顯微鏡基礎(chǔ)知識

1、顯微鏡基礎(chǔ)知識 技術(shù)交流,,,主要內(nèi)容,顯微鏡的歷史光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識顯微鏡的分類及正確了解和使用顯微鏡顯微鏡的安裝和維護(hù)保養(yǎng),顯微鏡簡史,顯微鏡是用來對微小物體進(jìn)行視覺或攝影放大的儀器。顯微鏡必須具備三種功能：產(chǎn)生標(biāo)本的放大圖像可分辨圖像的細(xì)微結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)可被人眼及攝影裝置分辨的細(xì)微結(jié)構(gòu),圖1所示為英國顯微學(xué)家Robert Hooke在1660年發(fā)明的一種復(fù)合型顯微鏡。這種類似工藝品顯微鏡在標(biāo)本的附近裝有物鏡，它的調(diào)

2、焦方式采用轉(zhuǎn)動顯微鏡的鏡筒來改變物鏡與標(biāo)本之間的距離來實(shí)現(xiàn). 圖1 中顯微鏡的采用油燈和裝滿水的球形瓶來照明。燈發(fā)出的光線為散射光，通過球形瓶后匯聚在標(biāo)本上。這類早期的顯微鏡存在色差（或球差），在白光照明的情況下其圖像存在藍(lán)色和紅色的光暈。,顯微鏡簡史,因?yàn)楹芏嗟氖褂谜呔怯醚壑苯訉︼@微鏡進(jìn)行觀察，所以了解顯微鏡與眼晴之間的相互關(guān)系顯得很重要。人眼具有區(qū)別可見光譜范圍可從紫光到紅光，但人眼無法區(qū)別紫外光和紅外光。人眼也可感覺

3、從黑色到白色之間的所有的亮度灰階。這樣，對于人眼可看到的圖像來說，它應(yīng)具有可見光譜范圍內(nèi)的顏色變化及光亮度變化。人眼視網(wǎng)膜上接受光顏色的傳感器為錐細(xì)胞，能區(qū)別光亮度而不能區(qū)別光顏色的為桿細(xì)胞。這些細(xì)胞位于人眼內(nèi)后面的視網(wǎng)膜上。眼的前面（見圖1）包括虹膜、彎曲的角膜分別用于接受光線和將其聚焦到視網(wǎng)膜上。,要使圖像看起來清晰，在視網(wǎng)膜上的圖像應(yīng)有一個恰當(dāng)?shù)囊暯?。在相鄰視網(wǎng)膜細(xì)胞之間的光強(qiáng)度變化，使眼可區(qū)分其上面成像的細(xì)節(jié)。此外相鄰細(xì)節(jié)之間應(yīng)

4、有足夠的對比度使圖像可分辨。因?yàn)槿搜壑型哥R改變形狀的能力有限，位于很近的目標(biāo)無法在視網(wǎng)膜上成像。在一般的情況下，人眼成像的距離為10英寸或25CM。,顯微鏡簡史,大約在500年之前，簡單的玻璃放大鏡就已經(jīng)發(fā)明出來了。這種放大鏡為凸透鏡（中間比邊緣厚）。將放大鏡放于標(biāo)本與眼晴之間即可進(jìn)行調(diào)焦。這種“簡單顯微鏡”可通知過增加視角將圖像放大并成于視網(wǎng)膜上。在1600年，通過Anton von Leeuwenhoek的努力使該類“簡單顯微鏡

5、”或稱之為放大玻璃的性能達(dá)到了最完善的狀態(tài)。這種簡單顯微鏡可用來觀單細(xì)胞的動物（他稱這為微生物）及一些較大的細(xì)菌。這類產(chǎn)品見圖3。由一個十分靠近人眼的放大鏡將標(biāo)本成像成于標(biāo)本同一邊，該圖像看起來距人眼大約為10英寸遠(yuǎn)。該像為虛像，不能被膠片捕獲。,顯微鏡簡史,復(fù)式顯微鏡發(fā)展于17世紀(jì)和18世紀(jì)，它的發(fā)展受到光學(xué)像差的困擾（色差和球差）。這種缺陷是由于采用多個透鏡而帶來的。此期間，這類顯微鏡成像質(zhì)量實(shí)際上要比單透鏡顯微鏡產(chǎn)品差，其成象往往

6、很模糊，并存在由色差帶來的彩色暈圈。這樣不但使成象的質(zhì)量變壞而且降低了成像的分辨率。在17世紀(jì)中期，制造者發(fā)現(xiàn)了采用色散不同的兩種玻璃制作透鏡可降低或消除色差。這種發(fā)現(xiàn)最先在比顯微鏡鏡片大的望遠(yuǎn)鏡鏡片中。直到18世紀(jì)后這種校正色差的透鏡才在顯微鏡上廣泛應(yīng)用。,大約在1600年左右，由于荷蘭Janssen兄弟及意大利伽利略的努力，復(fù)式顯微鏡被發(fā)明出來。這種顯微鏡最簡單的形式由兩片凸透鏡組成，一片為物鏡靠近標(biāo)本，目鏡則靠近使用者的眼睛。復(fù)

7、式顯微鏡分兩步放大。物鏡將一放大的圖象成于鏡體筒中，目鏡將物鏡投入的圖象再放大,顯微鏡簡史,18世紀(jì)和19世紀(jì)，伴隨著復(fù)式顯微鏡機(jī)械和光學(xué)質(zhì)量的大大改進(jìn)，先進(jìn)的機(jī)械工具使復(fù)雜的零件得以加工和制造。在18世紀(jì)中期，黃銅合金被用來制作高質(zhì)量的顯微鏡。此期間英國及德國的顯微鏡制造廠大量生產(chǎn)顯微鏡。他們的產(chǎn)品從設(shè)計(jì)及制作上均有很大的變化，但由于總的原理限制了產(chǎn)品的特性，使它保持在一個相對固定的狀態(tài)。圖5所示的顯微鏡是由Hugh Powell a

8、nd Peter Lealand在1850間制造的。三角型的底座給顯微鏡提供了穩(wěn)定的支撐。在這期間，多數(shù)人均認(rèn)同這種結(jié)構(gòu)。,顯微鏡簡史,在19世紀(jì)末期，由于在顯微鏡的制造上產(chǎn)生了較為激烈的競爭及發(fā)展，制造成本成為一個重要的因素。黃銅作為一種顯微鏡的制造材料已顯得十分昂貴。用黃銅制作的顯微鏡主體及其它零件需要冗長的加工及拋光工期。為了降低成本顯微鏡制商開始在顯微鏡的主體、載物臺及其它外露的非運(yùn)動部件上采用噴漆的工藝方式。在20世紀(jì)初許多

9、顯微鏡制造商開始采用鑄鐵來代替黃銅制作顯微鏡的主體及載物臺。他們也開始在一些重要的黃銅零件上采用電鍍的方法來進(jìn)行表面處理，例如手輪、物鏡筒、目鏡及機(jī)械載物臺的部件（見圖6）。這類的顯微鏡基本上仍然采用一種共同的設(shè)計(jì)方式，均采用單筒目鏡，收集外部光源的載物臺下反射鏡。,顯微鏡簡史,右圖所示為Olympus Provis AX70研究顯微鏡。這種顯微鏡代表了目前最先進(jìn)的設(shè)計(jì)及工藝。它集合了多種照明（落射及透射）,多種觀察方式(偏光，DIC，

10、熒光及相襯)的能力。它的攝影裝置相當(dāng)完善，可執(zhí)行點(diǎn)測光，自動曝光控制，柔性的連續(xù)變倍，使取景更容易。Y形的機(jī)架設(shè)計(jì)具備了很好的可操作性，穩(wěn)定性。光、機(jī)、電控制的完美結(jié)合，使得操作起來十分容易,是現(xiàn)代先進(jìn)顯微鏡的代表.,19世紀(jì)以來，顯微鏡發(fā)展迅速，性能不斷提高，種類不斷增加。現(xiàn)代的顯微鏡在設(shè)計(jì)及性能上遠(yuǎn)遠(yuǎn)的超過了20世紀(jì)中期的顯微鏡,這首先是光學(xué)玻璃的性能在很大程度上已有了明顯的改進(jìn)，使其可更好的校正光學(xué)象差，人工合成的鍍鏌技術(shù)也已十

11、分先進(jìn)。同時制造商們也開始在顯微鏡控制上采用集成電路技術(shù)，使得操作和攝影也較早期容易得多了，使其自動化程度更高,進(jìn)而不僅更能適應(yīng)復(fù)雜的工作任務(wù)，同時也極大地降低了使用者的工作強(qiáng)度.,顯微鏡簡史,前面的章節(jié)涉及了顯微鏡的基本概念以及從17世紀(jì)到現(xiàn)代的簡要發(fā)展史。事實(shí)上，對于顯微鏡來講，作為一種常見的科學(xué)儀器，顯微鏡廣泛應(yīng)用于多類科研、常規(guī)檢查及教育的各個領(lǐng)域，如對科學(xué)家來說，顯微鏡及顯微攝影術(shù)很早就是一個有用的科研工具了。同時，在顯微鏡的

12、發(fā)展過程中，也極大地推動了細(xì)胞學(xué)、微生物學(xué)、遺傳學(xué)、病理學(xué)、材料學(xué)以及最新的半導(dǎo)體產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。在生命之謎的研究上顯微鏡也起了很大的作用。,顯微鏡簡史,在現(xiàn)代，顯微鏡作為一種工具在各類學(xué)科的研究方面已得到了極大的發(fā)展。例如半導(dǎo)體工業(yè)就需要用顯微鏡來觀察新的高技術(shù)材料及集成電路的表面特征，顯微術(shù)也是法學(xué)上的的一個重要工具，經(jīng)常用來檢查毛發(fā)、纖維、織物、血漬子彈及其它有關(guān)的犯罪項(xiàng)目?，F(xiàn)代先進(jìn)的熒光染色技術(shù)及單克隆抗體技術(shù)，熒光顯微術(shù)在生物醫(yī)學(xué)

13、及細(xì)胞生物學(xué)上的應(yīng)用預(yù)期將發(fā)生爆炸性的增長。生物醫(yī)學(xué)與材料學(xué)上，顯微鏡技術(shù)的不同點(diǎn)主要是光線投射到標(biāo)本上的方式不一樣。典型的生物醫(yī)學(xué)顯微術(shù)是將很薄的標(biāo)本經(jīng)制備后用光透過該標(biāo)本，用物鏡進(jìn)行調(diào)焦后投射到目鏡；而觀察材料或集成電路的表面時，光線從物鏡出來再由標(biāo)本的表面反射到顯微鏡的物鏡。按照現(xiàn)代科學(xué)的命名方法，透射光顯微術(shù)和反射光顯微術(shù)應(yīng)該稱為diascopic和episcopic照明顯微術(shù)。下面展示的照片有透射光和反射光科學(xué)研究的圖片。

14、,顯微鏡簡史,,微觀世界的奧秘 （生命科學(xué)類）,顯微鏡簡史,,多姿多彩的顯微圖片（材料科學(xué)類）,顯微鏡簡史,主要廠家 OLYMPUS（日本） ZEISS（德國） NIKON（日本） LEICA（德國,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,原理顯微鏡的成像及影響成像的關(guān)鍵因素－像差顯微鏡的技術(shù)參數(shù)及工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)顯微鏡的結(jié)構(gòu)顯微鏡的光學(xué)部件常用的觀察方法,基礎(chǔ)知識,透鏡成像原理凸透鏡成像的規(guī)律5種典型

15、情況,1.當(dāng)u>2f時，凸透鏡成倒立、縮小的實(shí)像  2.當(dāng)u=2f時，凸透鏡成倒立等大的實(shí)象  3.當(dāng)f<u<2f時，凸透鏡成倒立、放大的實(shí)像  4.當(dāng)u=f時，凸透鏡不成像  5.當(dāng)u<f時，凸透鏡成正立放大的虛像,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,注意點(diǎn),,,倒立,放大,V>2f,異側(cè)（實(shí)）,同側(cè)（虛）,正立,放大,透鏡成像原理,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,物

16、鏡,,,目鏡,顯微鏡為復(fù)式放大結(jié)構(gòu),１、當(dāng)f<u<2f時，在凸透鏡像方一側(cè)成倒立、放大的實(shí)像（物鏡放大）,２、當(dāng)u<f時，通過在凸透鏡像方一側(cè)可觀察到在物方一側(cè)有正立放大的虛像（目鏡放大）,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,顯微鏡的成像原理,,顯微鏡的構(gòu)造,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,顯微鏡的成像（幾何成像原理）,物鏡,目鏡,A″,B″,●　物鏡對物放大 ●　目鏡對象放大,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,顯微鏡的成像影響透鏡成像的

17、關(guān)鍵因素－像差,基礎(chǔ)知識,像差分類：球差象散慧差畸變場曲色差,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,球差,象散,慧差,場曲,負(fù)畸變,正畸變,基礎(chǔ)知識,,像差分類,像 差,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,球差,離透鏡主軸遠(yuǎn)的光線因折射率大而交點(diǎn)離透鏡近；離透鏡主軸近的光線因折射率小而交點(diǎn)離透鏡遠(yuǎn)如果鏡頭有球差，就不可能結(jié)成清晰的影像,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,像差分類,彗差,由于與主軸不平行的光線通過透鏡折射會聚所形成的由于透鏡邊緣一帶的光線與透鏡主軸一帶

18、的光線所會聚的焦點(diǎn)位置和影像大小有差別影像的一端寬大虛散而較暗，另一端則窄小清晰而較亮，如同拖帶尾巴的慧星一樣,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,像差分類,像散,由側(cè)面射來的光線，通過透鏡折射后，在底片邊緣部分不能同時呈現(xiàn)出橫豎線條都清晰的影像如果橫線清晰，則豎線必模糊；反之使豎線清晰則橫線必模糊，所以又稱縱橫像差,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,像差分類,場曲,垂直于主軸的平面物體經(jīng)鏡頭成像時，不能使中心部分和邊緣部分的影像都清晰，只能在一個球面上達(dá)到影像

19、清晰的效果,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,像差分類,畸變,透鏡對同一物體的不同部分有不同的放大率，因而使影像產(chǎn)生變形扭曲的現(xiàn)象，越是邊緣的部位就越明顯,枕形畸變,桶形畸變,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,像差分類,色差,不同顏色的光線波長不同，不同波長的色光在通過透鏡時有不同的折射率，所以不能在一個平面上形成焦點(diǎn),光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,像差分類,色 差,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,像差分類,顯微鏡的基本參數(shù)數(shù)值孔徑（Numerical Aperture, N.

20、A.): N.A.=n?sin?分辨率（Resolving power）： ?=0.61??/N.A工作距離（Working Distance, W.D.)焦點(diǎn)深度（Depth of Focus)總放大率（Magnification）: 視場數(shù)（Filed Nember）及視場直徑(Filed of view)像場亮度（Image Brightness）覆蓋差（Coverslip）,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,物鏡數(shù)值孔徑(N

21、.A),TOP值: 干系物鏡(0.95),水浸物鏡(1.2),油浸物鏡(1.4),特制物鏡(1.6),介質(zhì)折射率越大，NA值越高開口角α越大，NA值越高n=物鏡與被檢物體之間介質(zhì)的折射率,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,物鏡數(shù)值孔徑(N.A),數(shù)值孔徑與顯微鏡其他參數(shù)的關(guān)系,物鏡的數(shù)值孔徑是顯微鏡中最重要的參數(shù).決定和影響著其他參數(shù).數(shù)值孔徑與分辨率成正比數(shù)值孔徑與放大倍率成正比數(shù)值孔徑與焦深成反比數(shù)值孔徑的平方與圖象亮度成正比數(shù)值孔

22、徑和視場直徑成反向關(guān)系數(shù)值孔徑與工作距離成反向的關(guān)系.,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,分辨率Resolving power,基礎(chǔ)知識,Resolution (r) = 0.61λ/ NA （ λ=光源波長，一般選550nm）,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,提高分辨率的有效辦法,基礎(chǔ)知識,1.降低光源波長2.增大介質(zhì)系數(shù)或提 高物鏡NA值3.增大物鏡的口徑4.增加明暗反差,Resolution (r) = 0.61λ/ NA

23、 （ λ=光源波長，一般選550nm）,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,放大倍率（Magnification）,通過目鏡總放大倍率=物鏡倍率 X 目鏡倍率 （如有中間變倍，再乘中間倍率）照相時總放大倍率=物鏡倍率 X 照相目鏡倍率接視頻時總放大倍率=物鏡倍率 X 接口倍率 X 視頻放大倍數(shù)視頻放大倍數(shù) =顯示屏幕對角線尺寸/CCD靶面尺寸,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,有效(實(shí))放大和無效(虛)放大有效放大的倍率與N

24、A值的關(guān)系在使用顯微鏡放大時盡量用高NA值的物鏡來放大,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,放大倍率（Magnification）,工作距離(W.D)Working distance標(biāo)準(zhǔn)情況下,工作距離與NA值和分辨率成反向關(guān)系,基礎(chǔ)知識,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,工作距離(W.D)Working distance,視場數(shù)(FN)和視場直徑(FV),Φ—視場直徑F.N.—視場數(shù),光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,視場數(shù)與視場直徑,視場直徑＝視

25、場數(shù)/物鏡放大倍數(shù) (mm),視場直徑指在顯微鏡目鏡下所看到的圓形視場的直徑，單位用毫米表示,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,目鏡的視場,基礎(chǔ)知識,,,,F.N.22,,,,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,視場直徑參數(shù)表,視場直徑與視場數(shù)成正比，與物鏡倍率成反比,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,焦深 Depth of focus,焦深與總放大倍數(shù)以及物鏡的數(shù)值孔徑成反比焦深對條件的要求恰好與分辨率相反,分辨率高則焦深變小(相同口徑的物鏡)被檢物體周圍介質(zhì)的折射率加

26、大,可增大焦深.,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,焦深 Depth of focus,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,覆蓋差 Difference of coverglass,由于蓋玻片的厚度不標(biāo)準(zhǔn)，光線從蓋玻片進(jìn)入空氣產(chǎn)生折射后的光路發(fā)生了改變，從而產(chǎn)生了相差，這就是覆蓋差。顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)在設(shè)計(jì)時必須要將蓋玻片的厚度計(jì)算在內(nèi),不然會嚴(yán)重影響顯微鏡的成像質(zhì)量.標(biāo)準(zhǔn)的蓋玻片厚度：0.17mm, 允許范圍：0.16－0.18mm，常用于切片檢查。物

27、鏡上有“－”符號為不受覆蓋差影響，如低倍物鏡,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,有“0”為不能加蓋玻片，稱為無罩物鏡（Nocover)常用于金相物鏡和血液涂片檢查。有0-2.1標(biāo)記的表示可以通過調(diào)節(jié)適應(yīng)0-2.1厚度的覆蓋玻片,常用于倒置相差顯微鏡有0.7/1.2等不同標(biāo)記的CAP,適用于不同玻璃厚度的液晶檢查,鏡象亮度和視場亮度,視場亮度和鏡象亮度是兩個不同的概念鏡象亮度是指顯微鏡下圖象的明暗程度在一定的放大倍數(shù)下，鏡象亮度與物鏡數(shù)值孔

28、徑值的平方成正比鏡象亮度與放大倍數(shù)成反比視場亮度則是指顯微鏡下整個視場的亮度。不僅與物鏡目鏡有關(guān)，還直接受聚光鏡、光闌和光源的影響。在條件不變的情況下，視場亮度越大，鏡象亮度也越大。,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,顯微鏡制造的工業(yè)標(biāo)準(zhǔn),基礎(chǔ)知識,,機(jī)械筒長（Mechanial tube length)光學(xué)筒長(Optical tube length)同焦距離（Parfocal Distance）中間像位置（Intermediate i

29、mage position）明視距離（Least distance of distinct vision）合軸(Optical alignment)和齊焦(parfocal)有限遠(yuǎn)和無限遠(yuǎn)光學(xué)系統(tǒng)（Finite and infinity optical systems),光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,顯微鏡制造的工業(yè)標(biāo)準(zhǔn),基礎(chǔ)知識,,機(jī)械筒長（Mechanial tube length)同焦距離（Parfocal Distance）標(biāo)準(zhǔn)

30、焦面／中間像位置（Intermediate image position）,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,顯微鏡制造的工業(yè)標(biāo)準(zhǔn),,光學(xué)筒長(Optical tube length)明視距離（Least distance of distinct vision）,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,合軸(Optical alignment)和齊焦(parfocal),基礎(chǔ)知識,齊焦是指在鏡檢時，當(dāng)用某一倍率的物鏡觀察圖象清晰后，在轉(zhuǎn)換另一倍率的物鏡時，其成象亦應(yīng)基

31、本清晰，即齊焦性.而合軸則是指在鏡檢中轉(zhuǎn)換物鏡時，象的中心偏離也應(yīng)該在一定的范圍內(nèi)，既合軸度。齊焦性能的優(yōu)劣和合軸程度的高低是衡量顯微鏡質(zhì)量的一個重要標(biāo)志，它是與物鏡的本身質(zhì)量和物鏡轉(zhuǎn)換器的精度有關(guān)。,顯微鏡制造的工業(yè)標(biāo)準(zhǔn),光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,顯微鏡光學(xué)系統(tǒng)(有限遠(yuǎn)和無限遠(yuǎn)),光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,顯微鏡制造的工業(yè)標(biāo)準(zhǔn),萬能無限遠(yuǎn)光學(xué)系統(tǒng)（UIS）,2.可任意疊加中間附件而不受倍率及像差的影響(平行光) 3.更高的通光率,分辨率及反

32、差.,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,1.物鏡完全克服像差,任意光路出口都是完整消色差后的光　　　學(xué)影象,顯微鏡的光學(xué)部件,,基礎(chǔ)知識,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,物鏡： 顯微鏡最重要的光學(xué)部件,第一次放大，決定了顯微鏡的分辨率及檔次，優(yōu)質(zhì)的物鏡都是齊焦和合軸的。目鏡 （二次放大，不改變分辨率,配合物鏡決定目視觀察時視場的大小和眼點(diǎn)的高低,也就是觀察時舒適性）中間鏡頭 （照相目鏡，中間變倍系統(tǒng)、接口等,

33、與光電轉(zhuǎn)換部件的靶面尺寸一起決定了數(shù)碼采集的視場和倍率）照明器和聚光鏡 (提供觀察的光源,不同檔次的顯微鏡和不同的觀察方式有所不同),物 鏡,基礎(chǔ)知識,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,物鏡是顯微鏡最重要的光學(xué)部件，第一次放大，決定了顯微鏡的分辨率及檔次,物鏡的種類,按觀察介質(zhì)不同分： 干燥系物鏡 水浸系物鏡 油鏡系物鏡 按放大率高低分： 低倍物鏡，高倍物鏡,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,物鏡的種類,按色差和場曲

34、校正程度分:消色差物鏡(ACH)平場消色差物鏡(PLAN)平場半復(fù)消色差物鏡(PLFL)平場復(fù)消色差物鏡(PLAPO),基礎(chǔ)知識,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,物鏡的種類,不同數(shù)值孔徑（NA）的物鏡差別極大（以100X為例)消色差物鏡(ACH)，NA 0.75 5000元平場消色差物鏡(PLAN)，NA O.80 10000元平場半復(fù)消色差物鏡(PLFL) NA O.90 20000元平場復(fù)消色差

35、物鏡(PLAPO) NA O.95 40000元,基礎(chǔ)知識,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,物鏡的種類,按用途既觀察方式來分:明場物鏡（B）明暗場物鏡（BD）明暗場、偏光（BDP）萬能物鏡（U）相差(PH)或霍夫曼物鏡特種物鏡 紅/紫外物鏡,帶光闌調(diào)整物鏡帶校正帽物鏡（LCD）等,基礎(chǔ)知識,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,物鏡的種類,按工作距離分:普通工作距離物鏡長工作距離物鏡超長工作距離物鏡,基礎(chǔ)知識,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)

36、知識,,物鏡的標(biāo)識,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,物鏡的標(biāo)識,物鏡上的標(biāo)識環(huán)以顏色來區(qū)分放大倍數(shù) 5X：紅 10X：黃 20X：綠 40X/50X：藍(lán) 100X：白,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,物鏡的標(biāo)識,U—萬能/超寬視野26.5M—材料（金相）/無罩物鏡(NC)BD—明視野法/暗視野法P（POL）—Polarizing偏光IR—用紅外光觀察L（SL）—長（超長）工作距離Oil—油鏡PH－相差,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)

37、知識,物鏡的標(biāo)識舉例,UMPlanFL－BDP 萬能金相平場半復(fù)消色差物鏡（能作明視野/暗視野/偏光觀察并支持超寬視野）LMPlanApo 長工作距離金相平場復(fù)消色差物鏡LCPlanFL-LCD 長工作距離帶校正帽平場半復(fù)消色差物鏡（可用于觀察液晶LCD）LMPlan-IR 長工作距離金相平場物鏡（能作紅外光觀察）,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,目 鏡,,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,二次放大，不改變分辨率,配合物鏡決定目視觀察時視場的大小和

38、眼點(diǎn)的高低,也就是觀察時舒適性。,眼點(diǎn)和視場,基礎(chǔ)知識,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,眼點(diǎn)的高低和視場的大小決定了觀察的舒適程度,目鏡可安裝各種測微尺長度/單位含量/晶粒度測量,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,目鏡測微尺和目鏡測微計(jì),目鏡與測微尺的配套,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,常見的中間接口倍率與CCD靶面尺寸,常用CCD的靶面尺寸:1/3 CCD 靶面對角線尺寸 = 6 MM1/2 CCD 靶面對角線尺寸 = 8 MM1/1.8 CCD 靶面對角線尺寸

39、= 10.4 MM2/3 CCD 靶面對角線尺寸 = 11MM 常用接口的倍率:U-TV1XC 光學(xué)倍率 = 1 倍U-TV0.5XC 光學(xué)倍率 = 0.5 倍U-TV0.35XC 光學(xué)倍率 = 0.35 倍U-TV0.25XC 光學(xué)倍率 = 0.25 倍OLYMPUS顯微鏡常用的光學(xué)視場數(shù):普通視場數(shù)(CK40M/PME3) = 18/20(MM)寬視場數(shù)(BX/

40、GX51) = 22(MM)超寬視場數(shù)(AX70/BX61/GX71)= 26.5(MM),光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,顯微鏡的照明系統(tǒng),光源聚光鏡照明方式,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,顯微鏡的光路,顯微鏡的照明器,顯微鏡的照明系統(tǒng),光源(燈泡和燈箱),光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,燈箱,燈泡,顯微鏡的照明系統(tǒng),光源(燈泡和燈箱),光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,早期的顯微鏡工作者利用油燈和自然界的太陽光作為他們早期顯微鏡的外部照明光源。他們常常利用非

41、常巧妙的方法收集光線，例如用白色的木板來反射、利用多云的天氣使陽光散射。但是這些方法缺乏可靠性，時常其照明的數(shù)值孔徑大于物鏡的數(shù)值孔徑，使圖像成生眩光。,顯微鏡的照明系統(tǒng),光源(燈泡和燈箱),光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,現(xiàn)代的顯微鏡一般都配有控制度很高的集成式光源。目前，顯微鏡的光源一般采用安裝在反射燈室內(nèi)的鹵鎢燈。其主要的幅射波長中心大約在600nm到1200nm（見圖2）。典型的照明燈源及燈箱見圖1。燈箱中的燈泡為鹵鎢燈，直流12V供電，可

42、提供100W的照明功率。燈泡的直流電源由安裝在顯微鏡內(nèi)的直流電源提供和控制。這類燈泡在工作時要發(fā)出大量的熱量，在燈箱中通常配置了一些隔熱的膜系，用來阻止熱量的傳遞。燈泡發(fā)出的光線直接進(jìn)入顯微鏡的底座并通過集光鏡然后通過一個燒結(jié)的玻璃散光片，到達(dá)并匯聚在聚光鏡的孔徑光欄處。早期產(chǎn)品燈泡的位置用幾個安放在燈箱旁邊的調(diào)整旋鈕來調(diào)整，或者直接采用特殊的可預(yù)調(diào)中心的燈泡。現(xiàn)在的產(chǎn)品大多依靠精確的機(jī)械加工對燈泡進(jìn)行定位，無需調(diào)整．,顯微鏡的照明系

43、統(tǒng),光源的種類鎢絲燈鹵素?zé)艋」鉄?汞燈/氙燈)激光光源,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,顯微鏡的照明系統(tǒng),鎢絲燈,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,鎢絲燈與室內(nèi)常用的白熾燈一樣，存在一些缺陷，例如隨使用的時間增加，發(fā)光強(qiáng)度要減?。话殡S著鎢的升華，將沉積在玻殼的內(nèi)壁使其變黑。這類燈泡的色溫平均值大約為2200K至3400K。如果在顯微攝影時使用這類燈泡，通常需要根據(jù)感光膠片的色溫值在光路中加入色溫補(bǔ)償濾光片。根據(jù)燈泡的封裝形狀、接口的結(jié)構(gòu)及燈絲的排列，

44、鎢絲燈有很多種品種，根據(jù)接口的不同，常用的有插口和螺口，根據(jù)出光口的不同，常用的有頂部出光和側(cè)向出光．,顯微鏡的照明系統(tǒng),鹵素?zé)?光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,現(xiàn)代顯微鏡的光源主要是鹵素?zé)簟Ｋ沙錆M惰性氣體的玻璃殼和里面由直流供電的鎢絲組成，與普通的白熾燈相比。在燈腔內(nèi)充加了鹵元素可有效地降低鎢絲的氧化而延長燈泡的使用壽命，同時，也可以使色溫較普通鎢絲燈高，所以，他的主要的優(yōu)點(diǎn)是發(fā)光明亮，尺寸小、較好的一致性，壽命長及更高的經(jīng)濟(jì)性。鹵鎢燈在整個

45、壽命期（1000-2500小時）的發(fā)光十分穩(wěn)定。鹵鎢燈發(fā)出的光譜為連續(xù)光譜，其色溫 2700 -3350K（根據(jù)工作電壓），但在壽命的末期色溫有一些下降。,顯微鏡的照明系統(tǒng),鹵素?zé)簦ɡ涔庠矗?光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,冷光源一般由一種帶分色反光鏡的鹵鎢燈和光纖組成，反光鏡可讓燈泡發(fā)出的大部份紅外線透過，并反射波長較短的可見光和近紫外光。此類燈泡的工作電壓一般從6V至21V并置于可提供工作電壓的箱中，同時采用風(fēng)扇排除多余的熱量。這種照明器可以加

46、裝其它的附件，如產(chǎn)生特殊照明效果的濾色片、產(chǎn)生偏振光的起偏器等。這種照明器常用作測量和體視顯微鏡照明。,顯微鏡的照明系統(tǒng),鹵素?zé)簦ㄍ庵檬剑?光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,在顯微鏡的使用中，如果顯微鏡上未配置內(nèi)照明器，可采用外部照明器來進(jìn)行顯微鏡的照明。圖6這一種典型的外照明光源。這種光源上一般可配散射濾光片使照度均勻，也可配有色濾色片作光色的平衡。有的型號上還可安裝偏振片，使偏光顯微鏡也可使用外部照明器。這種照明器有時也安裝有視場光欄，使用者可調(diào)

47、節(jié)光欄來控制入射到顯微鏡中光束的直徑。,顯微鏡的照明系統(tǒng),弧光燈(汞燈/氙燈),光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,汞燈、氙燈均是顯微鏡特殊照明時所采用的光源。這類燈泡用外部電源供電。外部電源上有高壓激發(fā)和維持電路使燈泡正常工作。此類電源提供了足夠的起動功率對燈泡進(jìn)行起動（氣態(tài)蒸氣離子）并保持它在工作中不閃爍?；」鉄舻钠骄鶋勖鼮?00小時左右。大多數(shù)外部電源上設(shè)置有計(jì)時器，可使使用者了解具體的使用時間。,顯微鏡的照明系統(tǒng),汞燈,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,汞燈

48、的功率從50W到200W有數(shù)種規(guī)格，其結(jié)構(gòu)通常為在石英玻璃制成的玻殼中封裝有兩個電極，玻殼中充有汞。在光譜為近紫外至紅外波段內(nèi)，這種弧光燈不能提供連續(xù)的發(fā)光強(qiáng)度（見圖8汞燈的發(fā)射光譜）。汞弧光燈發(fā)光的波長主要集中在近紫外部區(qū)域，光強(qiáng)的峰值為313、334、365、406、435、546及578nm幾個點(diǎn)。,在顯微術(shù)中，大多數(shù)情況下這種燈不宜使用，除了熒光顯微術(shù)，汞弧光燈不宜用來作明場、暗場、DIC、或偏光攝影的光源，主要原因是汞燈的非連

49、續(xù)光譜不能使標(biāo)本產(chǎn)生真實(shí)的色彩。,顯微鏡的照明系統(tǒng),氙燈,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,與汞燈相比，氙燈的光譜的連續(xù)性要好得多（見圖9）。它不象汞燈那樣有極強(qiáng)的光譜峰值，在近紫外部份的發(fā)光并不強(qiáng)，而在紅外部份的發(fā)光比較強(qiáng)。在使用這種燈時應(yīng)注意發(fā)熱的控制。短弧氙燈的電弧尺寸容易充滿物鏡的后焦平面，使光能的利用率得以提高，所以，它更適合作顯微鏡的光源。,顯微鏡的照明系統(tǒng),激光光源,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,在最近幾年，激光的使用得到了發(fā)展，特別是氬離子激光

50、。氬離子激光在488和514nm處有很強(qiáng)的發(fā)射功率。盡管它的成本較高，但在激光掃描共焦顯微術(shù)中十分有用。 激光器有數(shù)種，它們提供各自的發(fā)射光譜。圖10所示為顯微鏡中（熒光、共焦和單色光明場攝影）常用的兩種激光器的發(fā)射光譜。,顯微鏡的照明系統(tǒng),聚光鏡,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,透射顯微鏡聚光鏡裝在載物臺的下方。落射顯微鏡物鏡同時充當(dāng)聚光鏡的作用，聚光鏡可以將光線聚焦于被檢物體上，以得到最好的照明效果。,顯微鏡的照明系統(tǒng),光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,根

51、據(jù)物鏡數(shù)值孔徑的大小和結(jié)構(gòu)不同，聚光鏡的大致有如下分類： 1． 阿貝聚光鏡（Abbe condenser） 阿貝聚光鏡由兩片透鏡組成，有較好的聚光能力，但是在物鏡數(shù)值孔徑高于0.60時，則色差，球差就顯示出來。因此，多用于普通顯微鏡上。 2． 消色差聚光鏡(Achromatic aplanatic condenser ) 這種聚光鏡又名“消球差聚光鏡”和“齊明聚光鏡”，它由一系列透鏡組成，它對色差球差的校正程度很高，能得到理想

52、的圖象，是明場鏡檢中質(zhì)量最高的一種聚光鏡，其NA值達(dá)1.4 ，因此，在高級研究顯微鏡常配有此種聚光鏡。它不適用于4 X以下的低倍物鏡，否則照明光源不能充滿整個視場。 3． 搖出式聚光鏡（Swing out condenser） 在使用低倍物鏡時（如4X），由于視場大，光源所形成的光錐不能充滿真整個視場，造成視場邊緣部分黑暗，只中央部分被照亮。要使視場充滿照明，就需將聚光鏡的上透鏡從光路中搖出。 4． 其它聚光鏡 聚光鏡除上述明場

53、使用的類型外，還有作特殊用圖的聚光鏡。如暗視場聚光鏡，相襯聚光鏡，偏光聚光鏡，微分干涉聚光鏡及萬能聚光鏡等．,顯微鏡的照明系統(tǒng),聚光鏡,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,顯微鏡的照明系統(tǒng),照明方式,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,顯微鏡經(jīng)常采用的有兩種照明方式 ，既：（1） 臨界照明（Critical illumination） （2） 柯拉照明（koehler illumination）,顯微鏡的照明系統(tǒng),臨界照明,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,光源經(jīng)過聚光鏡后，成

54、像于物平面上。若忽略光能的損失，則光源像的亮度與光源本身相同，因此，這種方法相當(dāng)于在物平面上放置光源。顯然，在臨界照明中，如果光源表面亮度不均勻，或明顯地表現(xiàn)出細(xì)小的結(jié)構(gòu)，如燈絲等，那么就要嚴(yán)重影響顯微鏡觀察效果，這是臨界照明的缺點(diǎn)。其補(bǔ)救的方法是在光源的前方放置乳白和吸熱濾色片，使照明變得較為均勻和避免光源的長時間的照射而損傷被檢物體。用透射光照明時，物鏡成像光束的孔徑角，被聚光鏡像方光束的孔徑角所決定，為使物鏡的數(shù)值孔徑得到充分利用

55、，聚光鏡應(yīng)有與物鏡相同或稍大的數(shù)值孔徑。,顯微鏡的照明系統(tǒng),柯拉照明,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,臨界照明中物面光照度不均勻的缺點(diǎn)，在柯拉照明中可以消除。在光源與聚光鏡間加一輔助聚光鏡，如圖所示?？梢?，由于不是直接把光源而是把被光源均勻照明了的輔助聚光鏡2（也稱為柯拉鏡）成像在標(biāo)本上，所以物鏡的視場（標(biāo)本）得到均勻的照明。,光學(xué)顯微鏡常見的觀察方法,明場暗場偏光微分干涉其他(熒光、相差、HOFFMAN、紅外、色襯等),基礎(chǔ)知識,光學(xué)顯微

56、鏡基礎(chǔ)知識,常見的觀察方式—明場,明場:(利用照明光線直接照射在被測試樣反射回來 后觀察,適用于常規(guī)組織的檢測,如珠光體/鐵素體/馬氏體等金相組織的觀察),光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,常見的觀察方式—暗場,暗場:(利用丁道爾現(xiàn)象所產(chǎn)生的光的衍射/繞射,用斜射照明的方式觀察被測試樣,可以看到明場有時看不到的物質(zhì),故又稱為超顯微術(shù),適用于夾雜物或缺陷的檢查),光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,常見的觀察方式—偏光,偏光:(利用偏光鏡片的單向振動特性,在垂直正交時

57、可對具有雙折射性的物質(zhì)進(jìn)行定性檢查,適用與地質(zhì)巖相和晶體性夾雜物的觀察,如氧化亞銅夾雜的檢查),光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,常見的觀察方式—微分干涉,微分干涉:(又稱DIC或諾馬爾斯基觀察法,利用直線偏振光通過諾馬斯基棱鏡后的干涉現(xiàn)象，使觀察到的物體表面呈現(xiàn)凹凸不平的立體效果）。,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,其他觀察方式,熒光觀察相差霍夫曼（HOFFMAN)等,光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,常用顯微鏡附件,顯微操作儀冷熱臺自動掃描臺共覽裝置描繪裝置

58、圖象分析系統(tǒng),光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識,顯微鏡分類,按應(yīng)用范圍分： 1.工業(yè)檢測類顯微鏡 2.生命科學(xué)類顯微鏡,顯微鏡分類,按外型及物鏡的朝向來分： 1.正置顯微鏡 2.倒置顯微鏡,物鏡向上,物鏡向下,顯微鏡分類,按功能分類： 1.常規(guī)顯微鏡(材料的組織形貌觀察) 2.偏光顯微鏡(晶體/礦石檢查) 3.測量顯微鏡(工件量測) 4.立體顯微鏡(低倍宏觀檢查/操作)

59、5.硅片/液晶類檢查顯微鏡(各種尺寸 平面樣品的檢查) 5.激光共焦掃描顯微鏡(高分辨率,三 維重造Z 軸的精確測量),OLYMPUS產(chǎn)品分類,材料工程領(lǐng)域： 倒置金相顯微鏡： GX71----大型系統(tǒng)研究級 GX51----實(shí)驗(yàn)室及檢驗(yàn)級 CK40----日常檢驗(yàn)，教學(xué)級

60、 正立金相顯微鏡： AX70M----大型系統(tǒng)研究級 BX61----萬能全自動級 BX51----研究，開發(fā)檢驗(yàn) BX41----日常檢驗(yàn)，教學(xué) 激光共焦掃描顯微鏡: OLS-----高分辨率,高精度測量,三維重造,焦深疊加 立體顯微鏡:

61、 SZX12---系統(tǒng)研究級 SZX9/7—實(shí)驗(yàn)室及檢驗(yàn)級 SZX61/51-日常觀察 測量顯微鏡: STM6----工件量測 數(shù)碼采集系統(tǒng): DP70----頂級顯微數(shù)碼照相裝置(1250萬像素) DP1

62、2----專業(yè)顯微數(shù)碼照相裝置(340萬像素) DS5060—顯微數(shù)碼相機(jī)(510萬像素) CDI-----數(shù)碼采集裝置(130/250萬像素) 模擬CCD-CCD+采集卡(40萬像素) 圖象處理系統(tǒng)： OLYCIA---定量金相分析系統(tǒng)

63、 OLYSIM---測量軟件 專用附件: LINKAM---程序熱臺,冷臺,巖像,高分子 電動掃描臺-夾雜物的多視場測量及定量分析.,顯微鏡配套時應(yīng)注意的事項(xiàng),倒置/正置透射/反射觀察方法(明場/暗場/偏光/微分干涉或)物鏡檔次(非常重要!其實(shí)也就是分辨率的問題,直接決定了觀察質(zhì)量,最需要注意的是物鏡的數(shù)值

64、孔徑即NA值)需要接駁的圖象采集的種類(數(shù)碼/大版/135其實(shí)也就是光學(xué)接口的多寡(是否能同時接駁多種照相裝置而無需拆卸)目鏡(是否需要目鏡測微尺,視場數(shù)有多大,決定了觀察效果的舒適性)數(shù)碼采集系統(tǒng)的檔次(如像素值,實(shí)時顯示的分辨率和速度)圖象處理軟件(是否能滿足實(shí)際使用的要求即想用來解決什么問題)根據(jù)實(shí)際需要選擇最合適的配置,如何正確了解和使用顯微鏡,學(xué)習(xí)了解顯微鏡的要點(diǎn)規(guī)范正確的顯微鏡使用方法維護(hù)保養(yǎng)的重要性,各部名稱

65、及注意點(diǎn)：,物鏡:NA值(和分辨率的關(guān)系),工作距離(長/超長),安裝直徑(明/暗場),支持視場數(shù)(20/22/26.5),特殊用途(消應(yīng)力/虹彩光欄/覆蓋差調(diào)整/調(diào)整帽/相差等).目鏡:視場數(shù)(18/20/22/26.5),外徑(23.2/30毫米),是否可以裝目鏡測微尺/怎么裝/裝多大的測微尺.,中間接口：倍數(shù)，接口類型觀察頭:直筒.傾斜筒(傾斜角度),視野數(shù)(18/20/22/26.5),單/雙或三目結(jié)構(gòu),平推式/轉(zhuǎn)軸式.主

66、機(jī):光源功率(30/100W),調(diào)焦部分的結(jié)構(gòu)(載物臺/物鏡/鏡筒移動調(diào)焦),是否內(nèi)置濾色片)物鏡轉(zhuǎn)盤:多少物鏡安裝孔,粗/細(xì),手/電動轉(zhuǎn)換,是否有DIC安裝孔,是否可調(diào)中心,是固定還是可卸.載物臺:面積尺寸,移動范圍,左/右手調(diào)節(jié),是否可旋轉(zhuǎn),是否可定中心,承重能力(倒置/測量),精度(測量顯微鏡)聚光鏡:NA值,常規(guī)型(阿貝/齊明/搖擺式),專用型(長工作距離/偏光/相差)調(diào)焦機(jī)構(gòu):粗微調(diào)是否同軸,粗微調(diào)行程,微調(diào)精度(BX

67、41/2UM,BX51/1UM).,如何正確了解和使用顯微鏡,,系統(tǒng)配套圖,如何正確了解和使用顯微鏡,規(guī)范正確的顯微鏡使用方法：,顯微鏡觀察及照相的正確調(diào)整顯微鏡機(jī)械及電器部分使用的注意事項(xiàng),如何正確了解和使用顯微鏡,顯微鏡觀察的正確調(diào)整,正確調(diào)整光路的重要性燈絲的對中調(diào)整透射顯微鏡光路的調(diào)整方法反射顯微鏡光路的調(diào)整方法,如何正確了解和使用顯微鏡,正確調(diào)整光路的重要性,在顯微鏡中，光學(xué)器件調(diào)校的正確與否，將直接影響有效的標(biāo)本照明

68、。不正確的校正將嚴(yán)重地影響顯微鏡攝影照片的質(zhì)量，使其產(chǎn)生斑點(diǎn)、虛光、色斑、襯度不良及其它各式各樣的缺陷我們經(jīng)?？吹?在提供給學(xué)術(shù)討論、展覽會和科技出版物的顯微攝影照片中，有80%到90%光路校正均不正確，其標(biāo)本的照明狀況很差。這是顯微觀察和顯微攝影中存在的一個十分嚴(yán)重的通病。在很多情況下，一臺設(shè)計(jì)精良的顯微鏡并不能獲得良好的成像質(zhì)量。其主要原因多半是光源未調(diào)校好，使標(biāo)本不能獲得充分的照明所至。顯微鏡標(biāo)本最佳的照明狀態(tài)應(yīng)該是明亮、無眩