實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)分類及控制

1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)分類及控制,第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)控制,,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物如受到病原微生物、寄生蟲的污染，其正常狀態(tài)的平衡將遭致破壞，引起動(dòng)物發(fā)病，從而給動(dòng)物的生產(chǎn)及實(shí)驗(yàn)的正常進(jìn)行帶來(lái)嚴(yán)重影響。有的不立即發(fā)病，但處于可能發(fā)病的污染狀態(tài)，即機(jī)會(huì)致病因子的潛在性感染時(shí)，如再施加做為附加因素的實(shí)驗(yàn)處理，動(dòng)物可能發(fā)病。,一.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物質(zhì)量控制的原因,病原體在動(dòng)物體內(nèi)增殖和導(dǎo)致動(dòng)物發(fā)病，致使降低動(dòng)物的生產(chǎn)效率及動(dòng)物質(zhì)量，使動(dòng)物生產(chǎn)設(shè)施蒙受重大經(jīng)濟(jì)

2、損失，影響實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行。此外還存在許多人獸共患的傳染病，從事動(dòng)物生產(chǎn)、實(shí)驗(yàn)的飼養(yǎng)者，實(shí)驗(yàn)人員也有發(fā)病的危險(xiǎn)。,1．引起實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的疾病和死亡 不同的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物遺傳背景不同,對(duì)某種疾病的易感性也不同.某些烈性傳染病如鼠痘、兔出血癥、犬細(xì)小病毒性腸炎等的流行，可導(dǎo)致動(dòng)物大批死亡或質(zhì)量下降，從而給動(dòng)物的生產(chǎn)和實(shí)驗(yàn)的正常進(jìn)行帶來(lái)嚴(yán)重影響。,2.干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的微生物和寄生蟲感染可不同程度干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果，從而影響研究工作的準(zhǔn)確性和可靠性，甚至

3、得出錯(cuò)誤的結(jié)論。隱性感染常導(dǎo)致動(dòng)物生理生化指標(biāo)的改變，使實(shí)驗(yàn)得不到應(yīng)有的結(jié)果?；蛞?qū)嶒?yàn)處置，動(dòng)物抵抗力下降，使隱性感染顯性化，導(dǎo)致疾病的發(fā)生。,,,掠奪宿主的營(yíng)養(yǎng);體外寄生蟲對(duì)動(dòng)物的騷擾;對(duì)宿主機(jī)體產(chǎn)生機(jī)械性損傷;對(duì)宿主產(chǎn)生毒性作用;對(duì)宿主生理、生化和免疫系統(tǒng)的影響。,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物感染寄生蟲后，不僅蟲體對(duì)機(jī)體造成一定的損害，動(dòng)物機(jī)體也對(duì)蟲產(chǎn)生反應(yīng)，使動(dòng)物機(jī)體的生理、生化及免疫學(xué)指標(biāo)發(fā)生改變，從而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。,3.人獸共患病 許多

4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物傳染病為人獸共患性疾病，這些傳染病可在人與動(dòng)物之間傳播流行，因而也對(duì)飼養(yǎng)和研究人員的健康構(gòu)成威脅。特別是那些在動(dòng)物呈隱性感染、而對(duì)人類呈致死性感染的病原微生物（如流行性出血熱病毒），應(yīng)引起我們高度重視。,4．影響生物制品的質(zhì)量 使用在人身上的血清、疫苗和別的生物制品必須是安全的、無(wú)污染的。如病原微生物污染了細(xì)胞培養(yǎng)物、腫瘤移植物或以動(dòng)物組織和細(xì)胞為生產(chǎn)原料的生物制品，不僅干擾實(shí)驗(yàn)，而且還可將病原擴(kuò)散，以至危害人類的健康。如果實(shí)

5、驗(yàn)動(dòng)物是用于生產(chǎn)生物制品的目的，其來(lái)源必須擺脫大量的能引發(fā)人類潛在人獸共患病的、帶有特別病原體的動(dòng)物群體。,,隨著現(xiàn)代科學(xué)的發(fā)展和西方動(dòng)物保護(hù)主義運(yùn)動(dòng)的影響，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)已從過(guò)去注重于動(dòng)物的飼養(yǎng)管理和實(shí)驗(yàn)操作，愈來(lái)愈集中于動(dòng)物的福利和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的質(zhì)量。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用總量下降，高質(zhì)量實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用量增加。,早在七十年代，發(fā)達(dá)國(guó)家的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在使用量上已經(jīng)趨于平衡。但是，高質(zhì)量實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的使用數(shù)量呈上升趨勢(shì)，普通級(jí)、清潔級(jí)動(dòng)物逐漸被SPF級(jí)取代。目前

6、發(fā)達(dá)國(guó)家使用的大、小鼠等小型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物大多為SPF級(jí). 2019年在全國(guó)基本普及使用清潔級(jí)實(shí)驗(yàn)大鼠、小鼠。某些重點(diǎn)科研項(xiàng)目用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，達(dá)到SPF級(jí)水平。,1.感染源 (1)內(nèi)源性 (2)外源性 2.傳播途徑: 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物;生物材料;工作人員;材料和設(shè)備 3.易感動(dòng)物,二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物和寄生蟲感染的基本要素,重要的人獸共患病主要的烈性傳染病常見的微生物和寄生蟲感染,三、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物常見感染性疾病,流行性出血熱弓

7、形蟲病淋巴細(xì)胞脈絡(luò)從腦膜炎沙門菌病狂犬病猴B病毒感染猴結(jié)核病,1.重要的人獸共患病,鼠痘兔出血癥（兔瘟）,2.主要的烈性傳染病,鼠肝炎病毒感染仙臺(tái)病毒感染鼠肺支原體病嗜肺巴斯德桿菌病小鼠呼腸孤3型病毒感染球蟲病犬細(xì)小病毒感染犬瘟熱,3.常見的微生物和寄生蟲感染,不同等級(jí)嚙齒類、兔、犬和猴等實(shí)驗(yàn)動(dòng)物要求排除的細(xì)菌、病毒、寄生蟲應(yīng)根據(jù)國(guó)家技術(shù)監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布的有關(guān)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)等級(jí)及監(jiān)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)(GB14922

8、.2—2019、GB14922.1—2019)。,四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的微生物和寄生蟲控制國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的微生物等級(jí),GB 14922-1994《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)監(jiān)測(cè)等級(jí)（嚙齒類和兔類）》 將我國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為四級(jí)，即一級(jí)動(dòng)物（普通級(jí)）、二級(jí)動(dòng)物（清潔動(dòng)物）、三級(jí)動(dòng)物（無(wú)特殊病原體動(dòng)物）和四級(jí)動(dòng)物（無(wú)菌動(dòng)物）。 GB 14922.2-2019《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 微生物學(xué)等級(jí)及監(jiān)測(cè)》(2019年5月1日開始實(shí)施)新標(biāo)準(zhǔn)對(duì)

9、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物等級(jí)進(jìn)行了重新設(shè)定，將實(shí)驗(yàn)小鼠和大鼠的微生物學(xué)等級(jí)分為清潔級(jí)、無(wú)特定病原體級(jí)（SPF）和無(wú)菌級(jí)，取消了普通級(jí)。豚鼠、地鼠和兔仍保留四級(jí)。犬和猴分為普通級(jí)和SPF級(jí)。,一、普通級(jí)動(dòng)物,定義普通級(jí)動(dòng)物（Conventional Animal CV）是在微生物學(xué)控制上要求最低的動(dòng)物，它要求不攜帶人獸共患病和動(dòng)物烈性傳染病的病原。如鼠痘病毒、流行性出血熱病毒、弓形體等，飼養(yǎng)于普通環(huán)境中。應(yīng)用：舉例說(shuō)明,應(yīng)用,用于醫(yī)學(xué)生物學(xué)中的

10、教學(xué)示范和科學(xué)實(shí)驗(yàn)的預(yù)實(shí)驗(yàn)。,二、清潔級(jí)動(dòng)物,定義 清潔級(jí)動(dòng)物（ Clean animal ， CL ）是指除普通動(dòng)物應(yīng)排除的病原體外，不攜帶對(duì)動(dòng)物健康危害大和對(duì)科學(xué)研究干擾較大的病原的動(dòng)物，如鼠肝炎病毒、仙臺(tái)病毒、體外寄生蟲等，飼養(yǎng)于半屏障環(huán)境。應(yīng)用：舉例說(shuō)明,應(yīng)用,國(guó)際上普遍認(rèn)為CL動(dòng)物僅適合于短期或部分科研試驗(yàn)。根據(jù)國(guó)外實(shí)驗(yàn)動(dòng)物工作發(fā)展及國(guó)內(nèi)的具體條件，CL動(dòng)物近年來(lái)在我國(guó)得到了廣泛的應(yīng)用。它較普通動(dòng)物健康，又較SPF易達(dá)

11、到質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中可免受動(dòng)物疾病的干擾，其敏感性及重復(fù)性亦較好。因此，我國(guó)針對(duì)自己的實(shí)際情況認(rèn)為這類動(dòng)物目前可適用于大多數(shù)科研實(shí)驗(yàn)，應(yīng)是國(guó)內(nèi)科研工作主要要求的標(biāo)準(zhǔn)級(jí)別的動(dòng)物，可應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究的各個(gè)領(lǐng)域。,三、無(wú)特定病原體動(dòng)物,定義 無(wú)特定病原體動(dòng)物（ Specific Pathogen free,SPF ）是指除清潔級(jí)動(dòng)物應(yīng)排除的病原外，不攜帶主要潛在感染或條件致病和對(duì)科學(xué)實(shí)驗(yàn)干擾大的病原的動(dòng)物，又稱SPF動(dòng)物。飼養(yǎng)于

12、屏障環(huán)境。應(yīng)用：舉例說(shuō)明,應(yīng)用,選擇SPF動(dòng)物，避免了病原體的隱性感染或潛伏感染及某些條件性致病菌對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，因此國(guó)際上公認(rèn)SPF動(dòng)物適用于所有科研試驗(yàn)，是目前國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)級(jí)別的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，疫苗生產(chǎn)必須應(yīng)用SPF動(dòng)物。利用SPF雞生產(chǎn)疫苗、抗體：麻疹流行性腮腺炎二聯(lián)活疫苗、抗輪狀病毒卵黃免疫球蛋白、抗大腸桿菌O157∶H7雞卵黃抗體等。,藥物安全評(píng)價(jià)：實(shí)驗(yàn)?zāi)芊癯掷m(xù)取決于污染的可能性老年病學(xué)研究：SPF動(dòng)物的壽命普遍超過(guò)普通動(dòng)物免

13、疫學(xué)研究： 免疫缺陷動(dòng)物只有SPF級(jí)或以上級(jí)別 動(dòng)物才能保種、繁殖.,四、無(wú)菌動(dòng)物,定義 無(wú)菌動(dòng)物（ Germ-Free Animal,GF）是指無(wú)可檢出的一切生命體的動(dòng)物。飼養(yǎng)于隔離環(huán)境。應(yīng)用：舉例說(shuō)明,無(wú)菌動(dòng)物的發(fā)展過(guò)程,1895—1910年 解決了無(wú)菌生命能否生存的問(wèn)題。Pasteur認(rèn)為動(dòng)物沒(méi)有腸道菌參與不能生存。生物學(xué)家NenK提出了相反的看法，由此開展了一場(chǎng)學(xué)術(shù)上的爭(zhēng)論。十年后，1895年

14、Nuttall 和Thierfelder經(jīng)剖腹產(chǎn)，用牛奶飼喂獲得了無(wú)菌豚鼠，第八天后處死，腸道內(nèi)未檢出細(xì)菌。1898年Scottellies獲得了無(wú)菌雞，無(wú)菌環(huán)境中養(yǎng)活了17天，至此建立了無(wú)菌生命可以存活的論點(diǎn)。,無(wú)菌動(dòng)物的特點(diǎn),（一）形態(tài)學(xué)改變消化系統(tǒng)：無(wú)菌動(dòng)物盲腸及其內(nèi)容物重量可達(dá)體重25%，多數(shù)情況下，無(wú)菌動(dòng)物盲腸是普通動(dòng)物的5—10倍。無(wú)菌動(dòng)物由于盲腸膨大，腸壁菲薄，常易發(fā)生腸扭轉(zhuǎn)導(dǎo)致腸壁破裂而死亡。有關(guān)盲腸膨大原因尚無(wú)定論。

15、血液循環(huán)系統(tǒng)：心臟相對(duì)變小，白細(xì)胞數(shù)少，且數(shù)量波動(dòng)范圍小，與無(wú)病原體入侵有關(guān)。免疫系統(tǒng)：由于無(wú)菌動(dòng)物幾乎沒(méi)有受過(guò)抗原刺激，其免疫機(jī)能基本上處于原始狀態(tài)。胸腺中網(wǎng)狀上皮細(xì)胞較大，其胞漿內(nèi)泡狀結(jié)構(gòu)和溶酶體較少，胸腺和淋巴結(jié)處于不活躍狀態(tài)，脾臟變小。,（二）生理學(xué)改變,免疫功能：由于網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)、淋巴組織發(fā)育不良，淋巴小結(jié)內(nèi)缺乏生發(fā)中心，產(chǎn)生γ-球蛋白的能力很弱。血清中IgM、IgG水平低，免疫功能處于原始狀態(tài)，應(yīng)答速度慢，過(guò)敏反應(yīng)、對(duì)異

16、體移植的排斥反應(yīng)以及自身免疫現(xiàn)象消失或減弱。用低分子無(wú)抗原飼料飼喂無(wú)菌動(dòng)物時(shí)，血清中幾乎不存在γ-球蛋白和特異性抗體。生長(zhǎng)率：無(wú)菌禽類>普通禽類 ；無(wú)菌大小鼠≈普通大小鼠 無(wú)菌豚鼠、家兔<普通豚鼠、家兔,繁殖率：規(guī)律同生長(zhǎng)率代謝：血中含氮量少，腸管對(duì)水的吸收率低，代謝周期比普通動(dòng)物長(zhǎng)。營(yíng)養(yǎng)：無(wú)菌動(dòng)物體內(nèi)不能合成VB和VK，易發(fā)生缺乏癥?？馆椛淠芰Γ簾o(wú)菌動(dòng)物能力強(qiáng)于普通動(dòng)物，無(wú)菌小鼠抗實(shí)驗(yàn)性燙傷引

17、起的休克死亡能力也強(qiáng)于普通小鼠。壽命：無(wú)菌動(dòng)物>普通動(dòng)物,無(wú)菌動(dòng)物的應(yīng)用,在微生物學(xué)研究中的應(yīng)用在免疫學(xué)研究中的應(yīng)用在放射醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用在營(yíng)養(yǎng)、代謝研究中的應(yīng)用在老年病學(xué)研究中的應(yīng)用,在心血管疾病研究中的應(yīng)用在毒理學(xué)研究中的應(yīng)用在腫瘤學(xué)研究中的應(yīng)用在宇航醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用在寄生蟲學(xué)研究中的應(yīng)用在口腔醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用,抗體制備研究 普通動(dòng)物體內(nèi)細(xì)菌種類多，很難制備較純的抗體;無(wú)菌動(dòng)物缺乏抗原刺激，免疫系統(tǒng)

18、處于“休眠”狀態(tài),對(duì)外來(lái)刺激，有迅速、單一和持久作出反應(yīng)的特性，如果接種單一的菌株，會(huì)產(chǎn)生較純的、高效價(jià)的、且不會(huì)污染其他微生物的抗體。,五、悉生動(dòng)物,悉生動(dòng)物也稱已知菌動(dòng)物或已知菌叢動(dòng)物，是指在無(wú)菌動(dòng)物體內(nèi)植入已知微生物的動(dòng)物。屬四級(jí)動(dòng)物，飼養(yǎng)于隔離系統(tǒng)。分為單菌、雙菌和多菌動(dòng)物。,悉生動(dòng)物的特性,悉生動(dòng)物腸道內(nèi)存在能合成某種維生素和氨基酸的細(xì)菌，不象GF動(dòng)物發(fā)生維生素缺乏癥，生活力較強(qiáng)，抵抗力明顯增加，易于飼養(yǎng)管理。中國(guó)藥檢所利用

19、五聯(lián)菌悉生動(dòng)物（大腸埃希氏桿菌、表皮葡萄球菌、白色葡萄球菌、糞鏈球菌和乳酸桿菌）可替代無(wú)菌動(dòng)物進(jìn)行藥物檢定。,悉生動(dòng)物在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用,,微生物學(xué)研究在無(wú)菌動(dòng)物斷奶前后，接種一種或多種菌，可觀察這些細(xì)菌對(duì)機(jī)體的作用。了解細(xì)菌之間及細(xì)菌與機(jī)體之間相互關(guān)系和菌群失調(diào)現(xiàn)象。觀察機(jī)體、微生物、致病因子三方面相互作用的關(guān)系。,第三節(jié) 潔凈動(dòng)物與普通動(dòng)物的 特性比較,潔凈動(dòng)物是指來(lái)源于剖腹產(chǎn)，實(shí)行嚴(yán)格的微生物控制，飼養(yǎng)

20、于空氣凈化設(shè)施內(nèi)的動(dòng)物，主要包括：清潔動(dòng)物、SPF動(dòng)物、悉生動(dòng)物和無(wú)菌動(dòng)物。,一、各等級(jí)動(dòng)物的相關(guān)關(guān)系,二、微生物控制比較,由于動(dòng)物分類等級(jí)不同，因而其微生物控制程度也不一致，與之相對(duì)應(yīng)的動(dòng)物飼養(yǎng)環(huán)境及飼養(yǎng)管理方法也各不相同。,按微生物控制程度的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分類原則,,,,三、對(duì)科研實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響的比較,四等級(jí)動(dòng)物優(yōu)缺點(diǎn)比較,四、如何選擇不同等級(jí)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物？,,GF、 GN動(dòng)物在絕對(duì)屏障內(nèi)維持，管理復(fù)雜，無(wú)菌狀態(tài)的保持難、產(chǎn)量低、價(jià)格高，實(shí)際

21、應(yīng)用有限。 GN動(dòng)物多用于研究微生物與微生物、微生物與宿主間相互關(guān)系的動(dòng)物模型。SPF動(dòng)物在相對(duì)屏障中維持，易管理、產(chǎn)量大、價(jià)格低。因其不攜帶病原體，不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，在發(fā)達(dá)國(guó)家己廣泛應(yīng)用，是目前國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)級(jí)別的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。,五.等級(jí)動(dòng)物優(yōu)缺點(diǎn)比較,CL動(dòng)物近年來(lái)在我國(guó)得到了廣泛的應(yīng)用。它較普通動(dòng)物健康，又較SPF易達(dá)到質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中可免受動(dòng)物疾病的干擾，其敏感性及重復(fù)性亦較好，是國(guó)內(nèi)科研工作主要要求的標(biāo)準(zhǔn)級(jí)別的動(dòng)物，可應(yīng)用于生物

22、醫(yī)學(xué)研究的各個(gè)領(lǐng)域。,選擇標(biāo)準(zhǔn),對(duì)于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的微生物學(xué)級(jí)別選擇，應(yīng)根據(jù)其各級(jí)動(dòng)物的特點(diǎn)、應(yīng)用范圍及課題的水平高低，選用相匹配的微生物學(xué)級(jí)別的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。一般而言，教學(xué)示范選用普通動(dòng)物，清潔動(dòng)物是國(guó)內(nèi)科研工作要求的標(biāo)準(zhǔn)動(dòng)物，適合于大多數(shù)科研課題，而SPF動(dòng)物則是國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，對(duì)于一些具有國(guó)際交流意義的重大課題，最好選用SPF動(dòng)物，但無(wú)菌及悉生動(dòng)物為非常規(guī)動(dòng)物，僅在特殊課題需要時(shí)才選用。,,注：“+”可能或必須用；“-”不可能或適用；“

23、*”不用或不能用,不同等級(jí)動(dòng)物在生命科學(xué)的應(yīng)用,（一）監(jiān)測(cè)意義 實(shí)施微生物學(xué)與寄生蟲學(xué)監(jiān)測(cè)，是保證實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量及標(biāo)準(zhǔn)化的必要手段。通過(guò)監(jiān)測(cè)可掌握動(dòng)物群中病毒、細(xì)菌、寄生蟲的流行情況，及時(shí)診斷感染性疾病，發(fā)現(xiàn)并控制其傳播，以保證實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的健康。,第四節(jié)、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)和寄生蟲學(xué)質(zhì)量監(jiān)測(cè),（二）監(jiān)測(cè)內(nèi)容 不同級(jí)別實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的微生物和寄生蟲監(jiān)測(cè)內(nèi)容不同，見國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GBl4922.1—2019和GBl4922.2—2019

24、 。（三）檢驗(yàn)方法 目前使用國(guó)標(biāo)推薦的方法和詳細(xì)檢驗(yàn)程序。病原菌以分離培養(yǎng)鑒定為主，病毒以檢測(cè)抗體為主，寄生蟲以鏡檢為主。,病毒常用檢測(cè)方法有血清學(xué)和病原學(xué)檢測(cè)細(xì)菌學(xué)常用的檢測(cè)方法是進(jìn)行病原菌的分離培養(yǎng)真菌監(jiān)測(cè)主要采用分離培養(yǎng)法（沙式培養(yǎng)基）寄生蟲監(jiān)測(cè)采用肉眼觀和鏡下觀察,（四）檢驗(yàn)程序 抽取動(dòng)物↓編號(hào)↓體外檢查↓麻醉↓取血——血清檢查病毒抗體或其他病原的抗體↓體外寄生蟲檢查——皮膚

25、取樣——真菌檢查↓ 臟器、腸內(nèi)容物、——無(wú)菌解剖——?dú)夤芊置谖?、腸內(nèi)容物、糞便，體內(nèi)寄生蟲檢查 ↓ 臟器分離細(xì)菌檢測(cè)↓檢測(cè)報(bào)告,規(guī)定了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量判定原則，即：經(jīng)檢測(cè)，如有一項(xiàng)指標(biāo)不符合該級(jí)別標(biāo)準(zhǔn)要求，則判為不符合該級(jí)別標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)檢驗(yàn)結(jié)果，由檢驗(yàn)人員及其負(fù)責(zé)人簽發(fā)檢測(cè)報(bào)告。,（五）報(bào)告,第五節(jié) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的衛(wèi)生防疫與隔離措施,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物（除大型或稀有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物），不應(yīng)采取疫苗接種或藥物治療

26、第一，應(yīng)用疫苗或治療制劑可能干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果，而使實(shí)驗(yàn)無(wú)效。如使用抗生素或磺胺類藥物可使動(dòng)物的肝、膽、腎等臟器組織產(chǎn)生毒性損傷，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果；,第二，經(jīng)過(guò)治療或免疫的動(dòng)物，外表健康，但仍帶菌或帶毒，成為潛在的傳染源。如沙門氏菌即使采取藥物治療，也不能使其從動(dòng)物群中徹底根除。又如小鼠肝炎病毒，雖用疫苗免疫可以產(chǎn)生免疫力，但有些小鼠仍可帶毒，使其在小鼠群中長(zhǎng)期存在；第三，對(duì)小型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，采取治療措施，尤其是需用特殊藥物的個(gè)體治療，經(jīng)濟(jì)上也不合

27、算。,一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的防疫原則,隔離飼養(yǎng)：各種動(dòng)物要分開飼養(yǎng)，嚴(yán)禁混養(yǎng)在一起。防止交叉感染。引進(jìn)動(dòng)物要嚴(yán)格檢疫：依據(jù)國(guó)家檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行，要從具有動(dòng)物質(zhì)量合格證的單位引進(jìn)動(dòng)物。堅(jiān)持衛(wèi)生消毒制度：杜絕各種微生物的侵入和繁殖。其中定期對(duì)動(dòng)物房舍和飼養(yǎng)用具的消毒是必不可少的。,飼養(yǎng)管理人員要定期健康檢查，有人畜共患病者，應(yīng)調(diào)離與動(dòng)物接觸的工作崗位。保種單位要對(duì)保種的動(dòng)物定期進(jìn)行質(zhì)量檢查，發(fā)現(xiàn)問(wèn)題及時(shí)更新種群。對(duì)國(guó)標(biāo)要求必須實(shí)施預(yù)防接種的實(shí)驗(yàn)

28、動(dòng)物要定期進(jìn)行免疫接種。嚴(yán)格防止野生動(dòng)物侵入實(shí)驗(yàn)動(dòng)物室，對(duì)死亡動(dòng)物進(jìn)行無(wú)害化處理。,二、平時(shí)的預(yù)防措施,①飼養(yǎng)人員應(yīng)嚴(yán)格按照不同等級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的飼養(yǎng)管 理和衛(wèi)生防疫制度和操作規(guī)程，認(rèn)真做好各項(xiàng)記 錄，發(fā)現(xiàn)情況，及時(shí)報(bào)告。 ②實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施周圍應(yīng)無(wú)傳染源，不得飼養(yǎng)非實(shí)驗(yàn) 用家畜家禽，防止昆蟲及野生動(dòng)物侵入。 ③堅(jiān)持平時(shí)衛(wèi)生消毒制度，降低環(huán)境設(shè)施中的病原 體含量。 ④不從疫區(qū)引進(jìn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。,⑤各類

29、動(dòng)物應(yīng)分室飼養(yǎng)，以防交叉感染。飼養(yǎng)室 嚴(yán)禁非飼養(yǎng)人員出入和各類人員互串，購(gòu)買或領(lǐng) 用動(dòng)物者不得進(jìn)入飼養(yǎng)室內(nèi)。 ⑥飼料和墊料庫(kù)房應(yīng)保持干燥、通風(fēng)、無(wú)蟲、無(wú) 鼠、飼料應(yīng)達(dá)到相應(yīng)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。 ⑦飼養(yǎng)人員和獸醫(yī)技術(shù)人員應(yīng)每年進(jìn)行健康檢查， 患有傳染性疾病的人員不應(yīng)從事實(shí)驗(yàn)動(dòng)物工作。,三、發(fā)生疫病時(shí)的撲滅措施,①及時(shí)發(fā)現(xiàn)、診斷和上報(bào)疫情，并通知鄰近單位做 好預(yù)防工作。 ②迅速隔離患病動(dòng)

30、物，污染的環(huán)境和器具緊急消毒。 ③若發(fā)生危害性大的疫病，如鼠痘、流行性出血熱 等應(yīng)采取封鎖等綜合性措施。疫情撲滅經(jīng)消毒處 理后一個(gè)月方可解除封鎖。 ④病死和淘汰動(dòng)物應(yīng)采取焚燒等措施合理處理。 ⑤應(yīng)及時(shí)報(bào)上級(jí)管理部門和防疫部門。,四、消毒措施,隨時(shí)消毒：在發(fā)生傳染病時(shí)，為了及時(shí)消滅剛從患病動(dòng)物體內(nèi)排出的病原體而采取的消毒措施。消毒的對(duì)象包括患病動(dòng)物所在的房舍、隔離場(chǎng)所以及被患病動(dòng)物分泌物、

31、排泄物污染和可能污染的一切場(chǎng)所、籠具等。通常在解除封鎖前，進(jìn)行定期的多次消毒，患病動(dòng)物隔離舍應(yīng)每天和隨時(shí)進(jìn)行消毒。,預(yù)防性消毒：結(jié)合平時(shí)的飼養(yǎng)管理定期對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房、籠架具、飲水等進(jìn)行定期消毒，以達(dá)到預(yù)防一般傳染病的目的。終末消毒：在患病動(dòng)物解除隔離、痊愈或死亡后，或者在疫區(qū)解除封鎖之前，為了消滅疫區(qū)內(nèi)可能殘留的病原體所進(jìn)行的全面徹底的大消毒。,五、隔離措施,隔離患病動(dòng)物和可疑感染的動(dòng)物是防制傳染病的重要措施之一。隔離是為了控制傳染源，

32、防止健康動(dòng)物繼續(xù)受到傳染，以便將疫情控制在最小范圍內(nèi)就地予以撲滅。隔離時(shí)應(yīng)選擇不易散播病原體、消毒處理方便的地方或房舍進(jìn)行。如患病動(dòng)物數(shù)目較多，可集中隔離在原來(lái)的動(dòng)物房?jī)?nèi)。,隔離場(chǎng)所禁止閑雜人員和動(dòng)物出入和接近。工作人中員出入應(yīng)遵守消毒制度。隔離區(qū)內(nèi)的用具、飼料、糞便等，未經(jīng)徹底消毒處理，不得運(yùn)出。對(duì)于發(fā)生烈性人獸共患?。ㄈ缌餍行猿鲅獰岬龋┑膭?dòng)物群，應(yīng)及時(shí)采取有效措施，全群撲殺，嚴(yán)格消毒，防止疫情進(jìn)一步擴(kuò)散。,第六節(jié) 潔凈動(dòng)物的培育及

33、 飼養(yǎng)管理,(一)無(wú)菌動(dòng)物的培育,主要采用生物凈化法即剖腹產(chǎn)技術(shù)。對(duì)于小動(dòng)物，多用子宮摘除術(shù)；大動(dòng)物，多采用子宮切開術(shù)。器械消毒剖腹產(chǎn)母鼠及帶乳母鼠的準(zhǔn)備子宮摘除術(shù)胎仔處理剖腹產(chǎn)仔鼠的哺育無(wú)菌檢測(cè),,在無(wú)菌隔離器中進(jìn)行,一、無(wú)菌動(dòng)物的培育及飼養(yǎng)管理,,,剖腹產(chǎn)母鼠與帶乳鼠的準(zhǔn)備 選擇合適的母鼠作為剖腹產(chǎn)母鼠，按實(shí)驗(yàn)要求，10～12周齡鼠，雌雄鼠以1：1合籠，每日早晚兩次觀察有無(wú)陰道栓，或用陰道拭子涂片染色，

34、檢查其中有無(wú)精子。以出現(xiàn)陰道栓或發(fā)現(xiàn)精子作為妊娠半天計(jì)算。剖腹產(chǎn)手術(shù)應(yīng)在妊娠19.5天為好。 另選擇無(wú)菌母鼠作為代乳鼠。剖腹產(chǎn)母鼠與帶乳鼠應(yīng)同步交配. 帶乳鼠較剖腹產(chǎn)鼠提前2-3天交配。,,剖腹產(chǎn)仔鼠的哺育,（1）人工哺乳（2）代乳方法 由無(wú)菌子宮摘除術(shù)獲得胎仔，由哺乳中的無(wú)菌小鼠給予代乳。乳姆鼠的選擇一般要考慮其綜合性能，選擇母性強(qiáng)的個(gè)體作為乳姆鼠。,,①將代乳母鼠仔鼠留下2—3只，其他棄掉，優(yōu)秀的可棄去全部親生仔鼠。

35、②將代乳母鼠籠內(nèi)的墊料充分分散到被代乳仔鼠身上，悄悄地置于代乳鼠腋下。③一但確認(rèn)被代乳鼠吸吮代乳鼠的乳汁，就將代乳鼠自產(chǎn)仔鼠棄掉。④代乳4周齡即可離乳。,無(wú)菌檢測(cè),對(duì)乳姆鼠、剖腹產(chǎn)仔鼠的無(wú)菌檢測(cè)，應(yīng)在手術(shù)后的7、12、25天進(jìn)行，對(duì)了解動(dòng)物體內(nèi)的微生物狀況，保證動(dòng)物的質(zhì)量極為重要。,（二）悉生動(dòng)物的培育,傳入 授入已知微生物材料 無(wú)菌隔離器 無(wú)菌動(dòng)物,,,二、SPF動(dòng)物、清潔