t.glabrata發(fā)酵法生產(chǎn)α酮戊二酸——調(diào)節(jié)碳流從丙酮酸到α酮戊二酸

1、分類號(hào)浮籀走。蔞碩士學(xué)位論文題 目： z g 腸6 m m 發(fā)酵法生產(chǎn)0 L 一酮戊二酸——調(diào)節(jié)碳流從丙酮酸到0 【一酮戊二酸英文并列題目： Ⅱ．K e t o g l u t a r a t ef e m e n t a t i o nb yz 譬缸6 朋m ——密級(jí)r e d i r e c t i n gc a r b o nn u x f r o mp y r u V a t e t oo 巳。k e t o g l u t a

2、 r a t e研 究 生： 黃萱塑 專業(yè)：蕉醛王程研究方向： 筮醛王堂導(dǎo)指導(dǎo)小組成員： 李寅副教授 堵國(guó)成教授學(xué)位授予日期答辯委員會(huì)主席：李華鐘教授江南大學(xué)地址：無(wú)錫市二0 0 六年三月江南大學(xué)頌j j 學(xué)位論文 而川，叩Ⅲg 抽6 ，d f d 發(fā)酵法生產(chǎn)Ⅱ- 酮戊二胺5 在發(fā)酵液中添加丙酮酸后a ．K G 濃度不斷增加，培養(yǎng)體系中添加的丙酮酸濃度越高，c c ．K G 的積累量越高，添加3 0g ／L 丙酮酸時(shí)轉(zhuǎn)化率最高。在7L

3、發(fā)酵罐中進(jìn)一步研究在葡萄糖匱乏條件下添加3 0 g ／L 丙酮酸轉(zhuǎn)化Ⅱ一K G 的情況的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，隨著發(fā)酵的進(jìn)行，發(fā)酵液中Ⅱ．K G 的濃度在4 8 h 時(shí)達(dá)到2 6 ．1g ／L ，添加的丙酮酸轉(zhuǎn)化為c c ．K G 的轉(zhuǎn)化率達(dá)到為5 3 ．7 ％。F 譬脅6 M m 能利用丙酮酸為惟一碳源生長(zhǎng)并大量積累u —K G 。發(fā)酵進(jìn)行到6 0h 時(shí)，丙酮酸深度下降到1 4 ．O2 ，L ，此時(shí)d —K G 對(duì)丙酮酸的轉(zhuǎn)化率為6 6 ．9

4、 ％：6 利用，咖6 m 脅全細(xì)胞轉(zhuǎn)化丙酮酸生產(chǎn)Ⅸ．K G 的實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明丙酮酸能夠利用丁譬脅6 ，臼脅中的酶系轉(zhuǎn)化為Ⅱ．K G 。根據(jù)單因素的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，確定含有3 0 g ／L丙酮酸轉(zhuǎn)化培養(yǎng)基中N I - 1 4 c l 和硫胺素的濃度分別為1g ／L 和O ．0 4m g ／L ，采用8 0 g ／L 碳酸鈣調(diào)節(jié)p H ，細(xì)胞濃度為1 ．6g ／L 時(shí)將其接入丙酮酸轉(zhuǎn)化培養(yǎng)基中，考察r 衛(wèi)缸6 Ⅲ，r 』轉(zhuǎn)化丙酮酸為C c —K G

5、 的能力。采用優(yōu)化后比優(yōu)化前的丙酮酸轉(zhuǎn)化培養(yǎng)基時(shí)轉(zhuǎn)化得到的“．K G 的產(chǎn)量以及轉(zhuǎn)化率分別提高了2 8 ％和3 5 ％；7 將發(fā)酵液離心出的菌體循環(huán)利用考察丁g ，f ，6 w 陽(yáng)在循環(huán)過(guò)程中轉(zhuǎn)化丙酮酸為0 1 ．K G 能力的變化情況時(shí)發(fā)現(xiàn)隨著循環(huán)次數(shù)的增加，轉(zhuǎn)化體系中旺．K G 濃度逐漸下降。第三次循環(huán)時(shí)，轉(zhuǎn)化體系中c c —K G 濃度為5 ．4g ／L ，與第一次轉(zhuǎn)化過(guò)程中“．K G 濃度和轉(zhuǎn)化率相比，分別下降了5 68 ％和3