行性出血熱病毒、弓形體等，飼養(yǎng)于普通環(huán)境中。應(yīng)用：舉例說明,應(yīng)用,用于醫(yī)學(xué)生物學(xué)中的

10、教學(xué)示范和科學(xué)實(shí)驗(yàn)的預(yù)實(shí)驗(yàn)。,二、清潔級動物,定義 清潔級動物（ Clean animal ， CL ）是指除普通動物應(yīng)排除的病原體外，不攜帶對動物健康危害大和對科學(xué)研究干擾較大的病原的動物，如鼠肝炎病毒、仙臺病毒、體外寄生蟲等，飼養(yǎng)于半屏障環(huán)境。應(yīng)用：舉例說明,應(yīng)用,國際上普遍認(rèn)為CL動物僅適合于短期或部分科研試驗(yàn)。根據(jù)國外實(shí)驗(yàn)動物工作發(fā)展及國內(nèi)的具體條件，CL動物近年來在我國得到了廣泛的應(yīng)用。它較普通動物健康，又較SPF易達(dá)

11、到質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，在動物實(shí)驗(yàn)研究中可免受動物疾病的干擾，其敏感性及重復(fù)性亦較好。因此，我國針對自己的實(shí)際情況認(rèn)為這類動物目前可適用于大多數(shù)科研實(shí)驗(yàn)，應(yīng)是國內(nèi)科研工作主要要求的標(biāo)準(zhǔn)級別的動物，可應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究的各個領(lǐng)域。,三、無特定病原體動物,定義 無特定病原體動物（ Specific Pathogen free,SPF ）是指除清潔級動物應(yīng)排除的病原外，不攜帶主要潛在感染或條件致病和對科學(xué)實(shí)驗(yàn)干擾大的病原的動物，又稱SPF動物。飼養(yǎng)于

12、屏障環(huán)境。應(yīng)用：舉例說明,應(yīng)用,選擇SPF動物，避免了病原體的隱性感染或潛伏感染及某些條件性致病菌對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，因此國際上公認(rèn)SPF動物適用于所有科研試驗(yàn)，是目前國際標(biāo)準(zhǔn)級別的實(shí)驗(yàn)動物，疫苗生產(chǎn)必須應(yīng)用SPF動物。利用SPF雞生產(chǎn)疫苗、抗體：麻疹流行性腮腺炎二聯(lián)活疫苗、抗輪狀病毒卵黃免疫球蛋白、抗大腸桿菌O157∶H7雞卵黃抗體等。,藥物安全評價：實(shí)驗(yàn)?zāi)芊癯掷m(xù)取決于污染的可能性老年病學(xué)研究：SPF動物的壽命普遍超過普通動物免

13、疫學(xué)研究： 免疫缺陷動物只有SPF級或以上級別 動物才能保種、繁殖.,四、無菌動物,定義 無菌動物（ Germ-Free Animal,GF）是指無可檢出的一切生命體的動物。飼養(yǎng)于隔離環(huán)境。應(yīng)用：舉例說明,無菌動物的發(fā)展過程,1895—1910年 解決了無菌生命能否生存的問題。Pasteur認(rèn)為動物沒有腸道菌參與不能生存。生物學(xué)家NenK提出了相反的看法，由此開展了一場學(xué)術(shù)上的爭論。十年后，1895年

14、Nuttall 和Thierfelder經(jīng)剖腹產(chǎn)，用牛奶飼喂獲得了無菌豚鼠，第八天后處死，腸道內(nèi)未檢出細(xì)菌。1898年Scottellies獲得了無菌雞，無菌環(huán)境中養(yǎng)活了17天，至此建立了無菌生命可以存活的論點(diǎn)。,無菌動物的特點(diǎn),（一）形態(tài)學(xué)改變消化系統(tǒng)：無菌動物盲腸及其內(nèi)容物重量可達(dá)體重25%，多數(shù)情況下，無菌動物盲腸是普通動物的5—10倍。無菌動物由于盲腸膨大，腸壁菲薄，常易發(fā)生腸扭轉(zhuǎn)導(dǎo)致腸壁破裂而死亡。有關(guān)盲腸膨大原因尚無定論。

15、血液循環(huán)系統(tǒng)：心臟相對變小，白細(xì)胞數(shù)少，且數(shù)量波動范圍小，與無病原體入侵有關(guān)。免疫系統(tǒng)：由于無菌動物幾乎沒有受過抗原刺激，其免疫機(jī)能基本上處于原始狀態(tài)。胸腺中網(wǎng)狀上皮細(xì)胞較大，其胞漿內(nèi)泡狀結(jié)構(gòu)和溶酶體較少，胸腺和淋巴結(jié)處于不活躍狀態(tài)，脾臟變小。,（二）生理學(xué)改變,免疫功能：由于網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)、淋巴組織發(fā)育不良，淋巴小結(jié)內(nèi)缺乏生發(fā)中心，產(chǎn)生γ-球蛋白的能力很弱。血清中IgM、IgG水平低，免疫功能處于原始狀態(tài)，應(yīng)答速度慢，過敏反應(yīng)、對異

16、體移植的排斥反應(yīng)以及自身免疫現(xiàn)象消失或減弱。用低分子無抗原飼料飼喂無菌動物時，血清中幾乎不存在γ-球蛋白和特異性抗體。生長率：無菌禽類>普通禽類 ；無菌大小鼠≈普通大小鼠 無菌豚鼠、家兔<普通豚鼠、家兔,繁殖率：規(guī)律同生長率代謝：血中含氮量少，腸管對水的吸收率低，代謝周期比普通動物長。營養(yǎng)：無菌動物體內(nèi)不能合成VB和VK，易發(fā)生缺乏癥。抗輻射能力：無菌動物能力強(qiáng)于普通動物，無菌小鼠抗實(shí)驗(yàn)性燙傷引

17、起的休克死亡能力也強(qiáng)于普通小鼠。壽命：無菌動物>普通動物,無菌動物的應(yīng)用,在微生物學(xué)研究中的應(yīng)用在免疫學(xué)研究中的應(yīng)用在放射醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用在營養(yǎng)、代謝研究中的應(yīng)用在老年病學(xué)研究中的應(yīng)用,在心血管疾病研究中的應(yīng)用在毒理學(xué)研究中的應(yīng)用在腫瘤學(xué)研究中的應(yīng)用在宇航醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用在寄生蟲學(xué)研究中的應(yīng)用在口腔醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用,抗體制備研究 普通動物體內(nèi)細(xì)菌種類多，很難制備較純的抗體;無菌動物缺乏抗原刺激，免疫系統(tǒng)

18、處于“休眠”狀態(tài),對外來刺激，有迅速、單一和持久作出反應(yīng)的特性，如果接種單一的菌株，會產(chǎn)生較純的、高效價的、且不會污染其他微生物的抗體。,五、悉生動物,悉生動物也稱已知菌動物或已知菌叢動物，是指在無菌動物體內(nèi)植入已知微生物的動物。屬四級動物，飼養(yǎng)于隔離系統(tǒng)。分為單菌、雙菌和多菌動物。,悉生動物的特性,悉生動物腸道內(nèi)存在能合成某種維生素和氨基酸的細(xì)菌，不象GF動物發(fā)生維生素缺乏癥，生活力較強(qiáng)，抵抗力明顯增加，易于飼養(yǎng)管理。中國藥檢所利用

19、五聯(lián)菌悉生動物（大腸埃希氏桿菌、表皮葡萄球菌、白色葡萄球菌、糞鏈球菌和乳酸桿菌）可替代無菌動物進(jìn)行藥物檢定。,悉生動物在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用,,微生物學(xué)研究在無菌動物斷奶前后，接種一種或多種菌，可觀察這些細(xì)菌對機(jī)體的作用。了解細(xì)菌之間及細(xì)菌與機(jī)體之間相互關(guān)系和菌群失調(diào)現(xiàn)象。觀察機(jī)體、微生物、致病因子三方面相互作用的關(guān)系。,第三節(jié) 潔凈動物與普通動物的 特性比較,潔凈動物是指來源于剖腹產(chǎn)，實(shí)行嚴(yán)格的微生物控制，飼養(yǎng)

20、于空氣凈化設(shè)施內(nèi)的動物，主要包括：清潔動物、SPF動物、悉生動物和無菌動物。,一、各等級動物的相關(guān)關(guān)系,二、微生物控制比較,由于動物分類等級不同，因而其微生物控制程度也不一致，與之相對應(yīng)的動物飼養(yǎng)環(huán)境及飼養(yǎng)管理方法也各不相同。,按微生物控制程度的實(shí)驗(yàn)動物分類原則,,,,三、對科研實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響的比較,四等級動物優(yōu)缺點(diǎn)比較,四、如何選擇不同等級的實(shí)驗(yàn)動物？,,GF、 GN動物在絕對屏障內(nèi)維持，管理復(fù)雜，無菌狀態(tài)的保持難、產(chǎn)量低、價格高，實(shí)際

21、應(yīng)用有限。 GN動物多用于研究微生物與微生物、微生物與宿主間相互關(guān)系的動物模型。SPF動物在相對屏障中維持，易管理、產(chǎn)量大、價格低。因其不攜帶病原體，不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，在發(fā)達(dá)國家己廣泛應(yīng)用，是目前國際標(biāo)準(zhǔn)級別的實(shí)驗(yàn)動物。,五.等級動物優(yōu)缺點(diǎn)比較,CL動物近年來在我國得到了廣泛的應(yīng)用。它較普通動物健康，又較SPF易達(dá)到質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，在動物實(shí)驗(yàn)研究中可免受動物疾病的干擾，其敏感性及重復(fù)性亦較好，是國內(nèi)科研工作主要要求的標(biāo)準(zhǔn)級別的動物，可應(yīng)用于生物

22、醫(yī)學(xué)研究的各個領(lǐng)域。,選擇標(biāo)準(zhǔn),對于實(shí)驗(yàn)動物的微生物學(xué)級別選擇，應(yīng)根據(jù)其各級動物的特點(diǎn)、應(yīng)用范圍及課題的水平高低，選用相匹配的微生物學(xué)級別的實(shí)驗(yàn)動物。一般而言，教學(xué)示范選用普通動物，清潔動物是國內(nèi)科研工作要求的標(biāo)準(zhǔn)動物，適合于大多數(shù)科研課題，而SPF動物則是國際標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)動物，對于一些具有國際交流意義的重大課題，最好選用SPF動物，但無菌及悉生動物為非常規(guī)動物，僅在特殊課題需要時才選用。,,注：“+”可能或必須用；“-”不可能或適用；“

23、*”不用或不能用,不同等級動物在生命科學(xué)的應(yīng)用,（一）監(jiān)測意義 實(shí)施微生物學(xué)與寄生蟲學(xué)監(jiān)測，是保證實(shí)驗(yàn)動物質(zhì)量及標(biāo)準(zhǔn)化的必要手段。通過監(jiān)測可掌握動物群中病毒、細(xì)菌、寄生蟲的流行情況，及時診斷感染性疾病，發(fā)現(xiàn)并控制其傳播，以保證實(shí)驗(yàn)動物的健康。,第四節(jié)、實(shí)驗(yàn)動物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)質(zhì)量監(jiān)測,（二）監(jiān)測內(nèi)容 不同級別實(shí)驗(yàn)動物的微生物和寄生蟲監(jiān)測內(nèi)容不同，見國家標(biāo)準(zhǔn)GBl4922.1—2019和GBl4922.2—2019

24、 。（三）檢驗(yàn)方法 目前使用國標(biāo)推薦的方法和詳細(xì)檢驗(yàn)程序。病原菌以分離培養(yǎng)鑒定為主，病毒以檢測抗體為主，寄生蟲以鏡檢為主。,病毒常用檢測方法有血清學(xué)和病原學(xué)檢測細(xì)菌學(xué)常用的檢測方法是進(jìn)行病原菌的分離培養(yǎng)真菌監(jiān)測主要采用分離培養(yǎng)法（沙式培養(yǎng)基）寄生蟲監(jiān)測采用肉眼觀和鏡下觀察,（四）檢驗(yàn)程序 抽取動物↓編號↓體外檢查↓麻醉↓取血——血清檢查病毒抗體或其他病原的抗體↓體外寄生蟲檢查——皮膚

25、取樣——真菌檢查↓ 臟器、腸內(nèi)容物、——無菌解剖——?dú)夤芊置谖?、腸內(nèi)容物、糞便，體內(nèi)寄生蟲檢查 ↓ 臟器分離細(xì)菌檢測↓檢測報告,規(guī)定了實(shí)驗(yàn)動物質(zhì)量判定原則，即：經(jīng)檢測，如有一項(xiàng)指標(biāo)不符合該級別標(biāo)準(zhǔn)要求，則判為不符合該級別標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)檢驗(yàn)結(jié)果，由檢驗(yàn)人員及其負(fù)責(zé)人簽發(fā)檢測報告。,（五）報告,第五節(jié) 實(shí)驗(yàn)動物的衛(wèi)生防疫與隔離措施,實(shí)驗(yàn)動物（除大型或稀有實(shí)驗(yàn)動物），不應(yīng)采取疫苗接種或藥物治療

26、第一，應(yīng)用疫苗或治療制劑可能干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果，而使實(shí)驗(yàn)無效。如使用抗生素或磺胺類藥物可使動物的肝、膽、腎等臟器組織產(chǎn)生毒性損傷，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果；,第二，經(jīng)過治療或免疫的動物，外表健康，但仍帶菌或帶毒，成為潛在的傳染源。如沙門氏菌即使采取藥物治療，也不能使其從動物群中徹底根除。又如小鼠肝炎病毒，雖用疫苗免疫可以產(chǎn)生免疫力，但有些小鼠仍可帶毒，使其在小鼠群中長期存在；第三，對小型實(shí)驗(yàn)動物，采取治療措施，尤其是需用特殊藥物的個體治療，經(jīng)濟(jì)上也不合

27、算。,一、實(shí)驗(yàn)動物的防疫原則,隔離飼養(yǎng)：各種動物要分開飼養(yǎng)，嚴(yán)禁混養(yǎng)在一起。防止交叉感染。引進(jìn)動物要嚴(yán)格檢疫：依據(jù)國家檢測標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行，要從具有動物質(zhì)量合格證的單位引進(jìn)動物。堅(jiān)持衛(wèi)生消毒制度：杜絕各種微生物的侵入和繁殖。其中定期對動物房舍和飼養(yǎng)用具的消毒是必不可少的。,飼養(yǎng)管理人員要定期健康檢查，有人畜共患病者，應(yīng)調(diào)離與動物接觸的工作崗位。保種單位要對保種的動物定期進(jìn)行質(zhì)量檢查，發(fā)現(xiàn)問題及時更新種群。對國標(biāo)要求必須實(shí)施預(yù)防接種的實(shí)驗(yàn)

28、動物要定期進(jìn)行免疫接種。嚴(yán)格防止野生動物侵入實(shí)驗(yàn)動物室，對死亡動物進(jìn)行無害化處理。,二、平時的預(yù)防措施,①飼養(yǎng)人員應(yīng)嚴(yán)格按照不同等級實(shí)驗(yàn)動物的飼養(yǎng)管 理和衛(wèi)生防疫制度和操作規(guī)程，認(rèn)真做好各項(xiàng)記 錄，發(fā)現(xiàn)情況，及時報告。 ②實(shí)驗(yàn)動物設(shè)施周圍應(yīng)無傳染源，不得飼養(yǎng)非實(shí)驗(yàn) 用家畜家禽，防止昆蟲及野生動物侵入。 ③堅(jiān)持平時衛(wèi)生消毒制度，降低環(huán)境設(shè)施中的病原 體含量。 ④不從疫區(qū)引進(jìn)實(shí)驗(yàn)動物。,⑤各類

29、動物應(yīng)分室飼養(yǎng)，以防交叉感染。飼養(yǎng)室 嚴(yán)禁非飼養(yǎng)人員出入和各類人員互串，購買或領(lǐng) 用動物者不得進(jìn)入飼養(yǎng)室內(nèi)。 ⑥飼料和墊料庫房應(yīng)保持干燥、通風(fēng)、無蟲、無 鼠、飼料應(yīng)達(dá)到相應(yīng)的國家標(biāo)準(zhǔn)。 ⑦飼養(yǎng)人員和獸醫(yī)技術(shù)人員應(yīng)每年進(jìn)行健康檢查， 患有傳染性疾病的人員不應(yīng)從事實(shí)驗(yàn)動物工作。,三、發(fā)生疫病時的撲滅措施,①及時發(fā)現(xiàn)、診斷和上報疫情，并通知鄰近單位做 好預(yù)防工作。 ②迅速隔離患病動

30、物，污染的環(huán)境和器具緊急消毒。 ③若發(fā)生危害性大的疫病，如鼠痘、流行性出血熱 等應(yīng)采取封鎖等綜合性措施。疫情撲滅經(jīng)消毒處 理后一個月方可解除封鎖。 ④病死和淘汰動物應(yīng)采取焚燒等措施合理處理。 ⑤應(yīng)及時報上級管理部門和防疫部門。,四、消毒措施,隨時消毒：在發(fā)生傳染病時，為了及時消滅剛從患病動物體內(nèi)排出的病原體而采取的消毒措施。消毒的對象包括患病動物所在的房舍、隔離場所以及被患病動物分泌物、

31、排泄物污染和可能污染的一切場所、籠具等。通常在解除封鎖前，進(jìn)行定期的多次消毒，患病動物隔離舍應(yīng)每天和隨時進(jìn)行消毒。,預(yù)防性消毒：結(jié)合平時的飼養(yǎng)管理定期對實(shí)驗(yàn)動物房、籠架具、飲水等進(jìn)行定期消毒，以達(dá)到預(yù)防一般傳染病的目的。終末消毒：在患病動物解除隔離、痊愈或死亡后，或者在疫區(qū)解除封鎖之前，為了消滅疫區(qū)內(nèi)可能殘留的病原體所進(jìn)行的全面徹底的大消毒。,五、隔離措施,隔離患病動物和可疑感染的動物是防制傳染病的重要措施之一。隔離是為了控制傳染源，

32、防止健康動物繼續(xù)受到傳染，以便將疫情控制在最小范圍內(nèi)就地予以撲滅。隔離時應(yīng)選擇不易散播病原體、消毒處理方便的地方或房舍進(jìn)行。如患病動物數(shù)目較多，可集中隔離在原來的動物房內(nèi)。,隔離場所禁止閑雜人員和動物出入和接近。工作人中員出入應(yīng)遵守消毒制度。隔離區(qū)內(nèi)的用具、飼料、糞便等，未經(jīng)徹底消毒處理，不得運(yùn)出。對于發(fā)生烈性人獸共患?。ㄈ缌餍行猿鲅獰岬龋┑膭游锶海瑧?yīng)及時采取有效措施，全群撲殺，嚴(yán)格消毒，防止疫情進(jìn)一步擴(kuò)散。,第六節(jié) 潔凈動物的培育及

33、 飼養(yǎng)管理,(一)無菌動物的培育,主要采用生物凈化法即剖腹產(chǎn)技術(shù)。對于小動物，多用子宮摘除術(shù)；大動物，多采用子宮切開術(shù)。器械消毒剖腹產(chǎn)母鼠及帶乳母鼠的準(zhǔn)備子宮摘除術(shù)胎仔處理剖腹產(chǎn)仔鼠的哺育無菌檢測,,在無菌隔離器中進(jìn)行,一、無菌動物的培育及飼養(yǎng)管理,,,剖腹產(chǎn)母鼠與帶乳鼠的準(zhǔn)備 選擇合適的母鼠作為剖腹產(chǎn)母鼠，按實(shí)驗(yàn)要求，10～12周齡鼠，雌雄鼠以1：1合籠，每日早晚兩次觀察有無陰道栓，或用陰道拭子涂片染色，

34、檢查其中有無精子。以出現(xiàn)陰道栓或發(fā)現(xiàn)精子作為妊娠半天計(jì)算。剖腹產(chǎn)手術(shù)應(yīng)在妊娠19.5天為好。 另選擇無菌母鼠作為代乳鼠。剖腹產(chǎn)母鼠與帶乳鼠應(yīng)同步交配. 帶乳鼠較剖腹產(chǎn)鼠提前2-3天交配。,,剖腹產(chǎn)仔鼠的哺育,（1）人工哺乳（2）代乳方法 由無菌子宮摘除術(shù)獲得胎仔，由哺乳中的無菌小鼠給予代乳。乳姆鼠的選擇一般要考慮其綜合性能，選擇母性強(qiáng)的個體作為乳姆鼠。,,①將代乳母鼠仔鼠留下2—3只，其他棄掉，優(yōu)秀的可棄去全部親生仔鼠。

35、②將代乳母鼠籠內(nèi)的墊料充分分散到被代乳仔鼠身上，悄悄地置于代乳鼠腋下。③一但確認(rèn)被代乳鼠吸吮代乳鼠的乳汁，就將代乳鼠自產(chǎn)仔鼠棄掉。④代乳4周齡即可離乳。,無菌檢測,對乳姆鼠、剖腹產(chǎn)仔鼠的無菌檢測，應(yīng)在手術(shù)后的7、12、25天進(jìn)行，對了解動物體內(nèi)的微生物狀況，保證動物的質(zhì)量極為重要。,（二）悉生動物的培育,傳入 授入已知微生物材料 無菌隔離器 無菌動物,,,二、SPF動物、清潔