柑橘病理學(xué)

1、柑橘碎葉病柑橘碎葉病摘要：本文先從柑橘碎葉病的發(fā)生概況，傳播途徑，危害癥狀以及防治方法等一些宏觀方面進(jìn)行概述。然后再從微觀方面寫引起柑橘碎葉病的病毒及其檢測方法。關(guān)鍵詞：碎葉病危害癥狀防治方法檢測柑橘碎葉病(Tatterleaf)于1962年在美國加利福尼亞的北京來檬上首先發(fā)現(xiàn)。受感染的北京來檬不表現(xiàn)癥狀，但嫁接接種于厚皮檸檬時，新葉上出現(xiàn)葉片扭曲、葉緣殘缺呈破碎因而得名。報(bào)道有碎葉病的國家，除美國外，還有南非、澳大利亞、日本、菲律賓和

2、韓國。1.1.概況概況在國內(nèi)，1984年臺灣首先報(bào)道、蕉柑和柳橙感染柑橘碎葉病毒，后又發(fā)現(xiàn)默科特、溫州蜜柑、華盛頓臍橙、無酸甜橙、和葡萄柚亦受感染。浙江黃巖的本地早、少核本地早、槾橘、早橘、朱紅、乳橘、北京來檬、興津溫州蜜柑及溫州的柳橙等10個品種的枳砧或枸頭橙砧的植株都感染碎葉病毒。四川重慶江北農(nóng)場的北京來檬，國家果樹種質(zhì)重慶柑橘圃的蕉柑、柱柑、五布紅心柚、古老錢沙田柚、相橘、冰糖橙、蒔橘等受碎葉病感染。廣西柳州的蕉柑、新會橙、暗柳橙

3、、柱柑，廣東的楊村新會橙、汕頭蕉柑，福建漳州的槿柑，湖南的冰糖橙和大紅甜橙以及湖北的黃陵無核橙等亦受柑橘碎葉病毒的侵染。它主要危害以枳和枳橙作砧木的柑橘樹，引起植株黃化、衰弱，甚至整株枯死。2.2.傳播途徑傳播途徑2.12.1通過嫁接傳病毒通過嫁接傳病毒據(jù)報(bào)道，用帶碎葉病毒的北京來檬嫁接接種在以臘斯克枳橙、特洛亞枳橙、卡里佐枳橙和枳作砧木的甜橙上，會引起接合部腫大，樹體矮化衰弱。2.22.2通過受污染的刀剪傳播通過受污染的刀剪傳播據(jù)報(bào)道

4、，通過污染的刀剪在香櫞之間傳病，傳毒率達(dá)92%以上。2.32.3通過菟絲子從長春花傳到枳橙通過菟絲子從長春花傳到枳橙3.3.危害癥狀危害癥狀3.13.1以枳及枳橙作砧的柑橘植株染病后砧穗接合部環(huán)縊靠近接口的接穗部腫大。剝開接合部樹皮，可見接穗與砧木間的木質(zhì)部有一圈縊縮線，受強(qiáng)風(fēng)等外力推動，病樹砧穗接合處易斷裂，裂面光滑。3.23.2在葉片出現(xiàn)黃色透明斑點(diǎn)，圓形或不規(guī)則形，葉片邊緣缺損葉片畸形且葉脈透明。3.33.3在莖上首先出現(xiàn)水漬狀的

5、縱向溝條，后變成黃白色條斑，稍凹陷，剝開黃斑處的樹皮，莖的木質(zhì)部沒有凹陷，有時條斑聯(lián)合成斑塊，枝條彎曲。3.43.4地上部黃化、落葉。植株生長衰弱、矮化、結(jié)果很少，甚至枯死。4.4.防治方法防治方法離子lμL.，10mmol／L引物1μL.，cDNAlμL.，TaqDNA聚合酶004u／μL.，用滅菌的雙蒸餾水補(bǔ)足25μL.。[1]6.3.26.3.2多重多重PCRPCR反應(yīng)體系反應(yīng)體系[3]dNTPs的濃度提高到05mmol／L，鎂離

6、子設(shè)7個處理(15、20、25、30、35、40、45mmol／L)，Hot—starTaq酶01U／μL.，病毒特異引物03lamol／L。反應(yīng)程序：94℃預(yù)變性3min；940C變性30s，60℃退火30s，72℃延伸lmin，35個循環(huán)，最后一個循環(huán)72℃延伸10min。所用PCR試劑購于北京天為時代生物技術(shù)有限公司。PCR均在PTC100，MJ—ResearchINCPCR擴(kuò)增儀上進(jìn)行。[1]6.4PCR6.4PCR產(chǎn)物的檢測分

7、析和測序產(chǎn)物的檢測分析和測序PCR產(chǎn)物的電泳分析：1TBE電泳緩沖液，25％瓊脂糖凝膠(含EB05斗g／mL)，5L上樣，100v穩(wěn)壓電泳至譜帶完全分開。在BIOIMAGINGSYSTEM觀察結(jié)果。PCR產(chǎn)物測序由上海鼎安生物科技有限公司完成。[1]參考文獻(xiàn)[1]肖遠(yuǎn)輝曾繼吾張秋明周碧容.2007.柑橘衰退病、裂皮病和碎葉病的多重RTPCR檢測方法研究.植物病理學(xué)報(bào)37(1)：3135.[2]張?zhí)祉稻幹?2000.柑桔病毒病.中國農(nóng)業(yè)出