重組人腸三葉因子對(duì)腸上皮細(xì)胞增殖移行能力的影響及其機(jī)制研究.pdf

1、目的：觀察重組人腸三葉因子（recombinant human intestinal trefoil factor, rhITF)對(duì)腸上皮細(xì)胞株（intestinal epithelial cells，IEC-6）增殖、移行及變形能力的影響，并探討其可能的機(jī)制。
　　方法：將IEC-6隨機(jī)分為陰性對(duì)照組、正常對(duì)照組、燒傷對(duì)照組、以及不同濃度的rhITF處理組和rhITF與黏蛋白（Mucin）聯(lián)合用藥組。采用生長曲線法、劃痕機(jī)械損傷

2、法和Transwell法分別檢測IEC-6增殖、移行和變形能力的變化。將攜帶ITF基因的腺病毒感染Caco-2細(xì)胞，構(gòu)建ITF高表達(dá)細(xì)胞株，采用RT-PCR和Western blot分別檢測細(xì)胞黏附分子β-catenin基因表達(dá)水平和蛋白表達(dá)水平的變化。
　　結(jié)果：（1）rhITF無論是對(duì)正常IEC-6還是燒傷血清致傷的IEC-6均無促增殖作用；（2）rhITF對(duì)正常IEC-6和燒傷血清損傷的IEC-6均具有明顯的促進(jìn)移行作用，并

3、具有時(shí)間和劑量依賴性；聯(lián)合 Mucin應(yīng)用其促移行作用增強(qiáng)。（3） rhITF能顯著增強(qiáng)正常IEC-6和燒傷血清損傷的IEC-6的變形能力，并具有時(shí)間和劑量依賴性。Mucin的作用不明顯，但能明顯增強(qiáng)rhITF的生物學(xué)效應(yīng)，表現(xiàn)為最小有效劑量降低和有效時(shí)間延長。（4）rhITF作用Caco-2細(xì)胞24h后能明顯抑制黏附分子β-catenin基因表達(dá)和蛋白合成。（5）高表達(dá)ITF的Caco-2細(xì)胞其β-catenin基因和蛋白水平均明顯下