發(fā)酵法生產(chǎn)十三碳二元酸的試驗研究.pdf

1、該文以熱帶假絲酵母為生產(chǎn)菌種,通過對代謝途徑的分析,對十三碳二元酸的發(fā)酵過程和生產(chǎn)用菌的菌種改造進行了研究.工作包括菌株的馴化,紫外線照射誘變和篩選,搖瓶發(fā)酵工藝條件和藥劑條件對DCA<,13>產(chǎn)量的影響,以及DCA<,13>的提取精制等.首先通過對熱帶假絲酵母的代謝途徑的分析,對其代謝過程和調(diào)控有了一個較為清晰的描述.以熱帶假絲酵母(Candida tropicalis)為初發(fā)株,對初發(fā)菌株進行循減遞進的方法進行馴化,利用紫外線照射對

2、其進行誘變處理,照射后,運用對照平皿和指示劑平皿篩選α、ω-氧化能力增強以及β-氧化能力減弱的突變菌株,搖瓶發(fā)酵試驗,DCA<,13>產(chǎn)量比誘變前產(chǎn)量提高了10％左右,證明紫外線照射對菌株具有改良作用.在DCA<,13>的搖瓶發(fā)酵工藝條件試驗中,得出通風量、尿素濃度、烷烴濃度、培養(yǎng)溫度對DCA<,13>的產(chǎn)量影響顯著,搖瓶發(fā)酵確定最佳工藝條件為:接種量為15％;搖床轉速為120r/min;尿素為最好氮源,添加量為0.14％;發(fā)酵溫度為3

3、0℃;種子種齡為42~45h;底物烷烴濃度為15％.通過考察熱帶假絲酵母在變化pH條件下的生長和產(chǎn)酸行為,得出了熱帶假絲酵母菌最佳生長pH值為5.0,最佳發(fā)酵pH值為7.5的指標參數(shù).依據(jù)試驗結果,分析指出體系中一定濃度的糖存在,可以抑制β-氧化和α-氧化,控制合適的糖濃度,二元酸的產(chǎn)量有所提高,結果得出糖濃度為3％時,產(chǎn)酸效果最好.通過搖瓶試驗,發(fā)現(xiàn)在產(chǎn)酸期補料對產(chǎn)酸有相當?shù)挠绊?進入產(chǎn)酸期24h和72h時補加糖,對產(chǎn)酸有一定的促進作