抑菌實驗

1、于測定抗菌藥物體外抑制細菌生長效力的試驗稱為抑菌試驗。通過抑菌實驗，可以測定一個藥物的最低抑菌濃度，用以評價該藥物的抑菌性能，這是抗菌藥物的最基本的藥效學(xué)數(shù)據(jù)。主要方法有進行定性測定的擴散法（如抑菌斑試驗）和進行定量測定的稀釋法（如最低抑菌濃度實驗）。[1]目錄1簡介2常用方法?常量肉湯稀釋法?微量肉湯稀釋法?瓊脂稀釋法?紙片擴散法?E試驗1簡介編輯用于測定抗菌藥物體外抑制細菌生長效力的試驗稱為抑菌試驗。通過抑菌實驗，可以測定一個藥物的

2、最低抑菌濃度，用以評價該藥物的抑菌性能，這是抗菌藥物的最基本的藥效學(xué)數(shù)據(jù)。主要方法有進行定性測定的擴散法（如抑菌斑試驗）和進行定量測定的稀釋法（如最低抑菌濃度實驗）。[1]2常用方法編輯常量肉湯稀釋法A、抗菌藥物貯存液制備1.1.1.抗菌藥物貯存液制備抗菌藥物貯存液濃度不應(yīng)低于1000μgml(如1280μgml)或10倍于最高測定濃度。溶解度低的抗菌藥物可稍低于上述濃度?？咕幬镏苯淤徸詮S商或相關(guān)機構(gòu)。所需抗菌藥物溶液量或粉劑量可公式

3、進行計算。例如：需配制100ml濃度為1280μgml的抗生素貯存液，所用抗生素為粉劑，其藥物的有效力為750μgmg。用分析天平精確稱取抗生素粉劑的量為182.6mg。根據(jù)公式計算所需稀釋劑用量為：（182.6mg750μgml）1280μgml=107.0ml，然后將182.6mg抗生素粉劑溶解于107.0ml稀釋劑中。制備抗菌藥物貯存液所用的溶劑和稀釋劑見表5。配制好的抗菌藥物貯存液應(yīng)貯F、稀釋抗菌藥物的制備及菌液接種1.1.5.

4、稀釋抗菌藥物的制備及菌液接種取無菌試管（13100mm）13支，排成一排，除第1管加入1.6mlMH肉湯外，其余每管加入MH肉湯1ml，在第1管加入抗菌藥物原液（如1280μgml）0.4ml混勻，然后吸取1ml至第2管，混勻后再吸取1ml至第3管，如此連續(xù)倍比稀釋至第11管，并從第11管中吸取1ml棄去，第12管為不含藥物的生長對照。此時各管藥物濃度依次為256、128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25μgml。然后

5、在每管內(nèi)加入上述制備好的接種物各1ml，使每管最終菌液濃度約為5105CFUml。第1管至第11管藥物濃度分別為128、64、32、16、8、4、2、1、05、0.25、0.125μgml。G、孵育1.1.6.孵育將接種好的稀釋管塞好塞子，置35℃普通空氣孵箱中孵育16~20h；嗜血桿菌和鏈球菌在普通空氣孵箱中孵育20~24h；對可能的耐甲氧西林葡萄球菌和耐萬古霉素腸球菌應(yīng)持續(xù)孵育滿24h。H、結(jié)果判斷與解釋1.1.7.結(jié)果判斷與解釋在

6、讀取和報告所測試菌株的MIC前，應(yīng)檢查生長對照管的細菌生長情況是否良好，同時還應(yīng)檢查接種物的傳代培養(yǎng)情況以確定其是否污染，質(zhì)控菌株的MIC值是否處于質(zhì)控范圍。以肉眼觀察，藥物最低濃度管無細菌生長者，即為受試菌的MIC。甲氧芐胺嘧啶或磺胺藥物的肉湯稀釋法終點判斷，與陽性生長對照管比較抑制80%細菌生長管藥物濃度為受試菌MIC。根據(jù)NCCLS推薦的分界點值標(biāo)準(zhǔn)，判斷耐藥（resistantR）、敏感(susceptibleS)或中介（int

7、ermediateI）。S表示被測菌株所引起的感染可以用該抗菌藥物的常用劑量治療有效，禁忌癥除外。R指該菌不能被抗菌藥物的常用劑量在組織液內(nèi)或血液中所達到的濃度所抑制，或?qū)儆诰哂刑囟退帣C理（如β內(nèi)酰胺酶），所以臨床治療效果不佳。I是指MIC接近藥物的血液或組織液濃度，療效低于敏感菌。還表示被測菌株可以通過提高劑量（如β內(nèi)酰胺類藥物）被抑制，或在藥物生理性濃集的部位（如尿液）被抑制。另外，中介還作為“緩沖域”，以防止由微小的技術(shù)因素失控