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1、崇州醫(yī)院細胞治療中心標準操作程序CIK細胞制備SOPTC001第1頁共12頁CIKCIK細胞制備標準操作程序細胞制備標準操作程序1目的和范圍:1.1目的:規(guī)范CIK細胞培養(yǎng)過程,保證操作準確,避免人為操作誤差導致實驗效果不良或失敗。1.2范圍:該規(guī)程適用于實驗室細胞培養(yǎng)技術(shù)人員CIK細胞培養(yǎng)操作的全過程。2原理:2.1外周血單核細胞經(jīng)細胞刺激因子誘導后分分化為CIK細胞。3相關(guān)文件:3.14物料:4.1試劑:75%酒精,碘伏,生理鹽水,
2、淋巴細胞分離液(Ficoll),GTT551培養(yǎng)基CIK條件培養(yǎng)基1、CIK條件培養(yǎng)基2。4.2儀器設(shè)備:生物安全柜,離心機,水浴鍋,二氧化碳細胞培養(yǎng)箱,電動移液槍,10ul移液槍,200ul移液槍,醫(yī)用剪崇州醫(yī)院細胞治療中心標準操作程序CIK細胞制備SOPTC001第3頁共12頁后放入生物安全柜中備用。7.1.3單核細胞分離液(Ficoll)提前30min從4℃冰箱取出待用。7.1.4單核細胞分離液(Ficoll),GTT551培養(yǎng)基
3、,血清,在實驗前需提前準備好放入生物安全柜中,以便其恢復常溫,否則將會影響實驗效果。7.2分離7.2.1制備血漿:7.2.1.1將樣本從醫(yī)療器械盒中小心地取出,用酒精擦拭消毒后放入生物安全柜。7.2.1.2打開器械盒(注意手不得從打開的器械盒上方通過),用生物安全柜中的止血鉗從器械盒中取出滅菌指示卡,確認已滅菌。取出器械盒中止血鉗,用其夾緊血袋軟管下方。7.2.1.3用浸泡過碘伏和酒精的棉簽對軟管中上部交替消毒兩次,(先碘伏,后酒精,如
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