cl-biii四通道殘留農藥測定儀 使用說明

1、CL-BIII四通道殘留農藥測定儀使用說明,上海博納新技術研究所2006年2月,農殘常識1,有機磷和氨基甲酸酯類殺蟲、殺螨劑的特點。兩類農藥的作用機理均為抑制動物體內乙酰膽堿酯酶的活性，破壞神經傳導，引起一系列的神經中毒癥狀，直至死亡。二者的主要區(qū)別在于：有機磷類殺蟲、殺螨劑對乙酰膽堿酯酶的抑制是不可逆的，而氨基甲酸酯類殺蟲、殺螨劑對乙酰膽堿酯酶的抑制是可逆的 。,農殘常識2,酶抑制率法和酶系酶源：國家標準GB/T 5009.199-

2、2003《蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘留量的快速檢測》推薦的酶抑制率法能方便、快速、準確、成本低廉檢測出農產品中的農藥殘留，也同時肯定了乙酰膽堿酯酶酶系作為快速檢測推薦試劑的活性量和具體要求。近年來，我們通過對動物源和植物源的多種丁酰膽堿酯酶、乙酰膽堿酯酶進行檢測實驗和比較研究，發(fā)現(xiàn)乙酰膽堿酯酶對農藥的檢測敏感度和綜合指標優(yōu)于丁酰膽堿酯酶；確定了有機磷和氨基甲酸酯類農藥對乙酰膽堿酸有較專一性的抑制作用；分析出在抑制率70%以下，大多

3、數(shù)農藥濃度和乙酰膽堿酯酶抑制率呈較好的線性關系，并能實現(xiàn)對單種農藥的定量分析；解決了酶的活性和穩(wěn)定性控制等技術,農殘常識3,什么是間接比色法:由于只有當?shù)孜锱c產物之間，在光學性質或其它理化性質有顯著差異時，才可能直接用分光光度計法測定，因此對酶活性濃度的監(jiān)測大多是采用間接監(jiān)測法。如對膽堿酯酶的測定：底物（硫代乙酰膽堿）及酶水解產物（硫代膽堿和乙酸）并不具有顏色，不能用分光光度計法測定。所以必須設法在原來反應體系中添加一些試劑，這些試劑必

4、須不與酶作用也不影響酶活性，同時又能與酶反應物迅速作用，產生可以被直接測定的物質。這就產生了Ellman的膽堿酯酶測定法即間接連續(xù)監(jiān)測法。目前國內大多廠家生產的快速農藥測定儀都采用了 Ellman的膽堿酯酶測定法即間接比色法。該方法通過監(jiān)測底物（硫代乙酰膽堿），酶水解產物硫代膽堿與添加的二硫代硝基苯甲酸（DTNB）作用立刻生成黃色化合物的反應速度來測定酶活性變化。,農殘常識4,什么是固定時間法:早期這類方法常被命名為“終點法”、“二點法

5、”、“固定時間法”和“取樣法”。該方法先選擇一段固定的時間（固定為3分鐘），先讓酶與底物在一定溫度下進行一段固定的時間（固定為3分鐘）的化學反應，并根據呈色測出底物和產物的變化用比色法對反應結果進行評定。由于“二點法”容易受到干擾，并產生誤差，使檢測穩(wěn)定性較低。,農殘常識5,什么是連續(xù)監(jiān)測法：50年代，Warburg首先用分光光度計測定酶的活性。該方法不需停止酶反應就可測定反應物的變化，容易觀察到反應的整個過程和干擾情況（通過繪制反應曲

6、線）。因此逐步取代了固定時間法成為目前測酶活性的主要方法。該方法是利用連續(xù)對反應過程進行高靈敏度檢測，并通過繪制整個酶反應曲線避開延滯期和非線性反應期，只在線性反應期測定最大反應初速度。由于儀器的高精密度，連續(xù)監(jiān)測法能在很短時間，甚至在1分鐘反應時間內就能準確測定出活性的抑制率。,技 術 指 標,CL-BIII四通道殘留農藥測定儀的技術指標：Ø 測量波長：410nmØ 通道數(shù)：4Ø 檢測用樣品器

7、皿：10mm比色皿Ø 光電流漂移：<1%  (3min)Ø  暗電流漂移：<1%  (3min)Ø 抑制率顯示范圍：0-100% Ø  抑制率測量范圍：10-100%Ø  農藥檢測：（用甲胺磷農藥標樣測試）Ø 抑制率示值誤差：±10 % Ø 抑制率重復性誤差： 5

8、%,第一部分 試劑配制第二部分 聯(lián)機使用第三部分 單機使用第四部分 相關技巧與常識,目 錄,第一部分試劑配制,1、試劑的配制,提取液：把提取液甲乙粉末倒入大玻璃瓶中，并加 510ml蒸餾水溶解。,酶試劑：用移液槍取3.1ml提取液，加入酶試劑瓶中。,顯色劑：用移液槍取20ml提取液，加入顯色劑瓶，溶 解后倒入棕色瓶中。,底 物：用移液槍取3.1ml蒸餾水

9、，加入底物瓶中。,2、試劑的保存及注意事項,1、本試劑適用的國家標準為：GB/T5009.199-2003。2、未配制的試劑，要保存在0℃以下的冷凍箱里。 （保質期可達1年）3、配制好的酶和底物試劑，要保存在4℃的冷藏箱內。 （保質期為一周）4、配制好的提取液常溫下可以長期保存。5、配制好的顯色劑需避光保存；常溫或冷藏，可以 保存1年。,第二部分聯(lián)機使用,第一步 儀器連接,1、

10、連接電源,將儀器的電源接頭和數(shù)據信號線接好。 如圖：,2、連接電腦,把RS232/RS485的轉換器接入電腦主機背后的COM口（串口）上，然后把數(shù)據信號線與轉換器連接上，這樣就完成了儀器與電腦的硬件連接。,第二步 檢測操作,安裝“農產品質量安全檢測軟件”,把“農產品質量安全檢測軟件”光盤放入電腦光驅中，等自動讀取或在光盤目錄下找到并雙擊“setup”后，按提示點擊“下一步”安裝。安裝完成以后，桌面上會出現(xiàn)“食品質量安全檢測平臺”的圖標。

11、,安裝完成桌面上出現(xiàn)的圖標,儀器設置,首先按儀器“設置”鍵，選擇為“受控”。然后再打開檢測軟件，檢測軟件的用戶名默認為“管理員”，密碼是“111111”。這樣檢測軟件對檢測儀器進行控制了。,檢測軟件登陸,操作步驟,整個的實驗操作過程可以分為三個大部分：,調0、調100,空白對照,樣品分析,,,調0/100,注：以上是一個檢測窗口的步驟，其他三個窗口都是如此。,按“ ”鍵,空白對照,用大移液槍抽取2.5ml提取液放入試管中,

12、裝入對照,按“裝入對照分析”鍵,注：對照結束后，對照曲線會自動保存. （標準對照庫中已有30種蔬菜的對照，在做這30種蔬菜時，請參照這些對照。）,裝入標準對照庫,按“裝入對照分析”鍵,用天平稱取1克果蔬,第三步 保存檢測結果,保存檢測結果,樣品結束后，系統(tǒng)自動彈出“檢測結果”對話框,備 注,“統(tǒng)計分析” 中的“農殘檢測數(shù)據查詢統(tǒng)計”對話框有所有保存過的檢測數(shù)據，在該對話框中有“開始日期“、“結束日期”、“果蔬品種”、“被檢單位”等

13、九項選項，對這些選項進行組合選擇后，再按“查詢”鍵，就可以將您需要的信息從所有的數(shù)據中篩選出來。另外，“農殘檢測數(shù)據查詢統(tǒng)計”對話框中還有“統(tǒng)計分析”和“轉存”等功能，當選擇出需要的檢測數(shù)據后，就可以按“統(tǒng)計分析”鍵或者“轉存”鍵，對數(shù)據進行統(tǒng)計分析或制成相應報表。如果需要打印單項檢測結果，則點選該結果后，按“打印當前記錄”鍵，瀏覽打印效果，再按打印鍵后打印。,第三部分單機使用,第一步 設置儀器,1、連接電源,將儀器電源連接好，

14、（如需打印，則要將專用打印機連接到儀器的打印接口上。）如圖：,2、儀器設置,打開儀器開關后，按提示進入儀器操作主界面。按“設置”鍵進入儀器設置功能，在“設置”里可以對“通道選擇”、“日期”、“打印方式”、“對照查詢”等進行設置。設置完成后再按“設置”鍵退回到主界面。,通道選擇,日期設置,第二步 檢測操作,操作步驟,整個的操作步驟分為三個大步驟：,調0、調100,空白對照,樣品分析,,,調0/100,在主界面狀態(tài)下，按0/100鍵，根據屏

15、幕提示逐一調1-4通道的0值，再調1-4通道的100值，最后按“確定”鍵結束。,空白對照,注：對照的時間默認為3分鐘，如需修改，則先要在“設置”中進行設置。,用大移液槍抽取2.5ml提取液放入試管中,用天平稱取1克果蔬,注：按“樣品”鍵后，四個通道同時進行檢測。,第三步 數(shù)據打印及退出,數(shù)據打印及退出,按“打印”鍵,第四部分相關技巧與常識,常見問題及相關技巧1,1.儀器聯(lián)機操作的情況下，在檢測過程中或者開始檢測時，電腦出現(xiàn)“沒有檢測到

16、指定的設備……”，是怎么回事？ 一般來說出現(xiàn)這種提示說明您的檢測儀與電腦硬件連接出現(xiàn)問題，檢查的步驟如下： 第一步、確定檢測軟件的設備設置中相關設置與硬件連接相匹配； 第二步、電腦串口通訊故障，檢測方法：重新啟動電腦，確認是否故障依然存在，如果故障依然存在，檢查下一步； 第三步、更換一下電腦串口，并在檢測軟件的設備設置中進行相應的改動，或者換一臺電腦，確認故障是否存在，如果故障解決，則表明是電腦本身的問題

17、，否則可進行下一步檢查； 第四步、更換RS232485轉換器，確認問題是否存在,如果故障解決，則表明為RS232485轉換器連接不通。,常見問題及相關技巧2,2.儀器聯(lián)機操作的情況下，調100時看不到紅線是怎么回事？ 首先我們要學會看圖譜，圖譜的橫坐標為時間，縱坐標為投射比，我們所所的調100準確的所是指將投射比值調整為100％。 圖譜在沒有拖拉的情況下，最高只能顯示到100，如果在調100的過程中，其投射比值大

18、于100，那樣就看不到紅線了，但圖譜右邊的小白框中有數(shù)字顯示，你只要正常的調0/100就可以了。 另外，對于小白框內數(shù)字，顯示的是當前的投射比值。在做對照或調0/100時，小白框內的數(shù)字前有一短紅線，在做樣品時則為短綠線。大家不要把這個短線認為是負號。,常見問題及相關技巧3,3.如何檢測儀器的重現(xiàn)性？ 做一空白對照后，做一個雙倍量的樣品，然后一分為二，先后或同時做檢測，即：取2克樣品，加10ml提取液浸泡，然后取5ml檢液，

19、分別加0.2ml的酶、顯色劑，15分鐘后，如果直接加0.2ml底物，然后一分為二在兩個通道中同時做檢測，則是檢查不同通道的重現(xiàn)性；如果15分鐘后先將溶液一分為二，先后加入0.1ml底物做檢測，則是檢查同一通道的重現(xiàn)性。4.如何添加品種名稱？ 一般來說有兩種添加方法： A.可以在基礎數(shù)據維護中進行添加。 B.在檢測結果彈出是，通過 進行添加。另外，在添加時一定要按“增加”鍵，填好相關信息后按“保存”完成。,常見問題及相

20、關技巧4,5.如何升級檢測軟件？ 對于檢測軟件的升級有兩種方法： A.在線升級：打開檢測軟件并連接因特網，然后在幫助中選擇在線升級。 B.本地升級：執(zhí)行新版檢測軟件的安裝程序，選擇“修復或升級”項，然后按照提示完成安裝即可。6.如何上傳數(shù)據？ 上傳數(shù)據有三個步驟： 1）打開“設備”菜單中的“系統(tǒng)選項”，并將注冊ID號和ID密碼填寫好； 2）打開“統(tǒng)計匯總”菜單中的“農殘檢測數(shù)據查詢統(tǒng)計”，通過查詢項將需要上

21、傳的數(shù)據查詢出來； 3）按“上傳”鍵完成上傳數(shù)據的操作。,常見問題及相關技巧5,7.檢測中需要注意哪些事項？ A.蔬菜不能剪切的太小，一般以2cm見方為好； B.對于顏色深的蔬菜盡量取莖、葉各一半為好； C.對于果品，可以順皮削下一塊或取皮下部分； D.對于有味蔬菜可以使用檢測軟件的對照標樣庫來檢測； E.對于有雜質或沉淀物及較渾濁的檢液可以采用雙倍取樣，過濾后再檢測； F.移液槍的槍頭不能互相污染；