血清中視黃醇結合蛋白免疫透射比濁測定法[j]

1、ｓｕｎｓｈｉｎｅｓｕｎｓｈｉｎｅ血清中視黃醇結合蛋白免疫透射比濁測定法王曉蓉(上海電力醫(yī)院上海200052)摘要：目的摘要：目的對視黃醇結合蛋白免疫透射比濁測定法進行方法學和臨床應用評價。方法方法采用免疫透射比濁測定法，根據NCCLS相關文件，對方法進行精密度、線性、準確性等評價及臨床初步應用。結果結果批內CV1.5%~2.2%，批間CV2.8%~3.7%，日間CV2.6%~3.1%，總CV4.5%~6.7%，線性范圍0至210mgLr

2、=0.9985對照組血清視黃醇結合蛋白含量：49.511.9mgL；糖尿病腎病組：81.012.8mgL；慢性腎小球腎炎組：133.822.8mgL；急性腎小球腎炎組：175.445.2mgL；慢性腎功能衰竭：88.430.7；腎病組與對照組有顯著差異（P〈0.01）。結論結論免疫透射比濁法測定血清視黃醇結合蛋白，方法簡便、快速、靈敏，結果準確，可用自動分析儀測試，適合臨床檢驗科應用。對腎臟疾病的早期診斷有一定臨床意義。關鍵詞關鍵詞視黃

3、醇結合蛋白免疫透射比濁法腎功能TurbidimetricImmunoassayfdeterminationofRetinolConjugatedProteininSerumXiaongWang.(ShanghaiPowerHospital，Shanghai200052，China)Abstract：Objective:Toevaluatethemethodologyclinicalapplicationofturbidimetricim

4、munoassayfdeterminationofretinolconjugatedproteininserum.Method:AccdingtoNCCLSrelativedocumentsevaluatetheprecisionlinearityaccuracyofthisturbidimetricimmunoassaytryaclinicalapplication.Results:withinlotCV1.5%2.2%between

5、lotCV2.8%3.7%betweendayCV2.6%3.1%totalCV4.5%6.7%linearityrange0210mgLr=0.99985.QuantityofretinolconjugatedproteininComparedGroup:49.511.9mgLDiabeticRenopathyGroup:81.012.8mgLChronicGlomerulonephritisGroup:133.822.8mgLAcu

6、teGlomerulonephritisGroup:175.445.2mgL；ChronicRenalFailureGroup:88.430.7mgL.There’sobviousdifferencebetweenthekidneydiseaseGrouptheComparedGroup.(P0.01)Conclusion:Themethodtodetermineretinolconjugatedproteinbyturbietrici

7、mmunoassayissimplequicksensitiveaccurateresulted.Soitcanbeappliedonautomatedanalyzerinclinicaltestinglabaty.Alsoithascertainclinicalsignificancefthepreliminarydiagnosis.Keywds:RetinolConjugatedProteinTurbidimetricImmunoa

8、ssayRenalFunction人視黃醇結合蛋白（Retinol–bindingProteinRBP）分子量約21000，半衰期3~12h，等電點PH4.4~4.8，由肝細胞合成，分布在人的血清、腦脊液、尿液等[1]。在血液中，RBP與視黃醇（VitA）、甲狀腺素轉運蛋白按1：1：1結合，以復合物形式存在，能攜帶90%視黃醇，從肝臟向周圍組織運送，當視黃醇與靶細胞受體結合后，視黃醇即進入細胞內，RBP便于甲狀腺素轉運蛋白分離。游離RB

9、P經腎小球濾出，被近端腎小管上皮細胞重吸收分解，少量由尿液排出[2]，因此肝臟和腎臟疾病均可影響RBP在血清中濃度。目前測定視黃醇結合蛋白的方法有放射免疫測定法、酶聯免疫法等[3]，我們建立的是免疫透射比濁法，經方法學評價具有簡便快速較高靈敏度、重復性和準確性，適用于各類自動生化分析儀并在臨床上初步應用有一定的意義?，F報告如下：材料與方法材料與方法1對象：11對照組：均為我院健康體檢者50例，年齡20~62歲，女23例，男27例。經B超

10、、心電圖和臨床各項檢查排除肝病、腎病、冠心病、高血壓、腫瘤、糖尿病等病史和疾病。___________________________作者簡介：王曉蓉，女，1969年生，畢業(yè)于上海第二醫(yī)科大學，主管技師.ｓｕｎｓｈｉｎｅｓｕｎｓｈｉｎｅ7參考值參考值RBP（S）為49.511.9mgL無年齡、性別差異。臨床應用腎?。簻y定急性腎小球腎炎，慢性腎小球腎炎，糖尿病性腎病和慢性腎功能衰竭血清視黃醇結合蛋白，發(fā)現RBP水平均升高。經過統計處理，結

11、果顯示腎病組RBP均明顯高于正常對照組，P0.01，結果見表3。表3：腎病患者血清RBP水平與對照組的比較(mgL)nRBPt值P對照組5049.511.9糖尿病性腎病2281.012.81.39001慢性腎小球腎炎23133.822.82.51001急性腎小球腎炎17175.445.25.12001慢性腎功能衰竭1088.430.71.98001討論1RBP測定，方法頗多，我們建立RBP免疫透射比濁法，是基于免疫比濁法操作簡單，儀器設

12、備要求不高，沒有環(huán)保和操作人員自身防護等問題。從重復性、線性等方法學評價的實驗結果顯示，與其他測定方法比較本方法簡便快速、靈敏可靠，適用于自動生化分析儀，有較大的實用價值。2人類在生理狀態(tài)下，腎小球基底膜有孔徑屏障和電荷屏障。腎臟對保持血清視黃醇結合蛋白水平起重要作用，低分子量的蛋白質，包含游離RBP，能被腎小球濾過，而RBPPA結合能保護RBP不被濾過[4]。因此，正常人RBP完成轉運視黃醇至靶細胞后即能被腎小球濾過，，但絕大部分在近

13、曲小管重吸收和分解，尿中排泄量甚微，使血清中RBP水平穩(wěn)定[5]。3.在糖尿病性腎病、慢性腎小球腎炎等各種腎臟疾病早期均有使腎小球濾過率降低和腎血流量降低[6]。血液中的RBP濃度升高隨著病情進展，慢性腎小球腎炎，糖尿病性腎病同時有腎小管損傷，出現尿蛋白。尿RBP流失可以影響血清RBP水平，因此腎臟疾病有不同的血清RBP水平。這正解釋了急性腎小球血清RBP高水平出現。4正常人尿中RBP含量很少，約為0.1ugmin以下，其排量增加被認為

14、是一種敏感的近端腎小管損傷的診斷指標。RBP與尿白蛋白、NAG、B2MG等有顯著的正相關。且尿RBP作為腎小管損傷的指標較NAG敏感。在疾病狀態(tài)下，尿RBP濃度是NAG的10倍。在堿性環(huán)境中較B2MG穩(wěn)定，在37℃溫度下亦不分解，而B2MG在PH5.5以下時迅速分解，室溫放置2小時后，有80%會被分解掉[7]。因此，尿RBP的測定比NAG和B2MG更有價值。結論免疫透射比濁法測定血清中的RBP是一種較靈敏和特異的方法，試劑國產化，操作方