高中物理實驗室檢驗課件人教版必修2

1、實驗室檢驗,血液的一般檢驗,,血液的一般檢驗,紅細(xì)胞壓積容量（ＰＣＶ）測定血紅蛋白測定（Hb）紅細(xì)胞（RBC）計數(shù)白細(xì)胞（WBC）計數(shù)白細(xì)胞分類計數(shù),紅細(xì)胞壓積容量（ＰＣＶ）測定,是指將抗凝血液置于特制的溫氏管中，并經(jīng)離心沉淀，沉出壓緊的紅細(xì)胞體積所占全血體積的百分比。主要用于脫水程度及貧血的判定。,測定方法：紅細(xì)胞壓積管法（溫氏法）用尾端裝有橡皮乳頭的長針頭，吸?。牛模裕罭a2抗凝血液，插入溫氏管底部，自下而上注入血液至刻

2、度“10“處。將溫氏管置于電動離心機(jī)中，以3000r/min速度離心30~60min，取出讀取紅細(xì)胞柱的高度數(shù)，即得紅細(xì)胞壓積值。正常值：家畜紅細(xì)胞壓積容量正常值（％）參見下表。 標(biāo)準(zhǔn)制的換算：PCV(L/L)=PCV(%) ╳0.01。 例如馬PCV30.2%，換算為標(biāo)準(zhǔn)制乘以0.01，即得0.302L/L。,家畜紅細(xì)胞壓積容量正常參考值（％）,,,診斷意義：可呈現(xiàn)增高或降低

3、。紅細(xì)胞壓積容量值增高 多因機(jī)體脫水而血液濃縮，使紅細(xì)胞數(shù)相對增多所致?？梢娪诟鞣N脫水性疾病過程中。是判定動物脫水程度的標(biāo)準(zhǔn)之一，并可依此而計算補(bǔ)液數(shù)量，但要結(jié)合臨床癥狀及其他檢測方法綜合判斷之。如病畜精神稍差，口粘膜輕度干澀，皮膚彈性實驗持續(xù)時間2~4S，血漿蛋白8％~9%，PCV達(dá)50％，可提示為輕度脫水。病畜精神差，喜臥少動，口粘膜干澀，皮膚彈性實驗持續(xù)時間6~10S，血漿蛋白9％~10%，PCV達(dá)55％，可提示為中度

4、脫水。病畜精神極差，不能站立，口粘膜極干澀，皮膚彈性實驗持續(xù)時間20~45S，血漿蛋白12g％，PCV達(dá)60％，可提示為重度脫水。,紅細(xì)胞壓積容量值降低 多為紅細(xì)胞減少所致?？梢娪诟餍拓氀鞍橛胸氀钠渌膊∵^程中。注意事項溫氏管壁一側(cè)自上而下標(biāo)有0－10 刻度，供測定血沉之用；另一側(cè)自下而上標(biāo)有0－10刻度，供測定PCV用，0－10之間共有100個刻度，測定時正確選用。抗凝劑宜選用EDTANa2，因其不改變細(xì)胞體積及形

5、態(tài)。血樣不能溶血，充入管內(nèi)的血液不能有氣泡。讀取結(jié)果時，不能把細(xì)胞層最上層的灰白層（白細(xì)胞和血小板）計入。,返回,血紅蛋白測定（Hb）,主要用于貧血的診斷測定方法：沙利氏法原理：紅細(xì)胞與鹽酸作用生成褐色鹽酸高鐵血紅蛋白，再經(jīng)稀釋與標(biāo)準(zhǔn)色柱比色，即可求得血紅蛋白含量。試劑：0.1mol/L鹽酸溶液：濃鹽酸8.5ml加蒸餾水至1000ml。操作：于測定管內(nèi)加入0.1mol/L鹽酸溶液至百分刻度“20“或重量刻度“2“處。,用沙

6、利氏吸血管吸取被檢血液至“20“刻度處，并用棉球或紗布拭去管壁外血液。迅速將沙利氏吸血管插入測定管底部鹽酸液中，緩慢擠出血液，再吸取上部清液，反復(fù)沖洗沙利氏吸血管2~3次，并混勻，靜置10min。沿著管壁加入蒸餾水或0.1mol/L鹽酸溶液，逐步稀釋至與標(biāo)準(zhǔn)色柱色調(diào)一致后，讀取重量（或百分）刻度值報告結(jié)果。正常值：標(biāo)準(zhǔn)制換算：血紅蛋白(g/L)=血紅蛋白（g/dl） ╳10診斷意義血紅蛋白含量增高 常見于機(jī)體脫水而致血液濃

7、縮的各種疾病過程中。血紅蛋白含量降低 可見于各種貧血性疾病，如各型貧血、馬傳染性貧血、重癥寄生蟲病等。,家畜血紅蛋白正常參考值（沙利氏法）,返回,紅細(xì)胞（RBC）計數(shù),是將一定量的供檢血液經(jīng)一定倍數(shù)稀釋后，計數(shù)一定容積內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)，并換算為每 1 L 血液中的紅細(xì)胞數(shù)。主要用于貧血性疾病的判定。,計數(shù)法：用顯微鏡計數(shù)法紅細(xì)胞稀釋液0.9%氯化鈉溶液赫姆氏液配法為氯化鈉1g，氯化汞0.5g，結(jié)晶硫酸鈉5g，加蒸餾水溶解

8、至總量200ml，再加石炭酸品紅溶液數(shù)滴，借以與白細(xì)胞稀釋液區(qū)別。計數(shù)方法血液稀釋：取清潔、干燥小試管一支，加紅細(xì)胞稀釋液4ml，而后用沙利氏吸血管吸取供檢血液至10刻度(10μ l)處，用棉球或紗布拭去管壁外血液，將沙利氏吸血管插入小試管內(nèi)稀釋液中，擠出血液，并吸洗2~3次，混勻。血液被稀釋400倍（因家畜紅細(xì)胞比人多，200倍稀釋不易計數(shù)）。,充液： 取清潔、干燥的計數(shù)板和專用于計數(shù)板的蓋玻片。將蓋玻片緊密覆蓋于血細(xì)胞計數(shù)

9、板上；將計數(shù)板于顯微鏡載物臺上，用低倍鏡先找到計數(shù)室；然后用小吸管吸取已經(jīng)搖勻稀釋血液，使吸管尖端血接觸蓋玻片邊緣和計數(shù)室交界處，稀釋血液即可自然流入并充滿計數(shù)室。計數(shù) ： 計數(shù)室充液后，應(yīng)靜置1~2min，待紅細(xì)胞分布均勻并下沉后開始計數(shù)。計數(shù)紅細(xì)胞應(yīng)使用高倍鏡。一般計數(shù)紅細(xì)胞計數(shù)室四角及中央一個中方格或呈對角線中方格（共5個中方格）內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)（即80 個小方格內(nèi)的細(xì)胞數(shù)）。為避免重復(fù)和遺漏，計數(shù)每個中方格內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)時，均應(yīng)從

10、左至右，再從右至左，計數(shù)完16個小方格內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)。,在計數(shù)每個小方格內(nèi)紅細(xì)胞時，只計壓在上邊和左邊線上的紅細(xì)胞，不計壓在下邊和右邊線上的紅細(xì)胞。即所謂“數(shù)左不數(shù)右，數(shù)上不數(shù)下“的計數(shù)法則。紅細(xì)胞呈圓形中央透亮，勿與異物混淆。計算 按下式計算 紅細(xì)胞計數(shù)（萬/mm3=R ╳5 ╳10 ╳400 =R ╳20 000 R--

11、---計數(shù)得5個中方格（ 80個小方格）內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)。 5------因為所計數(shù)5個中方格的面積為1／5mm2，要換算 為 1 mm2時，應(yīng)乘以5。 10-----因為計數(shù)室深度為0.1mm，要換算為1mm時，應(yīng)乘 以 10。 400----為血液被稀釋倍數(shù)。,標(biāo)準(zhǔn)制的換算：紅細(xì)胞（1012／L）＝紅細(xì)胞

12、（萬／mm3） ╳0.01 ╳ 1012／L。例如正常值為652萬／ mm3 ，則每升血液中紅細(xì)胞數(shù)＝652 ╳ 0.01 ╳ 1012／L＝6.52 ╳ 1012／L 。正常值 健康家畜紅細(xì)胞正常值 （萬／mm3） 約為：馬、牛600~700，綿羊900，山羊1300，豬600，雞350，犬6700。詳見下頁表。診斷意義紅細(xì)胞數(shù)增多 可分為相對性和絕對性增多。相對性增多，常見于脫水而致血液濃縮的疾病過程中；絕對性增多

13、，可見于因患慢性心、肺疾病導(dǎo)致機(jī)體長期缺氧，或長期生活在高原低氧地區(qū)等情況下。紅細(xì)胞數(shù)減少 常見于各種貧血性疾病過程中，為貧血的特征。,家畜紅細(xì)胞正常值（單位：萬／mm3）,返回,,返回,白細(xì)胞（WBC）計數(shù),是用冰醋酸將血液中的紅細(xì)胞破壞后，計數(shù)一定容積的白細(xì)胞數(shù)，再推算出每升血液中的白細(xì)胞數(shù)（109／L；舊單位：個／mm3）,計數(shù)法：用顯微鏡計數(shù)法白細(xì)胞稀釋液 1％－3％冰醋酸溶液或1％鹽酸溶液，均可作稀釋液。

14、其中加1％結(jié)晶紫數(shù)滴，使溶液呈淡紫色，以便與紅細(xì)胞稀釋液相區(qū)別。計數(shù)方法血液稀釋： 試管稀釋法：取清潔、干燥小試管一支，加白細(xì)胞稀釋液0.38ml，用沙利氏吸血管吸取供檢血液至20刻度(20μ l)處，加入試管內(nèi)，混勻，即可得20倍稀釋的血液。,白細(xì)胞稀釋管稀釋法：用白細(xì)胞稀釋管吸取供檢血液至“0.5“刻度處，拭去管壁外血液，再吸取白細(xì)胞稀釋液至“11“刻度處，用拇、食二指捏住吸管兩端，振蕩混勻即得20倍稀釋血液。充液

15、 與紅細(xì)胞計數(shù)法相同。計數(shù) 基本與紅細(xì)胞計數(shù)法相同，所不同的是將計數(shù)室四角上的4個大方格內(nèi)的白細(xì)胞依次全部計數(shù)完。白細(xì)胞呈圓形有核，周圍透亮，勿與異物相混淆。計算 可按下式計算。 白細(xì)胞計數(shù)（萬/mm3=W ╳（1／4） ╳10 ╳20 =W ╳50,W-------為4個大方格（白細(xì)胞計數(shù)室）內(nèi)白細(xì)胞總數(shù)

16、1／4 ------因4個大方格的面積為4mm2，要換算為 1mm2，應(yīng)乘以1／4。10 ------計數(shù)室的深度為0.1mm，換算為1mm，應(yīng)乘 以10。20 ------為血液的稀釋倍數(shù)。標(biāo)準(zhǔn)制的換算：白細(xì)胞（109／L）＝白細(xì)胞（個／mm3） ╳0.001 ╳ 109／L。例如正常值為7000個／ mm3 ，則每升血液中白細(xì)胞數(shù)＝7000 ╳ 0.001 ╳

17、 109／L＝7 ╳ 109／L 。診斷意義白細(xì)胞總數(shù)增多 可見于多種細(xì)菌感染性疾患、各種重劇炎癥及敗血性疾病、白血病等。白細(xì)胞總數(shù)減少 可見于某些病毒性疾病（如豬瘟、流行性感冒、馬傳染性貧血等）、牛梨形蟲病、牛泰勒蟲病、馬梨形蟲病、長期使用磺胺類藥及氯霉素、X線照射、惡病質(zhì)及各種疾病的瀕死期等。,家畜白細(xì)胞正常值（單位：千／mm3）,返回,白細(xì)胞分類計數(shù),是指將血液制成薄片，染色后油鏡觀察，求出各種白細(xì)胞所占百分比

18、。步驟方法 一般分血片制作、染色、鏡檢分類計數(shù)三步進(jìn)行。血片的制作：選取一邊緣光滑平整的載玻片作推片，用左手的拇指和中指夾持一潔凈載玻片，取被檢血液一滴，置于其右端，右手持推片置于血滴前方，并輕輕向后移動推片，使與血滴接觸，待血液擴(kuò)散開后，再以300~400角度向前均速同力推進(jìn)涂抹，即形成一血膜，迅速自然風(fēng)干。所涂,,血片，血液分布均勻，厚度適當(dāng)，對光觀察呈霓 虹色，血膜位于玻片中央，兩端留有適當(dāng)空隙，以便注明畜別、編號及日

19、期，即可染色，反之，重行制作，直至合格后，再行染色。血片染色瑞特氏染色法 瑞特氏染色液的配制： 瑞氏染粉 0.1g 甲醇 60ml 將染粉置于研體中，加少量甲醇研磨，使其溶解，然后將已溶解的染液倒入潔凈的棕色瓶，剩下未溶解的染料再加少量甲醇研磨，如此連續(xù)操作，直至染料全部溶解和甲醇用完為止。在室溫中保存1周（每日振搖一次）后，過濾，即可應(yīng)用。,

20、染色：先用玻璃鉛筆在血膜兩端各劃一線，以防染液外溢，將血片平放于水平支架上；滴加瑞特氏染液于血片上，直至將血膜蓋滿為止；待染色1~2min后，再加等量磷酸鹽緩沖液（pH6.4）并輕輕搖動或用口吹氣，使染色液與緩沖液混合均勻，再染色3~5min；最后用蒸餾水沖洗血片，待自然干燥或用吸水紙吸干后鏡檢。所得血片呈櫻紅色者為佳。鏡檢計數(shù) 先用低倍鏡做大體觀察，如染色合格再換用油鏡計數(shù)。通常在血片的兩端或兩端的上下部按二區(qū)或四區(qū)計數(shù)法

21、，有順序地移動血片，計數(shù)白細(xì)胞100~200個，分別記錄各種白細(xì)胞數(shù)，最后算出各種白細(xì)胞所占百分比。,白細(xì)胞分類計數(shù)時，必須要先正確識別各型白細(xì)胞。染色良好的血片上，可見嗜酸性白細(xì)胞的胞漿中有很多較大的紅色顆粒。 嗜堿性白細(xì)胞的胞漿中含有明顯的紫色顆粒。 嗜中性白細(xì)胞的胞漿中含有細(xì)小的淡玫瑰色顆粒。主要依其發(fā)育各階段的細(xì)胞核形態(tài)特征又分為中幼細(xì)胞、晚幼細(xì)胞、桿狀核細(xì)胞和分葉

22、核細(xì)胞。中幼細(xì)胞的核為圓形或隨圓形；晚幼細(xì)胞的核為凹陷的腎形；桿狀核細(xì)胞的核粗細(xì)基本均勻而呈馬蹄形或“S“形；分葉核細(xì)胞的核分為2~6個葉不等，各葉之間有細(xì)絲連接，或截然分為幾葉。 淋巴細(xì)胞的細(xì)胞核多為圓形或橢圓形，細(xì)胞漿均染為天藍(lán)色。 單核細(xì)胞體積大，核成腎形馬蹄鐵形、分葉或不正形，細(xì)胞漿呈煙灰色或淡藍(lán)色。,正常值：見課本。診斷意義 各種白細(xì)胞所占百分比值的病

23、理改變都可表現(xiàn)為增多或減少。嗜中性白細(xì)胞增多與減少嗜中性白細(xì)胞增多 嗜中性白細(xì)胞病理性增多是機(jī)體抵抗外來感染和對體內(nèi)炎癥性刺激的一種防御性反應(yīng)，常見于各種急性感染性疾患、急性炎癥及重癥燒傷、創(chuàng)傷時。 分析嗜中性白細(xì)胞的增減變化時，應(yīng)特別注意核象的變化，桿狀核和晚幼細(xì)胞增多，并出現(xiàn)中幼細(xì)胞甚至早幼細(xì)胞及原始粗細(xì)胞，稱為“核左移“，通常表示骨髓造血機(jī)能增強(qiáng)。如分葉核細(xì)胞顯著增多，并且細(xì)胞核分4~5葉

24、甚至多葉的比例較多者，則稱為“核右移“，表示造血機(jī)能減退。判定嗜中性白細(xì)胞核型移動的情況，也可以核指數(shù)為依據(jù)。,中幼細(xì)胞＋晚幼細(xì)胞＋桿狀核細(xì)胞 核指數(shù)＝ 分葉核細(xì)胞 家畜核指數(shù)的正常參考值：馬為1／10，牛羊為近似1／10，豬為1／5。如核指數(shù)大于0.1（馬、牛、羊

25、），稱核左移，表示未成熟嗜中性白細(xì)胞比例增多；如小于0.1則稱核右移，為分葉型白細(xì)胞增多所致。 結(jié)合白細(xì)胞總數(shù)的變化，分析嗜中性白細(xì)胞核象的變化，更有意義。核左移，同時白細(xì)胞總數(shù)也增多，稱為再生性核左移，為骨髓造血機(jī)能增強(qiáng)，機(jī)體處于緊急動員，積極防御階段的表現(xiàn)；核左移，但白細(xì)胞總數(shù)仍維持在正常范圍內(nèi)，甚至減少者，則稱為退行性核左移，為感染嚴(yán)重，骨髓造血機(jī)能衰竭，釋放功能不良，機(jī)體抗病能力降低的表示；核右移

26、則為骨髓造血功機(jī)能減退、機(jī)體抗病能力降低的表示。,,嗜中性白細(xì)胞減少 多由于骨髓造血機(jī)能受到抑制，對嗜中性白細(xì)胞的生成不足，或因最急性感染，致使嗜中性白細(xì)胞向組織中的游走速度超過由骨髓向血液中的釋放速度等因素所致。常見于病毒性疾病及各種疾病的重危期（如中毒性休克、胃腸破裂等）。另外驢懷騾妊娠毒血癥及急性出血性盲結(jié)腸炎時，均可見嗜中性白細(xì)胞顯著減少。嗜酸性白細(xì)胞增多與減少 嗜酸性白細(xì)胞的功能，可能與機(jī)體的過敏反應(yīng)有關(guān)，具有抗

27、組織胺及吞噬抗原－抗體復(fù)合物的作用。嗜酸性白細(xì)胞增多 常見于某些寄生蟲?。ㄈ绺纹x病、球蟲病、旋毛蟲病等），某些過敏性疾?。ㄊn麻疹等）以及濕疹、疥癬等皮膚病過程中。,嗜酸性白細(xì)胞減少 常見于某些疾病的重癥期，也見于應(yīng)用皮脂類固醇藥物時。淋巴細(xì)胞增多與減少淋巴細(xì)胞增多 常見于某些慢傳染病（如結(jié)核病、布氏桿菌病等）、急性傳染病的恢復(fù)期、某些病毒性疾?。ㄈ缲i瘟、流行性感冒等）及血孢子蟲病等。淋巴細(xì)胞減少