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1、植物的光合速率測定改良半葉法一、植物的光合速率測定改良半葉法光合作用是綠色植物特有的生理功能,是綠色植物吸收光能將CO2和H20合成為有機物質(zhì)并釋放O2的過程。光合作用及其有關(guān)過程的測定是植物生理學(xué)實驗的重要組成部分。光合作用是由原初反應(yīng)、同化力形成和二氧化碳同化3個主要階段組成。原初反應(yīng)包括光合色素對光能的吸收、光能的傳遞和光化學(xué)反應(yīng),主要與葉綠素和其它光合色素有關(guān);而同化力(ATP和NADPH2)的形成主要與膜的特性有關(guān),二氧化碳同
2、化除受同化力供應(yīng)影響外,還受與暗反應(yīng)有關(guān)酶活性的影響。光合作用強弱與環(huán)境條件變化密切相關(guān)。光合速率是植物生理性狀的一個重要指標(biāo),也是估測植株光合生產(chǎn)能力的主要依據(jù)之一。光合速率可根據(jù)植物對CO2的吸收量,O2的釋放量或干物質(zhì)(有機物質(zhì))的積累量來進(jìn)行測定。隨著光合作用研究的深入,光合作用測定技術(shù)的水平也在不斷提高,方法和手段也越來越多。本次實驗學(xué)習(xí)光合速率測定最經(jīng)典的方法之一改良半葉法。[原理]植物葉片的主脈兩側(cè)對稱部分葉面積基本相等,
3、其形態(tài)和生理功能也基本一致。用物理或化學(xué)方法處理葉柄或莖的韌皮部,保留木質(zhì)部,以阻斷葉片光合產(chǎn)物的外運,同時保證正常水分供應(yīng)。然后,將對稱葉片的一側(cè)取下置于暗中,另一側(cè)留在植株上保持光照,繼續(xù)光合作用。一定時間后,測定光下和暗中葉片的干重差,即為光合作用的積累的干物質(zhì)量。通過公式計算出光合速率。乘以系數(shù)后還可計算出C02的同化量。[材料、儀器、藥品]1材料:任選戶外一種植物。2儀器及用品:(1)剪刀;(2)4塊濕紗布;(3)帶蓋磁盤;(
4、4)30個小紙牌,去戶外之前用鉛筆編號(1~15;1~15);(5)鑷子;(6)打孔器;(7)鉛筆;(8)記號筆;(9)12個稱量瓶;(10)烘箱;(11)分析天平;(12)干燥器。3藥品:5%三氯乙酸。[方法]1取樣:在戶外選擇較綠和較黃的同種植物葉片各15片,要注意葉齡、葉色、著生節(jié)位、葉脈兩側(cè)和受光條件的一致性。綠葉和黃葉分別用紙牌編號(例如綠葉為1、2、3~15,黃葉為1`、2`、3`~15`)。增加葉片的數(shù)目可提高測定的精確度
5、。2處理葉柄:為阻止葉片光合作用產(chǎn)物的外運,可選用以下方法破壞韌皮部。(1)環(huán)割法:用刀片將葉柄的外層(韌皮部)環(huán)割0.5cm左右。為防止葉片折斷或改變方向,可用錫紙或塑料套管包起來保持葉柄原來的狀態(tài)。(2)燙傷法:用棉花球或紗布條在90℃以上的開水中浸一浸,然后在葉柄基部燙半分鐘左右,出現(xiàn)明顯的水浸狀就表示燙傷完全。若無水浸狀出現(xiàn)可重復(fù)做一次。對于韌皮部較厚的果樹葉柄,可用融熔的熱蠟燙傷一圈。(3)抑制法:用棉花球蘸取5%三氯乙酸或0
6、.3molL的丙二酸涂抹葉柄一周。本實驗統(tǒng)一使用三氯乙酸。注意勿使抑制液流到植株上。選用何種方法處理葉柄,視植物材料而定。一般雙子葉植物韌皮部和木質(zhì)部容易分開宜采用環(huán)割法;單子葉植物如小麥和水稻韌皮部和木質(zhì)部難以分開,宜使用燙傷法;而葉柄木質(zhì)化程度低,易被折斷葉片采用抑制法可得到較好的效果。3剪取樣品:葉柄處理完畢后即可剪取樣品,并開始記錄時間,進(jìn)行光合作用的測定。首先按編號次序(綠葉和黃葉交替進(jìn)行)剪下葉片對稱的一半(主脈留下),并按
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