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文檔簡介
1、植物生物技術(shù)的概念:植物生物技術(shù):指對植物品質(zhì)和性狀進(jìn)行改造的生物技術(shù)植物生物技術(shù)核心技術(shù)及其在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用創(chuàng)造新材料培育新品種開發(fā)功能食品快速繁殖稀有材料材料的指紋分析新基因挖掘、定位、輔助育種等第一章?植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用:?(1)快速繁殖和規(guī)?;a(chǎn)?(2)培養(yǎng)無病毒植株?(3)培育轉(zhuǎn)基因植物?(4)突變體篩選?(5)制成人工種子?滅菌的方法和原理?(1)滅菌方法?物理滅菌:高溫高壓滅菌干熱滅菌射線照射滅菌過濾滅菌?化學(xué)滅菌:熏
2、蒸滅菌消毒液滅菌?(2)滅菌原理?(a)高溫高壓滅菌?原理:將待滅菌的物品放在一個(gè)密封的高壓高溫滅菌鍋內(nèi),在121℃高溫和每平方厘米1個(gè)大氣壓下,一般持續(xù)15-20min,就可殺死一切微生物的營養(yǎng)體及其孢子,適于器皿、工具、衣物和培養(yǎng)基滅菌。?(2)過濾滅菌法?原理:將帶菌的液體或氣體通過孔徑小于0.45m微孔濾器裝置,使液、氣體通過濾膜流入無孔瓶中。?培養(yǎng)基的種類和特點(diǎn)?目前發(fā)展出的培養(yǎng)基有幾十種,但常用的有MS、B5、white、N
3、6、SH、KM8P等。?(1)MS培養(yǎng)基?1962年Murashige和Skoog為培養(yǎng)煙草組織時(shí)設(shè)計(jì)的,是目前應(yīng)用最廣泛的一種培養(yǎng)基。?無機(jī)鹽濃度高,養(yǎng)分平衡,尤其是銨鹽和硝酸鹽的含量很大?它不適合生長緩慢、對無機(jī)鹽濃度要求比較低的植物,尤其不適合銨鹽過高易發(fā)生毒害的植物。?與MS培養(yǎng)基基本成分較為接近的還有LS、RM培養(yǎng)基,LS培養(yǎng)基去掉了甘氨酸、鹽酸吡哆醇和煙酸;RM培養(yǎng)基把硝酸銨的含量提高到4950mgL,磷酸二氫鉀提高到510
4、mgL。?(2)White培養(yǎng)基?1943年由White設(shè)計(jì)的,1963年做了改良。?無機(jī)鹽濃度較低?適于生根培養(yǎng)?(3)N6培養(yǎng)基?1974年,朱至清等學(xué)者為水稻等禾谷類作物花藥培養(yǎng)而設(shè)計(jì)的?KNO3和(NH4)2SO4含量高,不含鉬?適于花粉和花藥培養(yǎng)。?(4)B5培養(yǎng)基脫落酸、乙烯成熟、衰老和環(huán)境條件4、其他附加物不是植物生長所必需的,但對細(xì)胞生長有益(1)凝固劑?瓊脂(agar)是固體培養(yǎng)基的必要成分,瓊脂是一種由海藻中提取的高
5、分子碳水化合物,本身并不提供任何營養(yǎng)?瓊脂能溶解在熱水中,成為溶膠,冷卻至40℃即凝固為固體狀凝膠。(2)抗生素?抗生物質(zhì)(antibiotic),包括青霉素、鏈霉素、慶大霉素等,用量在5—20mgL之間?添加抗生物質(zhì)可防止菌類污染,減少培養(yǎng)中材料的損失,尤其是快速繁殖中,常因污染而丟棄成百上千瓶的培養(yǎng)物,采用適當(dāng)?shù)目股乇憧晒?jié)約人力、物力和時(shí)間(3)活性炭?活性炭為木炭粉碎經(jīng)加工形成的粉沫結(jié)構(gòu),它結(jié)構(gòu)疏松,孔隙大,吸水力強(qiáng),有很強(qiáng)的吸
6、附作用?通常使用濃度為0.5—l0g/L?活性炭(activecarbon)可以降低組織培養(yǎng)物的有害代謝物濃度,對細(xì)胞生長有利培養(yǎng)基的制備1、母液的配制配制母液有兩個(gè)好處:?可減少每次配制稱量藥品的麻煩?減少極微量藥品在每次稱量時(shí)造成的誤差(1)大量元素母液:?可配成10倍母液用時(shí)每配1000ml培養(yǎng)基取100ml母液(2)微量元素母液?因含量低,一般配成100倍甚至1000倍,每配1000ml培養(yǎng)基取10ml或1ml(3)鐵鹽母液?必
7、須單獨(dú)配制,若與其它元素混合易造成沉淀(4)有機(jī)化合物母液?主要是維生素和氨基酸類物質(zhì),這類物質(zhì)不能配成混合母液,一定要分別配成單獨(dú)的母液,濃度為每毫升含0.1110mg使用時(shí)根據(jù)需要量取(5)激素?每種激素必須單獨(dú)配成母液,其濃度為0.10.5或1.0mgml多數(shù)激素難溶于水,2、培養(yǎng)基的配制(1)分別按配方逐個(gè)加入各種貯備液,包括生長調(diào)節(jié)物質(zhì)和其他的特殊補(bǔ)加物。(2)充分混合之后,用1molLNa0H和1molLHCl調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的p
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