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文檔簡(jiǎn)介
1、泉州師范學(xué)院教案泉州師范學(xué)院教案1實(shí)驗(yàn)二紅細(xì)胞沉降速率及紅細(xì)胞滲透脆性的測(cè)定一、目的要求1、學(xué)習(xí)測(cè)定紅細(xì)胞沉降速率、紅細(xì)胞滲透脆性的方法;2、觀察紅細(xì)胞的溶血現(xiàn)象;掌握紅細(xì)胞生理特性的生理意義。二、基本原理1正常情況下,血紅蛋白完全包含在紅細(xì)胞內(nèi)。某些毒素、溶劑或低滲溶液可使細(xì)胞膜破裂,血紅蛋白從紅細(xì)胞中逸出稱(chēng)溶血,也叫紅細(xì)胞溶解。將紅細(xì)胞置于高滲溶液中則失水而皺縮;若置于低滲溶液中則吸水膨脹,并隨滲透壓的繼續(xù)下降而破裂(這是由細(xì)胞膜的
2、選擇通透性決定的)。紅細(xì)胞對(duì)低滲溶液有一定的抵抗力,這一特征稱(chēng)為紅細(xì)胞的滲透脆性即脆性。對(duì)低滲溶液抵抗力小表示脆性大;反之則小。剛能引起一部分紅細(xì)胞溶解的低滲Nacl溶液濃度代表紅細(xì)胞的最大脆性;使紅細(xì)胞全部溶解的NaCl溶液濃度代表紅細(xì)胞的最小脆性。2紅細(xì)胞在循環(huán)血液中具有懸浮穩(wěn)定性,但在血沉管內(nèi)因重力作用會(huì)逐漸下沉。通常以第1小時(shí)末紅細(xì)胞下降的距離(mm),作為沉降率的指標(biāo),簡(jiǎn)稱(chēng)為血沉。血漿中某些特性的改變會(huì)改變紅細(xì)胞的沉降速率,因
3、而血沉可作為某些疾病檢查的指標(biāo)之一。血沉是以血漿層的高度來(lái)決定的。血漿層越高,表示沉降率越快。紅細(xì)胞沉降率的正常標(biāo)準(zhǔn)隨測(cè)定方法而異。三、材料與器材兔注射器及針頭小試管及試管架1%NaCl溶液蒸餾水小燒杯1ml移液管血沉管及血沉管架3.8%檸檬酸鈉四、實(shí)驗(yàn)步驟(一)紅細(xì)胞滲透脆性的測(cè)定1配制梯度NaCl溶液取小試管10支,編號(hào)排列在試管架上,按下列實(shí)驗(yàn)表要求配制10種濃度的低滲鹽溶液實(shí)驗(yàn)表不同濃度的低滲鹽溶液的配制123456789101
4、%NaCl溶液(ml)0.900.650.600.550.500.450.400.350.300.25蒸餾水(ml)0.100.350.400.450.500.550.600.650.700.75NaCl溶液梯度(%)0.900.650.600.550.500.450.400.350.300.252采血、混勻、靜置用注射器從兔心采血2ml(制成抗凝血——血液:抗凝劑=1:2),立即在各試管中加一滴血混合均勻,室溫放置1h。3觀察結(jié)果根據(jù)
5、各管混合液的顏色和混濁度的不同,判斷最大脆性和最小脆性。(1)未發(fā)生溶血的試管:液體下層為混濁紅色,上層為無(wú)色,表明無(wú)紅細(xì)胞破裂。(2)部分溶血的試管:液體下層為混濁紅色,而上層出現(xiàn)透明紅色,表明部分紅細(xì)胞已破裂,稱(chēng)為不完全溶血。出現(xiàn)不完全溶血的最大低滲鹽溶液,是該血液紅細(xì)胞的最小抵抗力,表示紅細(xì)胞的最大脆性。(3)全部溶血的試管:液體完全變成透明紅色,表明紅細(xì)胞完全破裂,稱(chēng)為完全溶血。出現(xiàn)完全溶血的最大低滲溶液,為該血液紅細(xì)胞的最大抵
6、抗力,表示紅細(xì)胞的最小脆性。試管號(hào)試液泉州師范學(xué)院教案泉州師范學(xué)院教案2注意事項(xiàng):1配制不同濃度的低滲鹽溶液時(shí),小試管的口徑與大小應(yīng)一致。加抗凝血量要準(zhǔn)確一致,只加1滴。2混勻時(shí),用手指堵住試管口,輕輕傾倒1~2次,不可用力振蕩,避免人為的溶血。3NaCl溶液梯度必須精確配制(二)紅細(xì)胞沉降率的測(cè)定(韋氏法)1血沉管結(jié)構(gòu)血沉管從上到下為0200mm刻度,內(nèi)徑為2.0mm,長(zhǎng)度300mm。2潤(rùn)洗用3.8%檸檬酸鈉潤(rùn)洗血沉管。3吸抗凝血、固
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