血液分析技術(shù)和相關(guān)儀器

1、第四章 血液分析技術(shù)與相關(guān)儀器,,,血液分析技術(shù)與相關(guān)儀器,血液分析儀器是臨床實驗室最常用的分析儀器，包括：血細(xì)胞分析儀血液凝固分析儀血液流變學(xué)分析儀,總目錄,第一節(jié) 血細(xì)胞分析儀第二節(jié) 血液凝固分析儀第三節(jié) 血液流變學(xué)分析儀,第一節(jié) 血細(xì)胞分析儀教學(xué)要求,掌握血細(xì)胞分析儀的概念、庫爾特原理、儀器的基本結(jié)構(gòu)。熟悉聯(lián)合檢測型血細(xì)胞分析儀器的檢測原理，網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測原理，血紅蛋白檢測原理、儀器性能評價和維護(hù)。了解

2、血細(xì)胞分析儀的分類、性能指標(biāo)、常見故障和排除及進(jìn)展。,本節(jié)目錄,第一節(jié) 目錄,一、血細(xì)胞分析儀概述二、儀器分型檢測原理基本結(jié)構(gòu)三、儀器的性能指標(biāo)、評價與調(diào)校四、儀器的維護(hù)與常見故障五、儀器的進(jìn)展與應(yīng)用展望 思考題,一、血細(xì)胞分析儀概述,血細(xì)胞分析儀(Blood cell analyzer,BCA)是指對一定體積全血內(nèi)血細(xì)胞異質(zhì)性進(jìn)行自動分析的臨床檢驗常規(guī)儀器。又稱血細(xì)胞自動計數(shù)儀(ABCC)、血液學(xué)自動分析儀

3、(AHA)。ABCC代表早期的低檔次BCA，AHA外延過大。,,返回本節(jié)目錄,一、血細(xì)胞分析儀概述,發(fā) 展 史 手工計數(shù)　　儀器簡單計數(shù)　　兩分群　　三分群　　五分群　　五分群＋網(wǎng)織紅,返回本節(jié)目錄,一、血細(xì)胞分析儀概述,20世紀(jì)40年代末， 電阻抗法微粒子計數(shù)專利50年代， Coulter Model A型用于臨床60年代， 測定參數(shù)達(dá)7項70年代， 全血細(xì)胞計數(shù)（CBC）80年代， 雙通道、白細(xì)胞

4、2~3分群、五分群90年代以來，多功能、多參數(shù)、流水線,返回本節(jié)目錄,二、儀器分型檢測原理基本結(jié)構(gòu),（一）血細(xì)胞分析儀分型按自動化程度按檢測原理按對白細(xì)胞的分類水平,返回本節(jié)目錄,二、儀器分型檢測原理基本結(jié)構(gòu),血細(xì)胞與等滲的電解質(zhì)溶液相比為相對的不良導(dǎo)體電阻值大于稀釋液的電阻值當(dāng)細(xì)胞通過檢測器微孔的孔徑感受區(qū)時，在內(nèi)外電極之間恒流源電路上，電阻值瞬間增大，產(chǎn)生一個電壓脈沖信號產(chǎn)生的脈沖信號數(shù)，等于通過的細(xì)胞數(shù)，脈沖信號幅

5、度大小與細(xì)胞體積大小成正比,(二)電阻抗法血細(xì)胞檢測原理,返回本節(jié)目錄,電 阻 抗 法 血 細(xì) 胞 檢 測 原 理,二、儀器分型檢測原理基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,1.白細(xì)胞的檢測,二、儀器分型檢測原理基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,2.紅細(xì)胞和血小板的檢測,紅細(xì)胞和血小板共用一個小孔管，正常人紅細(xì)胞體積和血小板體積間有一個明顯界限，血小板計數(shù)準(zhǔn)確容易,CPU對血小板和紅細(xì)胞分布圖進(jìn)行判斷,二、儀器分型檢測原理基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,2.紅細(xì)胞和血

6、小板的檢測,,浮動界標(biāo),二、儀器分型檢測原理基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,（三）聯(lián)合檢測型原理,主要體現(xiàn)在白細(xì)胞分類，實質(zhì)是選用較特異的方法將血中含量較少的嗜酸、嗜堿性粒細(xì)胞檢出，發(fā)現(xiàn)異常細(xì)胞。共有特點是：均使用了鞘流技術(shù)。,二、儀器分型檢測原理基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,1.容量、電導(dǎo)、光散射檢測技術(shù),,,,光散射,電導(dǎo)性,電阻抗,每個細(xì)胞接受三維分析定義到三維散點圖的相應(yīng)位置,二、儀器分型檢測原理基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,體積(volume，

7、V) 電阻抗原理測定細(xì)胞體積和數(shù)量電導(dǎo)性(conductivity，C) 高頻電磁探針，測量細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)，細(xì)胞內(nèi)核漿比例光散射(scatter，S)細(xì) 胞內(nèi)粗顆粒的光散射強(qiáng) 度要比細(xì)顆粒更強(qiáng),二、儀器分型檢測原理基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,2. 光散射與細(xì)胞化學(xué)聯(lián)合檢測技術(shù),這類儀器是應(yīng)用激光散射與細(xì)胞化學(xué)染色技術(shù)對白細(xì)胞進(jìn)行分類計數(shù)。,二、儀器分型檢測原理基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,,高角度前向散射光：細(xì)胞核及顆粒的信息低

8、角度前向散射光：細(xì)胞大小的信息,結(jié)合細(xì)胞化 學(xué)染色技術(shù)對 白細(xì)胞進(jìn)行分 類計數(shù),,二、儀器分型檢測原理基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,3.多角度激光散射聯(lián)合檢測技術(shù),基本原理是：基于細(xì)胞大小、折射率、核形、核漿比值、以及顆粒性質(zhì)等，均可影響不同角度下的散射光強(qiáng)度不同白細(xì)胞在以上幾個 方面完全一致的幾率很 小，從而對白細(xì)胞進(jìn)行 分類,二、儀器分型檢測原理基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,4.電阻抗、射頻與細(xì)胞化學(xué)聯(lián)合,這類儀器是利

9、用電阻抗、射頻這一成熟細(xì)胞計數(shù)技術(shù)結(jié)合細(xì)胞化學(xué)技術(shù)，通過4個不同的檢測系統(tǒng)對白細(xì)胞、幼稚細(xì)胞進(jìn)行分類和計數(shù)。嗜酸性粒細(xì)胞檢測系統(tǒng)嗜堿性粒細(xì)胞檢測系統(tǒng)淋巴、單核和粒細(xì)胞檢測系統(tǒng)幼稚細(xì)胞檢測系統(tǒng),,,二、儀器分型檢測原理基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,白細(xì)胞分類散射圖,聯(lián)合使用多項技術(shù)(流式、激光、射頻、電導(dǎo)、電阻抗、細(xì)胞化學(xué)染色)同時分析一個細(xì)胞，綜合分析實驗數(shù)據(jù)，從而得出較為準(zhǔn)確的白細(xì)胞“五分群”結(jié)果。,二、儀器分型檢測原理基本結(jié)構(gòu),返

10、回本節(jié)目錄,（四）網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測原理,,網(wǎng)織紅細(xì)胞中嗜堿性物質(zhì)RNA，在活體狀態(tài)下與特殊的熒光染料結(jié)合熒光強(qiáng)度與RNA含量成正比用流式細(xì)胞術(shù)檢測 網(wǎng)織紅細(xì)胞大小和 RNA含量及血紅蛋 白的含量,二、儀器分型檢測原理基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,細(xì)胞與試劑反應(yīng)前后的變化,反應(yīng)前,反應(yīng)后,二、儀器分型檢測原理基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,熒光(RNA)強(qiáng)度,,,Reticulocytes,,,,PLT,RBC,,,,,,,WBC,

11、,前向散射光(細(xì)胞大小),,,血細(xì)胞分析儀網(wǎng)織紅細(xì)胞成熟度分類,二、儀器分型檢測原理基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,（五）血紅蛋白測定原理,除干式、無創(chuàng)型外，各型BCA對血紅蛋白測定都采用光電比色原理血細(xì)胞懸液中加入溶血劑后，紅細(xì)胞溶解釋放出血紅蛋白，后者與溶血劑中有關(guān)成分結(jié)合形成血紅蛋白衍生物，進(jìn)入血紅蛋白測試系統(tǒng)特定波長(530～550nm)下進(jìn)行光電比色,二、儀器分型檢測原理基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,（六）儀器基本結(jié)構(gòu),機(jī)械系統(tǒng)電學(xué)系

12、統(tǒng)血細(xì)胞檢測系統(tǒng)血紅蛋白測定系統(tǒng)計算機(jī)鍵盤控制系統(tǒng),二、儀器分型檢測原理基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,1.機(jī)械系統(tǒng) 包括機(jī)械裝置（如全自動有進(jìn)樣針、分血器、稀釋器、混勻器、定量裝置等）和真空泵，以完成樣本的定量吸取、稀釋、傳送、混勻，以及將樣本移入各種參數(shù)的檢測區(qū),二、儀器分型檢測原理基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,2.電學(xué)系統(tǒng) 包括主電源、電壓元器件、控溫裝置、自動真空泵電子控制系統(tǒng)，以及儀器的自動監(jiān)控

13、、故障報警和排除等,二、儀器分型檢測原理基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,3.血細(xì)胞檢測系統(tǒng) 國內(nèi)常用的血細(xì)胞分析儀，使用的檢測技術(shù)可分為電阻抗檢測技術(shù)和光散射檢測技術(shù)兩大類,二、儀器分型檢測原理基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,電阻抗檢測技術(shù)：由檢測器、放大器、甄別器、閾值調(diào)節(jié)器、檢測計數(shù)系統(tǒng)和自動補償裝置組成流式光散射檢測技術(shù)：由激光光源、檢測裝置和檢測器、放大器、甄別器、閾值調(diào)節(jié)器、檢測計數(shù)系統(tǒng)和自動補償裝置組成,二、儀器分型檢測原理基本結(jié)構(gòu),

14、返回本節(jié)目錄,4.血紅蛋白測定系統(tǒng) 由光源、透鏡、濾光片、流動比色池和光電傳感器等組成。 5.計算機(jī)和鍵盤控制系統(tǒng),二、儀器分型檢測原理基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,三、儀器的性能指標(biāo)、評價與調(diào)校,（一）血細(xì)胞分析儀的性能指標(biāo) 1.測試參數(shù) 2.細(xì)胞形態(tài)學(xué)分析 3.測試速度 4.樣本量 5.精密度與示值范圍 6.打印,返回本節(jié)目錄,（二）血細(xì)胞分析儀的評價,ICSH公布了電子血細(xì)胞分析儀的評價方案：在細(xì)胞計數(shù)、血紅

15、蛋白測定方面，要評價儀器測試樣本的總變異、攜帶污染率、線性范圍、可比性和準(zhǔn)確性等,三、儀器的性能指標(biāo)、評價與調(diào)校,返回本節(jié)目錄,（三）血細(xì)胞分析儀的調(diào)校,出廠前已經(jīng)過廠方技術(shù)鑒定合格，但由于運輸振動或因故障維修后或長時間停用后再啟用等原因，以及正常使用半年以上或認(rèn)為有必要時，都必須對儀器進(jìn)行調(diào)校及性能測試，這對了解儀器性能，發(fā)現(xiàn)問題，確保檢驗質(zhì)量有重要意義,三、儀器的性能指標(biāo)、評價與調(diào)校,返回本節(jié)目錄,四、儀器的維護(hù)與常見故障,（一）儀

16、器的維護(hù) 1.安裝： 潔凈的環(huán)境、穩(wěn)定的電源、可靠的接地、適宜的溫度和濕度是保證BCA正常工作的前提。,返回本節(jié)目錄,2.維護(hù)：良好的工作環(huán)境是儀器正常工作的前提，精心細(xì)致的維護(hù)是儀器處于良好工作狀態(tài)的保證。做好儀器的維護(hù)保養(yǎng)，有助于提高儀器測量的準(zhǔn)確性，減少故障的發(fā)生，延長儀器的使用壽命。,四、儀器的維護(hù)與常見故障,返回本節(jié)目錄,檢測器的維護(hù) ①采血順利②防止纖維絲堵孔③關(guān)機(jī)前對檢測器的微孔進(jìn)行清理沖洗④計數(shù)

17、期間，及時按 “反沖”鍵，沖掉沉積變性的蛋白質(zhì)⑤定期卸下檢測器，用5%次氯酸鈉浸泡清洗,四、儀器的維護(hù)與常見故障,返回本節(jié)目錄,管路的維護(hù),四、儀器的維護(hù)與常見故障,返回本節(jié)目錄,機(jī)械傳動部位的維護(hù),四、儀器的維護(hù)與常見故障,（二）常見故障,有自我診斷功能，有故障發(fā)生時，內(nèi)置電腦的錯誤檢查功能顯示出“錯誤信息”，并伴有報警聲,四、儀器的維護(hù)與常見故障,返回本節(jié)目錄,1.開機(jī)時的常見故障2.測試過程中常見的錯誤信息 其中檢測器的微孔

18、堵塞是影響檢驗結(jié)果準(zhǔn)確性最常見的原因。根據(jù)微孔堵塞的程度，將其分為完全堵孔和不完全堵孔兩種。,四、儀器的維護(hù)與常見故障,返回本節(jié)目錄,,五、血細(xì)胞分析儀的進(jìn)展,儀器測試原理的不斷創(chuàng)新 白細(xì)胞分類的改進(jìn) 紅細(xì)胞和血小板計數(shù)原理的改進(jìn) 新血細(xì)胞分析參數(shù)的出現(xiàn)各種特殊技術(shù)的應(yīng)用儀器自動化水平的提高無創(chuàng)型全血細(xì)胞分析儀的研究,返回本節(jié)目錄,紅細(xì)胞和血小板計數(shù)原理的改進(jìn),二維激光散射法測定紅細(xì)胞和血小板,克服了電阻抗法在病理

19、情況下測定MCH、MCHC結(jié)果不準(zhǔn)及血小板計數(shù)精確性較差的缺點,五、血細(xì)胞分析儀的進(jìn)展,返回本節(jié)目錄,思 考 題,1.BCA的概念及功能是什么？2.簡述電阻抗血細(xì)胞檢測原理。3.簡述聯(lián)合檢測型BCA白細(xì)胞分類計數(shù)的實質(zhì)和共有特點4.簡述BCA網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測原理。5.如何對BCA進(jìn)行分類？半自動與全自動BCA的主要區(qū)別？6.如何對BCA進(jìn)行評價？7.電阻抗型BCA和聯(lián)合檢測型BCA的基本結(jié)構(gòu)？8.BCA的進(jìn)展表現(xiàn)在

20、哪幾個方面？9.BCA常見的堵孔原因有哪些？如何處理？10.BCA保證血小板準(zhǔn)確計數(shù)的技術(shù)有哪些？,返回本節(jié)目錄,第二節(jié) 血液凝固分析儀教學(xué)要求,掌握血凝儀的檢測原理和基本結(jié)構(gòu)熟悉半自動、全自動血凝儀的特點，血凝儀的性能評價以及各種檢測方法的優(yōu)缺點了解血凝儀的分類、臨床應(yīng)用、儀器的維護(hù)和進(jìn)展,本節(jié)目錄,第二節(jié) 目錄,血液凝固分析儀概述一、血凝儀分型與檢測原理二、血凝儀基本結(jié)構(gòu)與評價三、血凝儀的維護(hù)四、血凝儀臨床應(yīng)用與進(jìn)

21、展● 思考題,血液凝固分析儀概述,血液凝固分析儀（automated coayulation analyzer,ACA）是采用一定分析技術(shù)，對血栓與出血有關(guān)成分自動檢測的臨床常規(guī)檢驗儀器在血栓/出血實驗室中最基本的設(shè)備就是血液凝固分析儀（簡稱血凝儀）,返回本節(jié)目錄,血液凝固分析儀概述,發(fā) 展 史1910年，Kottman發(fā)明了最早的血凝儀1950年，Schnitger和Gross發(fā)明了基于電流法的血凝儀20

22、世紀(jì)70年代前為血凝儀的初級階段,返回本節(jié)目錄,血液凝固分析儀概述,20世紀(jì)70年代，較精確的各種自動血凝儀先后問世，其特點是：單通道、終點法的半自動血凝儀，也稱第一代產(chǎn)品20世紀(jì)80年代末，多通道、多種分析方法與原理的半自動血凝儀相繼誕生，稱之為第二代產(chǎn)品,各代血凝儀的特點,返回本節(jié)目錄,血液凝固分析儀概述,20世紀(jì)90年代以來，多通道、多方法、多功能全自動（即第三代）血凝儀不斷涌現(xiàn),返回本節(jié)目錄,一、血凝儀分型與檢測原理,（一）血

23、凝儀分型按自動化程度半自動血凝儀全自動血凝儀全自動血凝工作站,三者有何區(qū)別 ？,返回本節(jié)目錄,一、血凝儀分型與檢測原理,（二）血凝儀檢測原理主要檢測方法：凝固法、底物顯色法、免疫學(xué)法、干化學(xué)法等。,彼此有何不同？,返回本節(jié)目錄,一、血凝儀分型與檢測原理,,返回本節(jié)目錄,一、血凝儀分型與檢測原理,,1．凝固法原理 是通過檢測血漿在凝血激活劑作用下發(fā)生一系列物理量（光、電、超聲、機(jī)械運動等）的變化，再由計算機(jī)分析所得最

24、終結(jié)果，稱生物物理法。按測量原理分為電流法、超聲分析法、光學(xué)法和磁珠法四種。,呵！是血漿凝固的變化,返回本節(jié)目錄,一、血凝儀分型與檢測原理,光學(xué)法（比濁法）：是根據(jù)血漿凝固過程中濁度的變化，導(dǎo)致光強(qiáng)度變化來測定相關(guān)因子,,有何不同？誰優(yōu),返回本節(jié)目錄,一、血凝儀分型與檢測原理,光學(xué)法血凝儀工作流程,返回本節(jié)目錄,一、血凝儀分型與檢測原理,纖維蛋白的形成與吸光度,??？為何在50%？,返回本節(jié)目錄,一、血凝儀分型與檢測原理,雙磁路磁珠法原理

25、：測試杯的兩側(cè)各有一組驅(qū)動線圈，產(chǎn)生恒定的交替電磁場，使杯內(nèi)去磁小鋼珠保持等幅振蕩運動；凝血激活劑加入后，隨著纖維蛋白的增多，血漿黏稠度增加，小鋼珠運動振幅逐漸減弱，將運動幅度衰減到50?時確定為凝固終點,返回本節(jié)目錄,一、血凝儀分型與檢測原理,雙磁路磁珠法原理,,與光電磁法有何不同？,,與光電磁法有何不同？,返回本節(jié)目錄,,一、血凝儀分型與檢測原理,雙磁路磁珠法與光學(xué)法原理主要區(qū)別前者是檢測血漿凝固過程中磁電信號變化后者是檢測該過

26、程中光信號的變化,返回本節(jié)目錄,一、血凝儀分型與檢測原理,2.底物顯色法原理： 實質(zhì)為光電比色原理，是通過測定產(chǎn)色底物的吸光度變化來推測所測物質(zhì)的含量和活性，也稱生物化學(xué)法,返回本節(jié)目錄,一、血凝儀分型與檢測原理,3.免疫學(xué)法原理 以純化的被檢物質(zhì)為抗原，制備相應(yīng)的抗體，然后利用抗原抗體反應(yīng)對被檢物進(jìn)行定性或定量測定。血凝儀使用免疫比濁法,返回本節(jié)目錄,二、血凝儀的基本結(jié)構(gòu)與評價,（一）血凝儀基本結(jié)構(gòu)： 1.半自動血凝儀基本結(jié)構(gòu)

27、 主要由樣本預(yù)溫槽和試劑預(yù)溫槽、加樣器、檢測系統(tǒng)（光學(xué)、磁場）及微機(jī)組成,,全自動呢 ？,返回本節(jié)目錄,二、血凝儀的基本結(jié)構(gòu)與評價,2.全自動血凝儀基本結(jié)構(gòu) 包括樣本傳送及處理裝置、試劑冷藏位、樣本及試劑分配系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)、計算機(jī)、輸出 設(shè)備及附件等,,就這么簡單？,返回本節(jié)目錄,二、血凝儀的基本結(jié)構(gòu)與評價,（二）血凝儀評價 1.一般性評價：①產(chǎn)品質(zhì)量50%；②價格25%；③廠商評估10

28、%；④擔(dān)保5%；⑤售后服務(wù)5%；⑥可接受性5%。,返回本節(jié)目錄,二、血凝儀的基本結(jié)構(gòu)與評價,2.技術(shù)性能評價： 重復(fù)性測定、線性范圍、準(zhǔn)確性、攜帶污染率、干擾因素、可比性分析等幾方面,,攜便式血凝儀,返回本節(jié)目錄,二、血凝儀的基本結(jié)構(gòu)與評價,（三）血凝儀的特點 1.半自動血凝儀：①手工加樣加試劑；②操作簡便；③應(yīng)用檢測方法少；④價格便宜；⑤速度慢；⑥測量精度好于手工，但低于全自動,返回本節(jié)目錄,二、血凝儀的基本結(jié)構(gòu)與

29、評價,（三）血凝儀的特點 2.全自動血凝儀：①自動化程度高；②檢測方法多；③通道多，速度快；④項目任意組合，隨機(jī)性；⑤測量精度好，易于質(zhì)控和標(biāo)準(zhǔn)化；⑥智能化程度高，功能多；⑦價格昂貴；⑧對操作人員的素質(zhì)要求高。,返回本節(jié)目錄,三、血凝儀的維護(hù),（一）半自動血凝儀的維護(hù) ①保持測試槽清潔，嚴(yán)禁有異物進(jìn)入；②避免陽光直曬和遠(yuǎn)離強(qiáng)熱物體；③防止受潮和腐蝕；④儀器和加珠器都必須遠(yuǎn)離強(qiáng)電磁場干擾源；⑤電源電壓為220V&

30、#177;10％，最好使用穩(wěn)壓器；⑥使用一次性測試杯及鋼珠,返回本節(jié)目錄,三、血液凝固分析儀的維護(hù),（二）全自動血凝儀的維護(hù) ①清洗或更換空氣過濾器；②檢查及清潔反應(yīng)槽；③清洗洗針池及通針；④檢查冷卻劑液面水平；⑤清潔機(jī)械運動導(dǎo)桿和轉(zhuǎn)動部分并加潤滑油；⑥及時保養(yǎng)定量裝置；⑦更換樣品及試劑針；⑧數(shù)據(jù)備份及恢復(fù)等,返回本節(jié)目錄,四、血凝儀的臨床應(yīng)用與進(jìn)展,（一）臨床應(yīng)用1.凝血系統(tǒng)的檢測 2.抗凝系統(tǒng)的檢測3.纖維

31、蛋白溶解系統(tǒng)檢測 4.臨床用藥的監(jiān)測,返回本節(jié)目錄,四、血凝儀的臨床應(yīng)用與進(jìn)展,（二）進(jìn)展 主要體現(xiàn)在：①多方法、多功能、快速高效；②智能化程度高，軟件開發(fā)進(jìn)一步完善；③全自動血凝分析儀工作站；④床旁分析；⑤在臨床中的應(yīng)用日趨廣泛,返回本節(jié)目錄,思 考 題,1.血凝儀檢測原理有哪些？2.簡述光學(xué)法血凝儀檢測原理。其光路結(jié)構(gòu)有何不同？3.簡述雙磁路磁珠法的測定原理。4.凝固法與免疫學(xué)方法中透射比濁、散射比濁的

32、區(qū)別？5.簡述全自動血凝儀的主要特點及其維護(hù)與保養(yǎng)。 6.血凝儀光學(xué)法與雙磁路磁珠法的區(qū)別及優(yōu)缺點是什么？7.簡述血凝儀的臨床應(yīng)用。8.簡述血凝儀的性能評價。9.血凝儀的進(jìn)展體現(xiàn)在哪幾個方面？,返回本節(jié)目錄,第三節(jié) 血液流變學(xué)分析儀教學(xué)要求,1.掌握旋轉(zhuǎn)式黏度計和毛細(xì)管黏度計工作原理、基本結(jié)構(gòu)及黏度計性能評價2.熟悉黏度計調(diào)校與紅細(xì)胞變形儀測定原理3.了解旋轉(zhuǎn)式黏度計和毛細(xì)管黏度計性能指標(biāo)、日常維護(hù)方法及常見故障排除，紅

33、細(xì)胞變形儀基本結(jié)構(gòu)和評價及血液流變分析儀進(jìn)展,本節(jié)目錄,第三節(jié) 目錄,血液流變分析儀概述一、血液黏度計分類檢測原理與基本結(jié)構(gòu)儀器評價主要技術(shù)指標(biāo)調(diào)校與維護(hù)常見故障及排除二、紅細(xì)胞變形測定儀分類工作原理與基本結(jié)構(gòu)儀器評價主要技術(shù)指標(biāo)儀器的維護(hù)三、血液流變學(xué)分析儀器的進(jìn)展 思考題,血液流變分析儀概述,血液流變分析儀器（hemorheology analy-zer，HA）是對全血、血漿或血細(xì)胞流變特性

34、進(jìn)行分析的檢驗儀器。主要有：血液黏度計、紅細(xì)胞變形測定儀、紅細(xì)胞電泳儀、粘彈儀等。本節(jié)就前兩種常用儀器做一簡要介紹。,返回本節(jié)目錄,血液流變分析儀概述,發(fā) 展 史1931年Fahraeus等發(fā)現(xiàn)Fahraeus-Lindquist效應(yīng)，毛細(xì)管式血液黏度計隨之誕生1954年Michson等用微管吸吮法測定紅細(xì)胞變形性1961年Wells等研制成功了錐板旋轉(zhuǎn)式黏度計1975年Bessis等發(fā)明了激光衍射法測定儀,返回本節(jié)目錄,一

35、、血液黏度計,血液黏度大小直接影響到血液循環(huán)中阻力的大小，必然影響組織血液灌流量。對血液黏度測定有十分重要的臨床意義。能否準(zhǔn)確測量血液黏度依賴于黏度計性能的好壞。,返回本節(jié)目錄,（一）黏度計的分類,1．按工作原理 分為毛細(xì)管黏度計和旋轉(zhuǎn)式黏度計。前者按結(jié)構(gòu)分為奧氏黏度計和烏氏黏度計，后者按結(jié)構(gòu)可分為筒-筒式、錐-板式、錐-錐式以及棱球式黏度計等2．按自動化程度 分半自動黏度計和全自動黏度計,返回本節(jié)目錄,（二）黏度計檢測原理與基本

36、結(jié)構(gòu),1.毛細(xì)管黏度計 檢測原理：按泊肅葉（Poiseuille）定律設(shè)計，即一定體積的牛頓液體，在恒定的壓力驅(qū)動下，流過一定管徑的毛細(xì)管所需的時間與黏度成正比。血漿比黏度（ratio of viscosity）： 血漿比黏度=血漿時間/蒸餾水時間,返回本節(jié)目錄,（二）黏度計檢測原理與基本結(jié)構(gòu),毛細(xì)管黏度計基本結(jié)構(gòu)： 包括毛細(xì)管、儲液池、控溫裝置、計時裝置等。,毛細(xì)管黏度計,返回本節(jié)目錄,（二）黏度計檢測

37、原理與基本結(jié)構(gòu),2．旋轉(zhuǎn)式黏度計 2.1工作原理：以牛頓的粘滯定律為理論依據(jù)，主要有以外園筒轉(zhuǎn)動或以內(nèi)園筒轉(zhuǎn)動的筒-筒式旋轉(zhuǎn)黏度計（又稱Couette黏度計）和以園錐體轉(zhuǎn)動或以圓形平板轉(zhuǎn)動的錐板式（又稱Weissenberg黏度計）黏度計。,返回本節(jié)目錄,（二）黏度計檢測原理與基本結(jié)構(gòu),2.2錐板式黏度計工作原理：是同軸錐板構(gòu)型，平板與錐體間充滿被測樣本，調(diào)速電機(jī)與圓形平板同速旋轉(zhuǎn)，錐體與平板及馬達(dá)間均無直接聯(lián)系。當(dāng)圓形平板以某一

38、恒定角速度旋轉(zhuǎn)時，轉(zhuǎn)動的力矩通過被測樣本傳遞到錐體；樣本越粘稠，傳入的力矩越大。當(dāng)此力矩作用于錐體時，立即被力矩傳感裝置所俘獲，并將其轉(zhuǎn)換為電信號，其信號大小與樣本黏度成正比。,返回本節(jié)目錄,錐-板式粘度計,（二）黏度計檢測原理與基本結(jié)構(gòu),返回本節(jié)目錄,（二）黏度計檢測原理與基本結(jié)構(gòu),2.3基本結(jié)構(gòu)： 樣本傳感器 轉(zhuǎn)速控制與調(diào)節(jié)系統(tǒng) 力矩測量系統(tǒng) 恒溫系統(tǒng),返回本節(jié)目錄,（三）黏度計的評價,1.毛細(xì)管黏度計的特點 1.1價格低

39、廉、操作簡便、速度快、易于普及 1.2 測定牛頓流體黏度結(jié)果可靠，是血漿、血清樣本測定的參考方法,返回本節(jié)目錄,（三）黏度計的評價,1.3不能直接檢測某剪切率下的表觀黏度1.4不利于研究RBC、WBC的變形性和血液的粘彈性等難，以反映全血等非牛頓流體的黏度特性,返回本節(jié)目錄,（三）黏度計的評價,,（三）儀器的評價與鑒定,,2.旋轉(zhuǎn)式黏度計的特點2.1能提供所需不同角速度下的剪切率2.2被測液體中各流層的剪切率一致，使液體在剪切率

40、一致的條件下做單純的定向流動,返回本節(jié)目錄,（三）黏度計的評價,2.3可以定量了解全血、血漿的流變特性，RBC與WBC的聚集性、變形性等2.4操作使用較為簡單，是目前血液流變學(xué)研究和應(yīng)用較為理想的儀器2.5價格較貴，操作要求更精細(xì),返回本節(jié)目錄,（三）黏度計的評價,3．儀器性能評價 3.1 準(zhǔn)確度：以國家計量標(biāo)準(zhǔn)油為準(zhǔn)，在剪切率（1～200）s-1范圍內(nèi)分別用低黏度油（約2mPa.s）和高黏度油（約20mPa.s）測定其黏度，要

41、求實際測定值與真值的相對偏差＜3%,一、血液黏度計,,很重要哦！,返回本節(jié)目錄,（三）黏度計的評價,3.2 分辨率：是指黏度計所能識別出的血液表觀黏度最小變化量。取比容在0.40～0.45全血測試高剪切率200s-1狀態(tài)下，能反映出比容相差0.02時的血液表觀黏度的變化在低剪切率5s-1以下狀態(tài)，能反映出比容相差0.01時的血液表觀黏度的變化,返回本節(jié)目錄,（三）黏度計的評價,3.3 重復(fù)性：取比容在0.40～0.45血樣，測量

42、11次，取后10次測定值計算CV值在高剪切率時，血液表觀黏度CV＜3%在低剪切率時，血液表觀黏度CV＜5%,返回本節(jié)目錄,（三）黏度計的評價,3.4 靈敏度與量程：測力傳感器應(yīng)具有10mPa靈敏度才能測定1s-1的血液黏度恒定剪切應(yīng)力的黏度計，這一控制范圍包括100mPa～1000mPa,,太重要了！,返回本節(jié)目錄,（四）黏度計主要技術(shù)指標(biāo),1.性能指標(biāo) ①黏度測試范圍②剪切率變化范圍③黏度值重復(fù)性CV＜3％④準(zhǔn)確度

43、7;3%等 2.測試參數(shù) ①血漿黏度②全血黏度③血沉④紅細(xì)胞壓積等,返回本節(jié)目錄,（五）黏度計的調(diào)校與維護(hù),1．毛細(xì)管黏度計的調(diào)校與維護(hù)1.1 儀器調(diào)校：用重蒸餾水在37℃時測得時間比D=(t- t。)/ t。，要求D≤1%1.2 儀器維護(hù)：①殘留液處理，②毛細(xì)管污染處理③溫度控制,返回本節(jié)目錄,（五）黏度計的調(diào)校與維護(hù),2.旋轉(zhuǎn)式黏度計的調(diào)校與維護(hù)2.1 儀器調(diào)校：用國家計量單位所標(biāo)定的標(biāo)準(zhǔn)牛頓油，按儀器說明進(jìn)行標(biāo)定。

44、日常工作中也可以用重蒸餾水檢測儀器，看水的黏度是否為0.69mPa.s（37℃）2.2 儀器維護(hù)：電壓穩(wěn)定、機(jī)芯防塵、及時清洗測試頭和剪血板及剪血錐,返回本節(jié)目錄,（六）操作中常見故障及排除,1.“不能測試”的常見原因及處理辦法2.“突然停機(jī)”的常見原因及處理 3.測試數(shù)據(jù)與平時相差太大4.“自動沖洗儀不進(jìn)水” 和“不排水”,返回本節(jié)目錄,二、紅細(xì)胞變形測定儀,（一）紅細(xì)胞變形測定儀分類 大致分為兩類：一類是測

45、定或評價紅細(xì)胞群體變形能力的方法，如：黏度測量法、激光衍射法等。另一類是測定單個紅細(xì)胞變形性和膜的力學(xué)性質(zhì)的方法，如微管吸吮法、表面附著或纖維攔截法等。,返回本節(jié)目錄,二、紅細(xì)胞變形測定儀,（二）儀器的工作原理與基本結(jié)構(gòu)1.黏度測量法的工作原理與基本結(jié)構(gòu)工作原理：用旋轉(zhuǎn)式黏度計測量同一剪切率（100s-1或200s-1 ）下的全血黏度和血漿黏度，然后按下式計算紅細(xì)胞剛性指數(shù)： TK=（1-ηb-0.4/ηp）/HCT基

46、本結(jié)構(gòu)：同前旋轉(zhuǎn)式黏度計,返回本節(jié)目錄,二、紅細(xì)胞變形測定儀,2.錐板式激光衍射法工作原理與基本結(jié)構(gòu) 2.1 工作原理：根據(jù)紅細(xì)胞被激光照射時發(fā)生衍射，產(chǎn)生反映細(xì)胞幾何狀態(tài)的衍射圖像，當(dāng)有剪切應(yīng)力作用于紅細(xì)胞時，紅細(xì)胞發(fā)生形變，衍射圖也隨之變化，測定該作用力前后紅細(xì)胞形變率的大小來反映其變形性,返回本節(jié)目錄,二、紅細(xì)胞變形測定儀,2.2 基本結(jié)構(gòu)：主要由能提供可變剪切場的透明錐板結(jié)構(gòu)、光路系統(tǒng)（包括激光器和三棱鏡）、攝像系統(tǒng)、控溫

47、裝置、光電轉(zhuǎn)換器、處理器及顯示打印裝置組成,返回本節(jié)目錄,二、紅細(xì)胞變形測定儀,（三）儀器評價：各種方法均有優(yōu)缺點，應(yīng)將幾種方法配合使用，才能真正全面反映血細(xì)胞的流變特性 （四）主要技術(shù)指標(biāo)：性能指標(biāo)、測試參數(shù)及功能（五）儀器的維護(hù)：電壓穩(wěn)定、遠(yuǎn)離磁場、防止受潮、及時清洗、合理抗凝,返回本節(jié)目錄,三、血液流變學(xué)分析儀器的進(jìn)展,近年來，血液流變學(xué)有較大的進(jìn)步和發(fā)展，體現(xiàn)在：新技術(shù)不斷涌現(xiàn)、儀器自動化程度提高、功能多、隨機(jī)性、臨