如何實時捕捉rna翻譯過程

1、如何實時捕捉如何實時捕捉RNA翻譯過程翻譯過程來自斯坦福大學醫(yī)學院結(jié)構(gòu)生物學系，日本科學技術(shù)機構(gòu)（JapanScienceTechnologyAgency，簡稱JST），約翰霍普金斯大學醫(yī)學院的研究人員利用一種新型技術(shù)，實時觀測到了單個核糖體如何將氨基酸串聯(lián)起來的過程。這一研究成果公布在Nature雜志上。文章的通訊作者是來自斯坦福大學醫(yī)學院的結(jié)構(gòu)生物學家JosephD.Puglisi，這位在RNA結(jié)構(gòu)生物學研究領(lǐng)域獲得了許多重要成果的

2、科學家一直都希望能夠解析RNA各種活動和功能的結(jié)構(gòu)變化過程。RNA是自然界中最忙碌的分子之一。一度被相信只不過是貯存與傳送遺傳資訊而已，不過現(xiàn)在已知它能完成其它多樣化的功能，從調(diào)控基因表達與其它維持生命所必需的細胞程序到作為一種感應(yīng)器，那能夠檢測細胞信號并完成應(yīng)答應(yīng)。這個多才多藝的分子其中一項重要的功能就是在于蛋白翻譯過程，自上個世紀以來，蛋白翻譯過程就已經(jīng)活動了許多重要的成果，一些已經(jīng)進行到了單分子水平，去年的諾貝爾化學獎就頒給了在這

3、方面獲得突出成果的兩位科學家（核糖體結(jié)構(gòu)和功能的研究）。但是至并可能成為一個障礙，這需要更進一步的改進。最新的這項研究將這一技術(shù)與RNA翻譯過程結(jié)合起來，研究人員在一個微室中將大腸桿菌的核糖體復合物固定，這一起始N甲?；鞍彼?fMet)tRNA的70S起始復合物帶有熒光基團標記，并且研究人員還添加了另外兩個tRNA，用不同的染料來標記，這些tRNA與被檢測的mRNA編碼的氨基酸——苯丙氨酸和賴氨酸同源。上圖左邊是這一實驗的具體流程，右

4、邊是預(yù)期的信號分析。研究人員首先檢測出fMettRNA信號，之后又嘗試了把每種tRNA結(jié)合核糖體標記上之后，就可以檢測mRNA，這些熒光信號能檢測出tRNA。當每一個被標記的tRNA與被固化在一個ZMW的核糖體結(jié)合時，一個清晰的分離信號被記錄下來。隨著時間延長，由tRNA占據(jù)的核糖體位點被監(jiān)測熒光信號所延伸。這個過程是在微反應(yīng)室（10–21）中進行了，因此可以在接近生理濃度的水平下進行單分子的實時觀測，從而研究人員可以利用這一方法作為生