pm2.5對角膜上皮細胞的dna損傷和細胞移行能力影響及其機制研究

1、暨南大學(xué)碩士學(xué)位論文 題名（中英對照） ： PM2.5 對角膜上皮細胞的 DNA 損傷和細胞移行能力影響及其機制研究 Assessment of DNA damage, cell senescence and migration in corneal epithelial cells exposed to airborne particulate matter(PM2.5) 作者姓名：高梓勛 指導(dǎo)教師姓名 潘紅衛(wèi) 及學(xué)位、職

2、稱： 博士 副教授 學(xué)科、專業(yè)名稱：細胞生物學(xué) 再生醫(yī)學(xué) 學(xué)位類型：學(xué)術(shù)學(xué)位 術(shù)學(xué)位 論文提交日期： 論文答辯日期：2016 年 5 月 30 日 答辯委員會主席： 論文評閱人： 學(xué)位授予單位和日期： I PM2.5 對角膜上皮細胞的 角膜上皮細胞的 DNA 損傷 損傷和細胞移行能力 細胞移行能力影響 影響及其機制 機制研究 研究 中文 中文摘要 摘要 PM2.5 指大氣環(huán)境中空氣動力學(xué)當(dāng)量直徑小于等于 2.5 微米的顆粒物，主要來源于

3、自然界物質(zhì)變化（如灰塵、物質(zhì)氧化、火山噴發(fā)等）和人類活動（如煤炭、木材、汽油、柴油和其它化石能源的燃燒）這兩大途徑[1]。PM2.5 由于粒徑小，能較長時間懸浮于空氣中，且活性強（容易粘附如重金屬、微生物等有毒、有害物質(zhì)） ，因而對人體健康影響很大。最近幾十年，隨著人類工業(yè)發(fā)展，因工廠燃煤鍋爐廢氣、 機動車尾氣等途徑排放到大氣環(huán)境中的顆粒污染物增多， 罹患各種角膜疾病的人數(shù)呈增長趨勢， 其病情也隨之加劇。 本研究通過收集大氣中的PM2.

4、5 顆粒，以人角膜上皮細胞株（HCEC）為主要實驗?zāi)Ｐ?，再以原代牛角膜上皮細胞（BCEC）為補充實驗?zāi)Ｐ停接?PM2.5 短期暴露對角膜上皮細胞的DNA 氧化損傷影響、細胞移行能力影響及其中的機制，為角膜病的預(yù)防、治療和術(shù)后恢復(fù)提供實驗依據(jù)。 第一部分 第一部分 PM2.5 對角膜上皮細胞的 角膜上皮細胞的 DNA 氧化 氧化損傷 損傷及其機制探究 及其機制探究 目的 目的：評估空氣中的微小顆粒 PM2.5 對角膜上皮細胞的遺傳毒性

5、和探究在此過程中細胞形成 ROS 的作用。 方法 方法：在廣州挑選霧霾嚴重時期采集大氣中的微小顆粒，再以人角膜上皮細胞（HCEC）置于含有此微粒的培養(yǎng)基中培養(yǎng) 24 小時后，通過 CCK-8 測試和 LDH釋放檢驗來測定細胞活力與毒性強度；通過堿性彗星實驗和磷酸化組蛋白變體H2AX（γH2AX）免疫熒光染色實驗來檢測 HCEC 的 DNA 片段斷裂以及 DNA修復(fù)情況；通過特異性免疫探針 CM-H2DCFDA 來探究 ROS 的產(chǎn)生；細