德國鳶尾組培快繁過程中內(nèi)生菌的分離、鑒定及控制藥劑篩選

1、新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)???????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????德國鳶尾組培快繁過程中內(nèi)生菌的分離?鑒定及控制藥劑篩選韓宏偉?廖晴?瑪爾哈巴?吾斯?jié)M?王浩?莊紅梅?王強(qiáng)?沙紅?新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)院園藝作物研究所?烏魯木齊????????摘?要??目的?在德國鳶尾的組培過程中?內(nèi)生菌引起的污染制約著其進(jìn)行快速繁殖工廠化育苗?

2、針對引起德國鳶尾組培苗污染的內(nèi)生菌進(jìn)行分離?鑒定?研究比較?種常用藥劑對該菌株的抑制效果?篩選出最佳防治藥劑?為德國鳶尾組培快繁過程中有效控制內(nèi)生菌污染提供科學(xué)依據(jù)??方法?采用??培養(yǎng)基分離純化菌株?????????通過形態(tài)特征觀察?生理生化試驗(yàn)及???????序列同源性分析?對其進(jìn)行分類鑒定?采用紙碟抑菌圈法測定?種常用藥劑對供試菌株的抑制效果??結(jié)果?供試菌株??????的形態(tài)特征?及生理生化指標(biāo)與表皮葡萄球菌??????????

3、?????????????????基本相同????????序列分析表明?該菌株與解糖葡萄球菌??????????????????????????進(jìn)化關(guān)系最為密切?聚在同一個(gè)系統(tǒng)發(fā)育分支?與表皮葡萄球菌的同源性最高?為???????室內(nèi)藥劑篩選結(jié)果表明?頭孢菌素和慶大霉素對供試菌株的抑制作用最強(qiáng)??結(jié)論?綜合形態(tài)學(xué)特征?生理生化特性及???????序列分析結(jié)果?供試菌株??????被鑒定為表皮葡萄球菌?頭孢菌素和慶大霉素可作為抑制德國鳶尾

4、組培苗內(nèi)生菌污染的首選藥劑?關(guān)鍵詞?德國鳶尾?內(nèi)生菌?組織培養(yǎng)?鑒定?控制藥劑中圖分類號??????????文獻(xiàn)標(biāo)識碼?????文章編號??????????????????????????收稿日期?????????????????????基金項(xiàng)目?新疆維吾爾自治區(qū)科技支疆項(xiàng)目?鳶尾新品種引進(jìn)?繁殖技術(shù)開發(fā)及園林應(yīng)用示范????????????作者簡介?韓宏偉????????男?河南人?助理研究員?研究方向?yàn)槭卟嘶ɑ茉耘?????????

5、??????????????????通訊作者?廖晴????????女?四川安岳人?副研究員?研究方向?yàn)閳@藝觀賞學(xué)??????????????????????????????引言?研究意義?德國鳶尾是一種多年生宿根花卉?其花色艷麗而豐富?花姿奇特?且適應(yīng)性強(qiáng)?是園林綠化?美化?花壇?草坪裝飾的優(yōu)良材料?我國德國鳶尾種苗多從國外引進(jìn)?數(shù)量少?有很多品種不能形成種子?分株繁殖率較低?通過組織培養(yǎng)快速繁殖是盡快滿足應(yīng)用需求的最為有效的途徑???

6、?在德國鳶尾組培快繁過程中發(fā)現(xiàn)?經(jīng)過多代培養(yǎng)后?苗叢基部慢慢會(huì)出現(xiàn)細(xì)菌感染?呈現(xiàn)鼻涕狀菌落?并向外蔓延?甚至有些會(huì)擴(kuò)展到組培苗嫩葉上?后期逐漸褐化枯萎死亡?嚴(yán)重影響德國鳶尾組培苗的快繁生產(chǎn)?研究通過分離?鑒定引起德國鳶尾組培苗污染的內(nèi)生菌?篩選出控制該病原菌的最有效藥劑?為有效控制德國鳶尾組培快繁過程中內(nèi)生菌的污染提供技術(shù)保障??前人研究進(jìn)展?植物內(nèi)生菌???????????是指存活于健康植物組織內(nèi)部?而又不引發(fā)宿主植物表現(xiàn)出明顯感染癥

7、狀的微生物類群?主要包括真菌?細(xì)菌和放線菌????關(guān)于植物組織培養(yǎng)過程中內(nèi)生菌的污染已有很多報(bào)道?如金線蓮??????????????????????????組培中內(nèi)生菌污染率達(dá)到???????仙客來??????????????????的塊莖組織內(nèi)生細(xì)菌污染率達(dá)?????????地黃????????????????????由于有內(nèi)生細(xì)菌的存在污染率達(dá)????等????從已有的報(bào)道看?被鑒定的內(nèi)生菌種類主要有?黃單胞菌屬?????????

8、????????芽孢桿菌屬???????????葡萄球菌屬????????????????????假單胞屬??????????????????土壤桿菌屬???????????????????葡腸桿菌屬???????????????棒桿狀菌屬???????????????萬方數(shù)據(jù)新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)??卷???供試菌株污染的德國鳶尾組培苗???供試菌株在??培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)????????????????????????????????????

9、????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????圖??供試菌株的形態(tài)學(xué)特征??????????????????????????????????????????生理生化特征測定結(jié)果表明?與?伯杰氏細(xì)菌鑒定手冊?????及?常見細(xì)菌鑒定手冊?中描述的表皮葡萄球菌???????????????????????????基本相同?可被鑒

10、定為表皮葡萄球菌?表?表??菌株??????部分生理生化指標(biāo)測定????????????????????????????????????????????????????????????????????????測定項(xiàng)目????????????????????結(jié)果???????測定項(xiàng)目????????????????????結(jié)果?????????葡萄糖產(chǎn)酸???????????????????蔗糖產(chǎn)酸??????????????耐受性???

11、???????????????????阿拉伯糖產(chǎn)酸??????????????淀粉水解???????????????????值??????????營養(yǎng)肉湯????????????????????營養(yǎng)肉湯?????????????????利用乳糖????????山梨醇產(chǎn)酸?????????還原硝酸鹽?????????????????木糖產(chǎn)酸???????甘露醇厭氧產(chǎn)酸??????????????????棉子糖產(chǎn)酸??????????利用蛋

12、白胨?????????蛋白?????????利用牛肉浸膏????????????甘油???????????核糖醇??????????注???陽性反應(yīng)???陰性反應(yīng)?????????????????????????????????????????????????????序列分析以供試菌株??????的基因組???為模板?用???????通用引物??????????????擴(kuò)增?得到了大小?????左右的片段?圖????回收純化后?圖???